巴基斯坦年轻人早发性冠状动脉粥样硬化研究 (PAKSEHAT)

研究目标 PAK-SEHAT 的主要目标是：1) 描述没有临床 CVD 的巴基斯坦中青年男性和女性中亚临床冠状动脉粥样硬化的患病率和严重程度，以及 2) 了解其影响，在 5- CVD 事件的年发生率，使用 CCTA 提供的预后信息以及其他研究测试和测量来优化巴基斯坦中青年成年人的心血管预防管理。该研究的次要目标是 1) 确定患病率在没有临床 CVD 的巴基斯坦中青年男性和女性中已知和未知的糖尿病、高血压、血脂异常和其他心血管危险因素； 2) 确定该人群中亚临床冠状动脉粥样硬化的决定因素； 3) 估计随访5年时糖尿病、高血压、血脂异常和其他心血管危险因素的发生率； 4) 确定年轻无症状巴基斯坦人中发生临床 CVD 的独立危险因素和标志物； 5) 制定 5 年风险评分，用于预测巴基斯坦中青年男性和女性的 CVD 事件。

研究设计 PAK-SEHAT 是一项持续的、基于社区的观察性前瞻性队列研究，目标研究人群为 2,000 名参与者，计划在研究入组后进行 5 年的前瞻性随访。

研究人群调查人员计划招募 2,000 名没有已知临床 ASCVD 的年轻至中年成年巴基斯坦男性和女性。 由于本研究的重点是调查巴基斯坦成年人早期冠状动脉粥样硬化的患病率、严重程度和决定因素，因此重点将放在表面上健康（即没有已知的临床 CVD）的中青年巴基斯坦本土人身上。 此外，由于早发冠状动脉事件在男性中比女性更频繁且通常在更年轻的年龄观察到，因此入组男性参与者的年龄范围为 30-45 岁，而女性参与者为 45-55 岁；招生将采用 3:1 的男女比例。

抽样策略：PAK-SEHAT 旨在尽可能代表巴基斯坦一般人口，并将使用多阶段整群抽样策略来确定参与研究的候选人。 集群被定义为联盟委员会 (UC)，这是巴基斯坦政府定义的最小的行政区划，每个区约有 30,000 人。 抽样过程的第一阶段发生在省一级，这是该国最大的行政区划，参与者将从巴基斯坦所有四个省和伊斯兰堡联邦领土招募。 接下来，将选择地区，并在这些地区中选择 UC。 使用该国最新的人口普查数据，将从每个省选出一个地区。 分层抽样将使用巴基斯坦政府宣布的农村和城市比例进行。 各地区的抽样将根据其农村和城市分布进行分层，这应能代表全省的农村/城市比例。 在每个区内，将根据便利性选择一个城市和一个农村 UC。 UC 内的家庭将通过系统抽样进行选择。 抽样间隔将使用有关人口规模的人口普查数据和每个 UC 的所需样本来计算。 最后一个阶段是从每个家庭中选择参与者。 每个人只允许一名成员参加。

参与者登记 基于社区的上门调查将是农村和城市地区参与者招募的主要方法。 然而，关键的第一步是确定选定区域/社区的当地利益相关者。 研究团队将安排与这些领导人的会面，向他们通报这项研究，并获得他们与当地社区合作的支持。 一旦参与，将要求这些领导者帮助传播研究并联系个别参与者以进行注册。 确定和招募合格参与者时的另一个重要资源是政府一线卫生工作者，称为女士卫生工作者。 这些是该地区的居民，他们的主要职责是提供预防性保健并促进妇女、男子和儿童的健康。 他们保留居住在其行动区域的居民的日志，可以作为识别和接触潜在参与者的良好资源。

在收到潜在参与候选人的名单后，研究人员将访问这些人的家庭，并使用结构化问卷筛选他们的资格。 被认为有资格参加该研究的个人将获得有关该研究的详细信息，被邀请提问，并被要求提供参与的书面知情同意书。 如果潜在参与者不识字，则在家庭成员在场的情况下，将向参与者宣读同意书，并取拇指印表示同意。 家庭成员将作为见证人，并在同意书上提供签名或拇指印记（视情况而定）。

除前 100 名参与者外，所有参与者都将在移动健康设置中接受研究测量。 前 100 名参与者将来自信德省市区，并将在研究医院进行测量，以预演研究程序。 它将帮助我们确定研究流程中的挑战并在开始移动设置之前纠正它们。 对于其他参与者，测量将在移动健康设置中进行。

同意后，将询问参与者方便的时间访问将用于在这些地区收集数据的移动医疗设施。然后，研究小组将在约定的时间访问参与者的家庭并将他们带到移动设置。 参与者将一次 4-5 人一组，以有效利用工作时间和运输资源。

基线评估 一旦注册，所有参与者都将接受一套全面的基线评估，其中一些将在研究随访期间使用相同的方法重复进行。

研究访谈和问卷调查。 参与者将接受训练有素的研究人员的采访。 将使用结构化问卷收集社会人口统计数据以及有关过去和现在的病史、家族史、生活方式的信息。

血压和踝臂指数 (ABI)。 将使用 DINAMAP 监测器（通用电气）测量每位参与者的收缩压和舒张压，参与者以舒适的姿势坐 5 分钟。 将读取三个读数，它们的平均值将用于后续分析。 还将测量参与者手臂和腿部的卧位血压，并计算踝臂指数。

