基于 LC-MS/MS 的囊性纤维化患者痰液中抗生素浓度监测方法开发

抗生素治疗是囊性纤维化 (CF) 治疗的基石。 然而，很少有研究关注 CF 患者肺部分泌物中达到的实际浓度。 由于导致肺功能加速下降的病原体主要存在于肺分泌物中，因此许多医生现在对这些数据很感兴趣。 因此，研究人员开发并验证了一种液相色谱串联质谱 (UPLC-MS/MS) 方法，用于量化 CF 患者痰液中静脉注射的 β-内酰胺类抗生素头孢他啶、哌拉西林和美罗培南，以及吸入的氨曲南。 除了拥有经过验证的分析方法外，样品采集和样品制备也需要标准化，以确保准确的浓度测量。

在该试验中，使用接受其中一种静脉内抗生素治疗的患者的痰液研究了可能导致痰液浓度测量偏差的三个因素。

第一个因素是气雾剂的使用。 由于囊性纤维化患者经常使用气雾剂，例如高渗盐水、Ventolin 或 Pulmozyme，因此可以预期会稀释痰液中的抗生素。 在收集痰液进行抗生素浓度测量时，可能需要考虑患者使用气雾剂的时刻。 为研究气雾剂使用引起的浓度变化的程度和持续时间，在气雾剂使用前和气雾剂完成后立即以及气雾剂完成后 30 分钟、1 小时和 2 小时收集痰样，收集更多样本。

第二个因素是一份痰液样本中抗生素的同质性。 痰样本通常具有异质性外观。 为了调查抗生素的分布是否也存在异质性，将比较同一痰液样本的多个等分试样的浓度。 将测试五个等分试样，并将剩余的痰液均质化并进行分析。

第三个因素是在自体引流期间收集的几个痰样本之间的变异性。 由物理治疗师主持的引流过程大约需要 30 分钟，目的是尽可能松动和去除粘稠的肺部分泌物。 可以假设在引流过程中自发咳出的痰来自肺的不同部位。 为了验证抗生素是否均匀或不均匀地分布在肺部，在引流过程开始、中间和结束时收集痰液样本。 将比较 3 个独立痰液样本中的抗生素浓度。

来自这 3 项测试的数据将允许标准化关于气溶胶治疗和自体引流的样本收集时间点，以及评估是否需要对收集的样本进行均质化。