Resistenza ai farmaci antimalarici in Camerun

Gli obiettivi di questo studio sono:- .

• valutare l'efficacia terapeutica di amodiachina (AQ), Fansidar (SP) e della combinazione amodiachina/Fansidar in tre siti in Camerun, vale a dire Garoua (Sahel-savana), Yaounde (mosaico foresta-savana) e Limbe (litorale-foresta)
• determinare la prevalenza di marcatori molecolari associati alla resistenza a clorochina, AQ e SP in Limbe e Garoua e di meflochina a Yaoundé.
• per indagare i fattori biologici che possono aumentare l'efficacia terapeutica anti-malaria. Ciò comporterà uno studio pilota esplorativo condotto durante il secondo anno del programma.

I pazienti verranno sottoposti a screening rapido per la temperatura e inviati al laboratorio per determinare la presenza o l'assenza di parassiti della malaria. I pazienti saranno quindi esaminati clinicamente per l'inclusione o l'esclusione. Il consenso sarà ordinato dai genitori e dai bambini randomizzati e assegnati numeri di studio. Per evitare distorsioni nell'assegnazione dei pazienti ai gruppi e per garantire un numero uguale nei gruppi di trattamento, verrà eseguita la randomizzazione bloccata, utilizzando una tabella di variabili casuali di diverse dimensioni del blocco. Il medico è cieco rispetto al trattamento che riceve il paziente.

L'amodiachina verrà somministrata a 10 mg/kg in ciascuno dei tre giorni ai bambini nel gruppo di trattamento AQ, insieme alle compresse fittizie di Fansidar. Il fansidar verrà somministrato a 25 mg/kg il giorno 0 e il chinino come farmaco di salvataggio a 10 mg/kg per 8 ore per 6 giorni. Per la combinazione AQ/SP, al giorno D0, ai pazienti verranno somministrati sia 25 mg/kg SP che 10 mg/kg AQ. Nei giorni successivi verrà somministrato l'AQ o le sue compresse fittizie (braccio SP).

La valutazione clinica durante lo studio includerà: esame fisico e monitoraggio dei segni vitali su D0, D3, D7, D14 e D28. Le misurazioni ematologiche includeranno: strisci di sangue, emoglobina, glucosio, livelli di farmaci nel sangue ed ematologia di base. Ai pazienti di Yaoundé verrà prelevato un massimo di 3 ml di sangue per analisi complete (vedi sotto). Per i pazienti reclutati a Limbe e Garoua saranno ottenuti solo campioni di carta da filtro per sangue prelevato dal dito.

I campioni di sangue del giorno 0 (3 ml) saranno raccolti in modo asettico mediante prelievo venoso prima della terapia da ciascuno dei 50 pazienti a Yaoundé utilizzando il tampone acido-citrato-destrosio (ACD) come anticoagulante. Questo sarà processato per fornire plasma per determinazioni immunologiche e per ematologia e determinazioni del livello di farmaci nel sangue.

La caratterizzazione molecolare della diversità e delle mutazioni:

• l'eterogeneità genetica della popolazione in studio sarà stabilita utilizzando i primer per msp1 e msp2 mostrati in precedenza per distinguere i ceppi.
• I prodotti della PCR saranno digeriti con enzima di restrizione (RFLP-PCR) per i geni di resistenza alla pirimetamina dhfr e dhps, e per i ceppi resistenti alla clorochina del gene pfcrt.