备孕期间的生活方式干预 (LIPP)

具体目标 1：研究准备怀孕期间生活方式干预 (LIPP) 对母婴代谢和肥胖的生理意义。

简介/基本原理：我们的初步数据表明，有监督的生活方式干预可显着减轻体重，改善胰岛素敏感性、葡萄糖耐量和肠促胰岛素分泌，并使超重和肥胖的成年人的心血管和身体成分更健康。 我们预计建议的生活方式干预的时机和实施将对计划第二次怀孕的超重/肥胖女性产生类似的健康益处，并导致更高的胰岛素敏感性、减少胰岛素分泌和更少的炎症。 这些改进将导致防止过量的营养物质可用性（葡萄糖和脂质）导致胎儿过度生长/肥胖。 该目标的工作假设是，与 GWG 相比，肥胖母亲的孕前胰岛素敏感性降低是婴儿脂肪堆积的最大临床差异。 虽然临床上我们预计 LIPP 组体重和 BMI 会下降，但胰岛素敏感性和代谢特征的改善是与减少新生儿肥胖的主要结果相关的关键生理指标，而不是体重减轻本身。

其基本原理是，实施生活方式干预的最佳时间是在怀孕前，以在生理、细胞和分子水平上有效改善孕产妇健康，并使婴儿达到最佳肥胖状态。 产后体重减轻的女性在随后的妊娠中会出现新生儿出生体重（主要是脂肪组织）下降，而体重增加的女性则会出现新生儿出生体重和肥胖的增加。 我们假设母体孕前代谢状况决定了致肥胖的子宫内环境，进而影响线粒体和脂质通路的胎盘编程（特定目标 2）以及婴儿的身体成分。 另一个基本原理是需要了解改善的孕前代谢状况如何影响母体生理和分子功能。 我们预计，完成 LIPP 计划的肥胖女性在怀孕期间将改善胰岛素调节的新陈代谢并降低胰岛素抵抗，从而促进较低的新生儿出生体重和肥胖。 我们将招募在 MHMC 分娩第一个孩子的母亲。 我们认识到，这些母亲所代表的人群无法获得有助于空闲时间锻炼的锻炼设施或家庭支持系统。 为了减少参与障碍，我们将在当地的社区娱乐中心举办炼功活动。 这些中心有托儿设施，我们将支持费用，以便参与者可以带他们的孩子参加 LIPP 课程。 为了进一步增加参与度并最大限度地提高保留率，我们将提供往返娱乐中心的交通服务。 克利夫兰山将请求交通支持。 西奈基金会。 生活方式干预减肥阶段：LIPP 计划旨在促进体重减轻 5-10%。 为期 4 个月的减肥阶段包括有氧运动训练以及饮食和行为咨询，以诱导体重减轻，这在之前的研究中已成功实现。 最初，受监督的运动将规定为 HRmax 的 55-60%，并逐渐增加，以便在 1-2 周后，受试者以 HRmax 的 75-85%（~65-70% VO2max）运动。 监督锻炼将包括在跑步机上步行/慢跑和固定骑自行车，每周 3 天，每次 60 分钟（即，500 卡路里/次）。 女性将在每次锻炼期间佩戴心率 (HR) 监测器（Polar Electro，Woodbury，NY），以便她们获得个性化目标心率目标的视觉反馈。 建议参与者减少约 500 kcal/d 的热量摄入，以支持他们的减肥目标。 推荐的饮食将提供约 55% 的碳水化合物热量，25% 的脂肪热量和 20% 的蛋白质热量。 将指导参与者食用复合碳水化合物并避免单糖。 具体热量需求将通过间接量热法和久坐 (x1.3) 身体活动校正因子进行估算。 将使用食物照片日记应用程序 Meal Snap 估算能量摄入量。 数码摄影可以很好地估计能量摄入量 (67)。 没有智能手机的参与者将通过克利夫兰基金会的支持获得一部。

涵盖 72 小时饮食期的记录将与研究团队共享，以确定卡路里和营养摄入量。 Meal Snap 拥有超过 350,000 项的食品数据库。 但是，有些膳食不会在此数据库中，因此我们的生活方式教练会将所有食用的食物输入我们的饮食数据库（NDSR，明尼阿波利斯，明尼苏达州）以促进卡路里和宏观/微量营养素摄入量的分析。 受试者将生成餐前和餐后的照片，以估计所吃的食物量。 数据将在基线处获取，并在最初的 16 周监督减肥期间每隔 2 周获取一次。

