LC-MS/MS alapú módszerfejlesztés cisztás fibrózisos betegek köpetében lévő antibiotikum-koncentráció monitorozására

Az antibiotikum-terápia a cisztás fibrózis (CF) kezelésének sarokköve. Ennek ellenére kevés kutatás összpontosít a CF-betegek tüdőváladékában elért tényleges koncentrációkra. Mivel a tüdőfunkció gyors csökkenését okozó kórokozók elsősorban a tüdőváladékban találhatók, sok orvost érdekelnek ezek az adatok. Ezért a kutatók kifejlesztettek és validáltak egy folyadékkromatográfiás tandem tömegspektroszkópiás (UPLC-MS/MS) módszert a CF-betegek köpetében az intravénásan beadott béta-laktám antibiotikumok, a ceftazidim, piperacillin és meropenem, valamint az inhalált aztreonám mennyiségi meghatározására. A validált analitikai módszer mellett a mintavételt és a minta-előkészítést mint kutat szabványosítani kell a pontos koncentrációmérés érdekében.

Ebben a vizsgálatban három olyan tényezőt vizsgáltak, amelyek torzítást okozhatnak a köpetben a koncentráció mérésében, olyan betegek köpetének felhasználásával, akik IV antibiotikumokkal kezeltek.

Az első tényező az aeroszolhasználat. Mivel a cisztás fibrózisos betegek gyakran használnak aeroszolokat, például hipertóniás sóoldatot, Ventolint vagy Pulmozyme-ot, az antibiotikumok felhígulására lehet számítani a köpetben. Valószínűleg figyelembe kell venni azokat a pillanatokat, amikor a betegek aeroszolt használnak, amikor a köpetet összegyűjtik az antibiotikum-koncentráció mérése céljából. Az aeroszolhasználat által kiváltott koncentrációváltozás mértékének és időtartamának vizsgálatához köpetmintát veszünk az aeroszolos használat előtt és közvetlenül az aeroszol befejezése után, valamint 30 perccel, 1 órával és 2 órával az aeroszol befejezése után további mintákat veszünk.

A második tényező az antibiotikumok homogenitása egy köpetmintában. A köpetminták általában heterogén megjelenésűek. Annak vizsgálatára, hogy az antibiotikumok eloszlása ​​is heterogén-e, összehasonlítjuk ugyanazon köpetminta több aliquot mennyiségének koncentrációját. Öt alikvot részt megvizsgálnak, és a maradék köpetet is homogenizálják és elemzik.

A harmadik tényező az autogén drenázs során gyűjtött több köpetminta közötti eltérés. Egy gyógytornász által vezetett drenázs körülbelül 30 percet vesz igénybe, és célja a vastag tüdőváladék fellazítása és eltávolítása, amennyire csak lehetséges. Feltételezhető, hogy a drenázs során spontán köpött köpet a tüdő különböző részeiből származik. Annak ellenőrzésére, hogy az antibiotikumok homogén vagy heterogén eloszlása ​​a tüdőben, köpetmintát veszünk a drenázs elején, közepén és végén. Összehasonlítjuk a 3 különálló köpetmintában az antibiotikum-koncentrációkat.

Az ebből a 3 tesztből származó adatok lehetővé teszik a mintavétel időpontjának standardizálását az aeroszolos terápia és az autogén drenázs tekintetében, valamint annak értékelését, hogy szükséges-e az összegyűjtött minták homogenizálása.