Antimalarická drogová rezistence v Kamerunu

Cíle této studie jsou:- .

• vyhodnotit terapeutickou účinnost amodiaquinu (AQ), Fansidaru (SP) a kombinace amodiaquinu/Fansidaru na třech lokalitách v Kamerunu, jmenovitě v Garoua (Sahel-savanna), Yaounde (Forest-Savannah mosaic) a Limbe (Littoral-forest)
• určit prevalenci molekulárních markerů spojených s rezistencí vůči chlorochinu, AQ a SP v Limbe a Garoua a meflochinu v Yaounde.
• zkoumat biologické faktory, které mohou zvýšit terapeutickou účinnost proti malárii. To bude zahrnovat průzkumnou, pilotní studii provedenou během druhého roku programu.

Pacienti budou rychle vyšetřeni na teplotu a odesláni do laboratoře k určení přítomnosti nebo nepřítomnosti parazitů malárie. Pacienti budou poté klinicky vyšetřeni pro zařazení nebo vyloučení. Souhlas bude vytříděn od rodičů a dětí randomizovaných a přidělených studijních čísel. Aby se předešlo zkreslení při přiřazování pacientů do skupin a zajistil se stejný počet v léčebných skupinách, bude provedena blokovaná randomizace s použitím tabulky náhodných proměnných různých velikostí bloků. Lékař je zaslepený tím, jakou léčbu pacient dostane.

Amodiaquin bude podáván v dávce 10 mg/kg každý ze tří dnů dětem v léčebné skupině AQ spolu s tabletami typu Fansidar. Fansidar bude podáván v dávce 25 mg/kg v den 0 a chinin jako záchranný lék v dávce 10 mg/kg za 8 hodin po dobu 6 dnů. V případě kombinace AQ/SP bude v den D0 pacientům podáváno 25 mg/kg SP a 10 mg/kg AQ. V následujících dnech bude podáván AQ nebo jeho fiktivní tablety (rameno SP).

Klinické hodnocení během studie bude zahrnovat: fyzikální vyšetření a monitorování vitálních funkcí v D0, D3, D7, D14 a D28. Hematologická měření budou zahrnovat: krevní filmy, hemoglobin, glukózu, hladiny léků v krvi a základní hematologii. Pacientům v Yaoundé budou odebrány maximálně 3 ml krve pro kompletní analýzy (viz níže). U pacientů přijatých v Limbe a Garoua budou získány pouze vzorky krevního filtračního papíru z prstu.

Vzorky krve v den 0 (3 ml) budou odebrány asepticky venepunkcí před terapií od každého z 50 pacientů v Yaoundé s použitím acid-citrát-dextrózového pufru (ACD) jako antikoagulantu. Ta bude zpracována tak, aby poskytla plazmu pro imunologická stanovení a pro hematologická stanovení a stanovení hladiny léčiv v krvi.

Molekulární charakterizace diverzity a mutací:

• genetická heterogenita studované populace bude stanovena pomocí primerů pro msp1 a msp2, které byly uvedeny dříve pro rozlišení mezi kmeny.
• Produkty PCR budou štěpeny restrikčním enzymem (RFLP-PCR) pro geny rezistence na pyrimethamin dhfr a dhps a pro kmeny genu pfcrtgen rezistentní na chlorochin.