生活方式干预 - 体重管理/维持：孕前体重管理计划（2A、2B 和 2C 阶段）旨在通过包括锻炼、饮食和行为改变在内的生活方式行为促进个性化减肥目标，部分基于Look AHEAD 试验。 该干预包括一个工具箱概念，以帮助实现减肥目标。 生活方式教练将提供有关身体活动/锻炼的个性化指导 - 每天 10,000 步，参与者将使用 FitBit Flex (Fitbit.com) 来跟踪步数和锻炼时间。 在维持体重的第一阶段 (2A)，女性每周将参加 2 次受监督的小组会议。 这些课程包括结构化锻炼（例如尊巴舞、爵士舞、婴儿车散步）、查看饮食照片记录、用餐地点（在家或外出；记录在智能手机应用程序上）以及行为咨询（通过他们的生活方式教练）。 如果体重低于 113 公斤，将鼓励参与者每天摄入 1,200-1,500 千卡（约 55% 碳水化合物、25% 脂肪、20% 蛋白质），如果体重 >113 公斤，则鼓励每天摄入 1,500-1,800 千卡。 在体重维持期间，将每隔 4 周分析一次饮食数据。 重要的是，为了最大限度地减少受试者负担并最大限度地保留和获取数据，生活方式教练将使用参与者的照片日记来跟踪卡路里摄入量。 激励健康生活方式决策的行为策略包括：自我监控（食物、活动和体重，使用 FitBit 在线资源）、目标设定（步数/天、减肥）、刺激控制（即社交饮食、快餐、久坐与站立）、解决问题（提供零食、在家锻炼）和预防复发（即假期、酒精、快餐、甜食、问题食物、强迫性饮食）。 4 个月并达到预期的体重减轻后，受试者进入 2B 阶段。 在此阶段，受试者保持 10,000 步/天的锻炼目标，但每周只需要参加 1 次监督会议。 如果受试者未能保持体重减轻（定义为体重增加当前体重的 3%），则参与者将返回 2A 阶段以进行更多监督的体重管理。 或者，如果体重减轻在 3 个月后保持不变，则受试者将进入 2C 阶段，直至下一次怀孕。 2C 阶段不包括任何受监督的锻炼课程。 然而，受试者和生活方式教练将每周通过电话交谈以审查进展情况，包括 Fitbit 运动数据和饮食。 数据表明，通过电话提供的体重管理计划与临床提供的计划相当。 在电话会议期间，将建议参与者继续按照 2B 阶段规定的强度和持续时间进行锻炼。 他们将获得特定语言的食物和运动日志。 这些将用于指导卡路里摄入量，并将提供另一份合规记录。 与 LIPP 营养师 (HB) 不同的是，被随机分配到对照组的参与者将从 CRU 营养师那里获得有关怀孕后饮食/减肥的信息，以减少组间交叉污染。 怀孕期间的体重管理：所有 LIPP 和常规护理/对照组将由他们的主要产科提供者进行跟踪。 MHMC 的妇产科最近根据 2015 年 12 月的 ACOG 实践公告 (2) 修订了超重/肥胖女性管理的临床指南。 MHMC 营养部的注册营养师将在妊娠早期为所有超重/肥胖妇女提供营养咨询，并根据需要进行随访，以在 IOM 指南范围内支持 GWG。 营养疗法将考虑母体孕前 BMI、种族、文化和社会因素，以个性化健康饮食。 电子健康记录 (EPIC) 包括图形 GWG 列线图，因此每次就诊时都会监测 GWG。 将鼓励所有受试者增加至少 30 分钟/天的身体活动（主要是步行）。 临床管理，例如估计胎儿生长的超声波和胎儿监测将基于 ACOG 的建议。 生活方式教练将仅继续跟进研究设计维护阶段中描述的 LIPP 受试者。

代谢评估：代谢评估将在产后基线（3 个月至 2 周）时进行。 后续评估将在 4（+/-2 周）和 12 个月（+/-2 周）后进行，然后在怀孕前每 6 个月（+/-2 周）进行一次，最多 24 个月。 一旦受试者通过超声确认了怀孕日期和生存能力，将在妊娠 12-16 周和 32-36 周继续进行代谢评估。

孕妇身体成分：人体测量值将包括身高、体重以及臀围和腰围。 全身脂肪将通过全身体积描记术（Bod Pod；Cosmed，罗马，意大利）测量。 我们将使用 76% 的水合常数来计算妊娠晚期的无脂肪质量。