人体测量学和身体成分。 高度（厘米）将通过安装在墙上的卷尺测量。 身体成分将使用 Tanita-MC-780 U 身体成分分析仪进行分析。

血液测量和遗传学。 受过训练的研究人员将从每位参与者身上抽取大约 30 mL 的静脉血。 大约 10 mL 的血液将被存入生物样本库并储存在 -80C 下，以供将来进行额外的研究，包括基因检测。 后者将包括但不限于检测 ApoE 基因型（关于心脏病风险和对膳食脂肪量的反应的信息）、9p21 基因型（早年患心肌梗死和 CAD 的风险）、KIF6 基因型（患心脏病和使用他汀类药物减少 MACE）、LPA Intron 25（心脏病风险增加）、4q25 A-Fib 基因型（心房颤动风险和因心房颤动引起的中风风险）。 对于不同意进行基因检测的参与者，他们的 10 mL 生物样本库血液可用于非基因分析，但不能用于涉及基因检测的研究。

心脏 CT 扫描。 参与者将首先接受非对比增强心脏 CT 冠状动脉钙 (CAC) 评分，然后进行对比增强 CCTA。 将使用东芝 Aquilion 多层 CT 扫描仪和前瞻性心电图触发。 研究人员将在 CT 扫描前对参与者进行评估，如果心率高于 65 bpm，将使用 β 受体阻滞剂（或伊伐布雷定，如果禁忌）进行预处理，以达到 ~60 bpm 的目标心率。 在 CCTA 扫描前约 3 分钟，将按照标准方案给予舌下含服硝酸甘油，并根据参与者的体质以 5.5-7 毫升/秒的速度静脉注射造影剂；对于普通患者，造影剂的剂量预计约为 60-80 毫升。 非对比增强图像将被转移到 Tabba 心脏研究所的心脏病学 CT 核心实验室，并由训练有素的放射科医生进行评估，他们将根据 Agatston 的方法量化 CAC。

颈动脉超声成像。 所有参与者都将接受颈动脉超声成像，以评估颈动脉斑块的存在和颈动脉内膜中层厚度 (CIMT) 评估。 这将使用东芝 Aplio 500 超声系统（日本 Otawara）通过双侧颈动脉自动测量进行评估，使用 B 型超声检查和 10 MHz 多频线性阵列换能器。 参与者将在仰卧位接受检查，并进行标准测量。

基线测试序列。 在移动设置中，首先参与者将接受 BP 测量、ABI、人体测量和身体成分分析，然后参与者将为 CCTA 做好准备。 为 CCTA 插管时将收集血液标本，然后进行 CCTA，然后进行颈动脉超声检查。

基线数据管理和质量研究数据将收集在平板电脑和其他数字平台上，并定期传输到中央服务器。 集中研究数据库将使用安全服务器存储在 Tabba 心脏研究所，数据隐私和机密性将始终受到保护。 出于质量控制目的，平板电脑中的数据收集应用程序将具有内置功能，以限制错误的数据输入和参与者反应记录的不一致。 此外，现场协调员将监督数据收集并抽查 5-10% 的访谈。 在中央研究数据库中，数据错误报告将每月生成一次，以监控完整性、无效值和响应中的不一致。 此外，将为预先确定的关键变量开发一个实时仪表板，以监控和评估项目的进度。

随访和事件确定 作为研究随访的一部分，将在基线后 12、30 和 60 个月（5 年）联系参与者。 除了在 30 个月和 60 个月时重复进行血液检查和影像学检查（表 2），在三次随访中的每一次随访中，都将使用问卷收集有关 ASCVD 结果的信息。 如果回答是肯定的，参与者将被要求提供额外的证据（例如 入院记录）以便确认事件。 ASCVD 事件将包括心肌梗死、不稳定型心绞痛、稳定型心绞痛、中风、短暂性脑缺血发作、冠状动脉血运重建和心血管死亡。

已发布的定义将用于定义这些事件中的每一个。 来自中央 PAK-SEHAT 裁决委员会且对研究测试结果不知情的两名独立心脏病专家将主要根据可用的医院文件将事件分类为确定的、可能的或不存在的。 他们还将根据医院记录（如果有）和与家属的口头尸检访谈，对与冠心病、心血管疾病或中风相关的死亡进行分类。 如果指定的 2 位专家在事件裁决中存在分歧，则第三位独立的医师裁决员将审查证据以打破平局。

随访 60 个月时的重复 CCTA 将用于评估冠状动脉斑块负荷的进展/消退。

统计分析 对于使用基线数据、心血管危险因素（已知、未知）的频率和分布、冠状动脉斑块负荷和其他关键基线变量的分析，使用分类变量的数量和频率 (%) 和均值（标准差）或中位数 (四分位数范围）对于正态和非正态分布的连续变量将被描述。 具体针对冠状动脉斑块特征，将CAC评分分为0、>0-<100、≥100，并报告CAC评分分布和各层比例。 关于 CCTA 结果，将以 95% CI 报告具有任何冠状动脉斑块的参与者比例和斑块亚型的分布。 研究人员还将分别报告最大冠状动脉狭窄≥50% 和≥70% 的频率，以及具有高风险斑块特征的参与者的比例。 还将描述有斑块的冠状血管数量分布、每个参与者受影响的冠状动脉节段数量以及冠状动脉斑块的位置（左主干、前降支、回旋支和右冠状动脉）。

在后续事件事件分析中，调查人员将使用标准生存分析和事件发生时间技术。 将计算主要和次要研究结果的 5 年累积发病率（以 % 表示）和每 1,000 人年的发病率（具有 95% CI）。 PAK-SEHAT 人群中的 ASCVD 事件发生率将与没有临床 ASCVD 且未包括在研究中的同年龄和性别的巴基斯坦人进行比较。

随访期间心血管危险因素发生率的分析将仅限于处于每个危险因素风险中的个体。

研究人员将使用 Cox 比例风险回归模型来评估重要基线特征与后续 ASCVD 事件之间的关联。