静息能量消耗：静息代谢率 (RMR) 将在禁食一夜后使用带有顶棚系统的 Cosmed OMNIA 代谢推车（Cosmed，意大利罗马）测定。 我们将通过在 CRU 的测试前一晚提供标准化的能量平衡膳食来控制饮食。 参与者将在一个安静的低光代谢室中放松 30 分钟，然后再测量 30 分钟的呼气量。 将估计氧化和非氧化葡萄糖代谢，并在测量前后获取尿样，以计算非蛋白质 RQ (NPRQ)。 这些数据将与特定目标 2 结合使用，并将与怀孕期间线粒体功能的变化相关联。

运动能力：将在两组的基线、4 和 6 个月时间点进行增量分级跑步机测试。 耗氧量（Jaeger OxyCon Pro/Delta System, Hoechberg, Germany）、心率和感知用力等级将如前所述进行。

胰岛素敏感性和 β 细胞 功能：将使用 75 g 口服葡萄糖耐量试验 (OGTT) 评估餐后血糖、胰岛素敏感性和分泌。 禁食过夜后，将在前 60 分钟内以 10 分钟的间隔抽取血样，此后以 20 分钟的间隔抽取血样。 C 肽数据将使用组合模型方法进行分析，以提供肝前胰岛素分泌率、胰岛素敏感性、处置指数以及相关的胰岛素和 C 肽动力学 (73)。 将使用葡萄糖氧化酶法（YSI；Yellow Springs，OH）测量血浆葡萄糖。

胰岛素将通过 RIA (Millipore, Billerica, MA) 进行分析。 GDM 的诊断将使用 ACOG (74) 推荐的标准进行。

肠岛轴反应：将获得血浆样本（带有适当的添加剂）以测量肠促胰岛素激素（胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)、葡萄糖依赖性促胰岛素多肽 (GIP) 和饱腹感相关肠肽（胆囊收缩素 (CCK)和肽 YY (PYY)。 将在静态（禁食）和动态（葡萄糖刺激）条件下（10 分钟间隔至 1 小时）进行测量。

代谢和炎症生物标志物：将获得空腹血样以测量 CBC、TSH、HbA1c、脂质组和总游离脂肪酸 (FFA)。 脂肪细胞因子（脂联素、瘦素白细胞介素 6、白细胞介素 8、TNF-α 和 hsCRP）将使用 ELISA（R&D Systems，Minneapolis，MN）测量。 每个受试者的所有样本都将储存在 -80oC 下，并在完成时在相同的测定中运行以减少变异性。

生活质量问卷：SF-36 健康调查将在基线、4 个月和 12 个月时使用，然后每隔 6 个月使用一次，直到怀孕，以评估受试者与健康相关的生活质量。 这些数据将通过评估身体机能、身体疼痛、身体、个人或情绪问题以及幸福感、精力/疲劳和一般健康观念造成的限制，提供身心健康的通用衡量标准。 在怀孕期间，调查问卷将在 12-16 周和 32-36 周进行。

测量婴儿的脂肪量：我们在估计新生儿身体成分方面拥有丰富的经验，并且是首批采购 Pea Pod（儿科空气密度测定法）的中心之一，该设备位于 CRU 中，紧邻分娩和产后检查室单元。

出生时的胰岛素抵抗：出生时，我们将获得用于胰岛素和葡萄糖的脐带血，以使用 HOMA 估计胰岛素抵抗。 如上所述，将在脐带血中测量完整的脂质谱、CRP 以及脂肪因子 IL-6 和瘦素（新生儿脂肪量的极好标志物）。

预期结果、挑战和替代方法：

该提案的主要结果指标是 LIPP 组出生时新生儿肥胖率相对于：1) 对照组和 2) 受试者的长子。 作为次要结果，我们预计在下次怀孕之前，LIPP 将显着改善产妇体重和身体成分（绝对和百分比变化），更重要的是改善胰岛素敏感性、β 细胞功能、肠促胰岛素对葡萄糖、脂质和炎症的反应生物标志物，与对照组相比。 与对照组相比，我们还预计 LIPP 所生婴儿的胰岛素抵抗、脐带血脂和炎症特征会降低。

招募是成功实施和完成生活方式干预试验的公认问题。 然而，鉴于上面详述的新招募策略、我们对患者群体的独特访问以及我们在妊娠代谢研究方面的丰富经验，我们预计招募不会带来无法克服的挑战。 我们将在前 4 年招募 200 名受试者，并根据建议的时间表完成所有母婴评估。 如有必要，我们将从克利夫兰诊所和大学医院招募受试者，这两家医院均隶属于凯斯西储大学 (CWRU)。 保留策略包括参加锻炼课程的免费交通、生活方式课程期间的免费托儿服务和生活方式教练的咨询、手机应用程序以减轻受试者输入数据的负担、定期电话联系和经济激励，包括分娩时的婴儿汽车座椅.

在我们之前针对超重和肥胖人群的代谢研究和生活方式干预研究中，我们的团队在留住孕妇方面取得了显著成功 (48,64)。 在当前的提案中，还制定了其他策略来最大限度地提高保留率并最大限度地减少辍学率。 这些包括来自生活方式教练的电话和电子邮件，以审查和加强糖尿病预防计划参与者所描述的问题解决和自我监控技能。 我们还会建立好友系统，每个参与者都可以成为另一个参与者的好友，两个好友可以一起做饭、一起运动、分享问题等。 伙伴系统培养了这样一种感觉，即留在研究中不仅对个人的健康很重要，对伙伴的健康也很重要。 如果 LIPP 计划中的受试者没有达到他们的目标减肥目标，我们将使用 CRU/CTSC 代谢厨房的资源实施代餐策略，并注意母亲依赖母乳喂养的热量和营养需求。 并非所有参与者都会怀孕。 由于主要结果是新生儿肥胖，未怀孕的受试者将不包括在主要分析中，但将包括在与孕前代谢改善相关的次要分析中。 通过招募以前怀孕过的女性，不孕症的风险会大大降低。 我们预计大约 20% 的女性将经历自然流产，但她们将被允许继续并恢复之前参加 LIPP 或对照组的经历。 我们预计大约 25% 的受试者会在怀孕前退出，另外 15% 的受试者可能会在怀孕期间退出。 我们将在每组中招募 100 名受试者，以应对不太可能发生的 40% 辍学事件。 采用更严格的策略，我们报告统计能力可用于每组低至 50 名受试者，作为最坏的情况。 如果保留滞后于预测，我们将在 MHMC 和 CWRU 附属医院招募更多受试者。 CRU 工作人员将协助在分娩时收集脐带血和胎盘，并执行 Pea Pod 身体测量。 如果 Pea Pod 设备出现故障，我们将使用新生儿人体测量学来估计身体成分。

虽然 LIPP 受试者将被鼓励推迟第二次怀孕，直到他们处于该计划的维持阶段，但我们将排除 LIPP 受试者，前提是他们在前 4 个月的体重减轻阶段怀孕。 对于对照受试者，如果受试者在 3 个月的产后 CRU 随机访问之前怀孕，将被排除在外。 在此阶段使用避孕措施是一项纳入标准。 在 4 个月的减肥干预后，并非所有 LIPP 受试者都会在相似的时间受孕。 我们不会调整 LIPP 和控制对象之间的怀孕间隔时间。 我们将在怀孕前在 CRU 中的最后一次代谢评估中使用 LIPP 和对照受试者的代谢状态（身体成分、胰岛素敏感性和反应等）作为其随后怀孕的孕前或基线状态。 因为这是一项只招募女性的妊娠研究。 然而，我们将根据性别共同和独立地评估 LIPP 对雄性和雌性后代的影响。

统计方法：

具体目标 1a 的主要分析将是 LIPP 和对照组在母体胰岛素敏感性、BMI 和脂肪量变化方面的意向治疗比较。 将首先使用 p=0.05 的双样本 t 检验进行比较。 如果识别出组中混杂因素的任何不平衡，包括显着差异的线性回归模型（例如 GDM) 将用于执行协变量调整。 根据我们 1 年的产后随访研究 (62,63)，我们将有 90% 的功效检测胰岛素敏感性的绝对或协变量调整改善 30%，并有 80% 的功效检测小至 25% 的改善LIPP 中的百分比 控制组。 将报告组间胰岛素敏感性的绝对或协变量调整差异或百分比改善的相应 95% 置信区间 (95% CI)。 我们估计从随机分组到随后怀孕期间 BMI 变化的标准差 (SD) 为 5.1 kg/m2。 我们将有 90% 的功效来检测 2.6 kg/m2 的 BMI 绝对或协变量调整差异，80% 的功效来检测 2.26 kg/m2 的差异，90% 的功效来检测脂肪的绝对或协变量调整差异5.9 kg 的质量和 80% 的功效检测第二次怀孕前组间 5.1 kg 的差异。 特定目标 1b 的主要分析是 LIPP 新生儿与对照新生儿在出生时脂肪量方面的意向治疗比较。 将使用 p=0.05 的双样本 t 检验进行比较。 将进行线性回归，其中将包括受试者的第一个孩子的体重（身体成分测量）作为协变量。 如果识别出组中混杂因素（例如孕龄）的任何不平衡，将使用线性回归模型进行协变量调整。 根据我们的初步数据，我们估计 LIPP 组和对照组之间新生儿脂肪量的 SD 不超过 225 克。 每组至少有 50 名女性（假设 50% 的辍学率），t 检验或线性回归将有 90% 的功效来检测组间 146 克脂肪量的绝对差异或协变量调整差异。 我们有 80% 的能力来检测组间小至 126 克脂肪量的绝对或协变量调整差异。 将报告组间新生儿脂肪量的绝对或协变量调整差异的相应 95% CI。 对于二次分析，我们将使用相同的统计方法。 根据我们的初步数据，我们估计出生体重的标准差为 700 克；每组有 50 个新生儿，我们将有 90% 的能力检测出生体重 455 g 的绝对或协变量调整差异，80% 的能力检测组间 393 g 的差异。 额外的二次分析将包括脐带细胞因子。 比较将使用双样本 t 检验进行，显着性水平为 p = 0.05；但是，如果数据不是正态分布的，则将采用 Mann-Whitney U 检验或对数变换。 包括混杂因素在内的线性回归模型将用于执行协变量调整。 根据我们公布的数据 (80)，我们估计脐带 IL-6 和 CRP 的标准偏差分别为 3.4 pg/ml 和 7,900 ng/ml。 每组有 50 名女性，我们将有 90% 的功效检测 IL-6 和 CRP 水平提高 50% 和 42%，并且有 80% 的功效分别检测 42% 和 36% 的改善。

具体目标 2：确定怀孕前开始的生活方式干预可以改善胎盘线粒体脂质氧化和积累的分子效应。

简介/理由：我们的数据表明，在肥胖女性中，妊娠早期胎盘组织中存在线粒体缺陷，抑制胎盘脂肪酸氧化的能力并将脂肪酸分流到酯化途径和脂质积累，可能导致营养物质可用性增加胎儿和足月肥胖。 我们的小组已经表明，其他线粒体过程，例如胆固醇转运和类固醇生成，在足月的肥胖、胰岛素抵抗妇女的胎盘中受损。 胎盘线粒体含量（通过线粒体 DNA 和柠檬酸合酶活性评估）不受母亲肥胖和足月胰岛素抵抗的影响，表明观察到的功能缺陷是由于线粒体活性的变化，而不是数量的变化。 之前在怀孕期间开始的饮食干预无法改变胎盘β-氧化或胎儿脂肪沉积，这可能是因为干预是在胎盘线粒体功能受损后开始的。 我们预计 LIPP 将改善胎盘线粒体脂肪酸氧化，这将在足月时测量并与较低的脂肪酸酯化和积累以及新生儿脂肪量相关。 假设是肥胖母亲的胰岛素敏感性降低和炎症环境增加会损害发育中的胎盘中的线粒体β-氧化。 正是在妊娠早期开始的胎盘代谢变化导致了营养输送的改变和胎儿脂肪沉积的增加。 我们的理由是基于需要了解胎盘脂质代谢的变化如何介导妊娠前代谢改善对新生儿肥胖的影响。 我们预计 LIPP 计划中肥胖女性的胎盘将在足月时显示出改善的脂肪酸氧化和减少的脂质酯化和积累。 此外，我们预计这些变化将与孕早期较低的母体炎症和胰岛素抵抗以及足月时较低的新生儿肥胖相关。

预期结果和终点：我们预计，与对照组相比，LIPP 女性的胎盘将：1) β-氧化增加，2) 脂肪酸酯化减少，3) 脂质含量降低，4) 线粒体 CPT1B 活性增加， α-氧化中的限速酶和更高的磷 ACC，当磷酸化时，丙二酰辅酶 A 是 CPT1B 的主要抑制调节剂，并且 5) 线粒体含量没有差异（通过线粒体 DNA 和柠檬酸合酶活性测量） . 我们还预计线粒体 β-氧化和 CPT1B 活性将与早孕母体血清炎症细胞因子标志物和胰岛素抵抗以及新生儿肥胖呈负相关。

实验设计：我们将通过测量参加特定目标 1 中所述的对照组或 LIPP 组的女性胎盘线粒体酶活性和脂质代谢的变化来实现特定目标 2 的目标。胎盘组织将在分娩时从所有研究参与者和石蜡包埋，或液氮速冻，-80℃保存用于分子分析。 在按计划剖宫产分娩的一部分妇女中（我们估计约 30% 的参与者或 N=15-18/组），我们还将收集新鲜胎盘组织用于脂质代谢活性测定。

胎盘脂质代谢：这些测定在 O'Tierney-Ginn 实验室中得到了很好的建立。 线粒体脂肪酸氧化 (FAO) 和酯化成总脂质测定将在胎盘外植体中进行，如前所述，并进行一些修改。 将新鲜分离的胎盘外植体在 100 μM 冷棕榈酸酯和 3H-棕榈酸酯 (Moravek Radiochemicals) 存在下孵育 18 小时。 在孵育期结束时，将收集培养基以通过使用休斯的气相平衡法检测 3H2O 来量化 FAO 率。 通过在 HPLC 级丙酮中将处理过的外植体均质化并在室温下搅拌孵育过夜来确定酯化为总脂质。 丙酮提取脂质悬浮液的等分试样将用于通过液体闪烁计数确定放射性含量。 氧化和酯化速率将定义为 nmol 棕榈酸酯/mg 组织/hr。

胎盘线粒体的评估：线粒体将如前所述从冷冻的胎盘组织中分离出来。 脂质氧化 (CPT1B) 和合成/酯化 (磷酸化 ACC) 活性的标记物将使用市售试剂盒 (Cell Signaling, Abcam) 在所有样品的分离线粒体中进行测量。 如前所述，将在所有样品的整个胎盘组织中测量线粒体含量的标记物（mtDNA 和柠檬酸合酶活性）。

胎盘脂质积聚：将使用 Folch 方法测量总胎盘脂质含量。

预期的挑战和备选方案：1) 我们将仅使用通过预定剖宫产分娩的胎盘进行体外氧化和酯化测定，以避免与分娩有关的变化。 在我们医院，肥胖女性的剖宫产率约为 40%。 我们保守估计 40-50% 的辍学率随后 30% 的受试者通过剖腹产分娩，导致 N=15-18/组。 根据我们的初步数据，这将使我们有足够的能力检测 LIPP 引起的胎盘脂质代谢差异。 我们将从所有研究参与者那里收集胎盘样本用于线粒体酶活性测定，为我们提供更多参与者的代谢活动的额外评估。 2) 胎盘线粒体脂肪酸氧化能力可能受线粒体数量、氧化磷酸化活性和能量效率（耦合）的影响。 评估线粒体氧化磷酸化能力或能量效率需要新鲜分离的线粒体和/或活细胞，就我们的建议而言，考虑到分娩的不可预测性和大量参与者，这将过于雄心勃勃且成本高昂。 或者，我们将测量所有胎盘样本中线粒体含量的标记物和线粒体脂质代谢中的关键酶，以评估胎盘脂肪酸氧化变化的一些潜在机制。 此外，从所有胎盘收集的冷冻样品可用于测量参与电子传输的酶（例如，ATP 合成酶）作为线粒体氧化磷酸化的标记。

统计分析：目标 2 的主要目标是确定妊娠前生活方式干预对足月胎盘线粒体脂肪酸氧化的影响。 我们假设胎盘β-氧化在 LIPP 组中会更高。 我们将使用两个样本 t 检验或非参数 Wilcoxon 秩和检验进行意向治疗分析，以评估组间差异。 回归分析将用于评估胎盘β-氧化和酶活性与妊娠早期母体炎性细胞因子水平和胰岛素抵抗的关联，以及新生儿脂肪量与胎龄和性别的调整。 将计算所有变量的描述性统计数据，例如均值、中值和范围。 基于我们在肥胖女性中的初步线粒体 β-氧化数据 (38?14 nmol/mg/hr) 的功效和样本量分析表明，N=18/组的样本量达到 80% 的功效来检测 25% 的差异组使用显着性水平为 0.05 的双样本 t 检验。