Cirkulující markery pro ischemickou chorobu srdeční

Hypotézy, cíle a záměry:

Hypotézy: Kaspáza-3, štěpená a aktivovaná, a dystrofin lze detekovat v lidském oběhu. Hladiny těchto dvou markerů jsou zvýšené během akutního infarktu myokardu. Kromě toho jsou hladiny těchto dvou proteinů vyšší u těch, u kterých se rozvine srdeční selhání, než u těch, kteří ne.

Cíle:

• Zjistit, zda lze štěpenou kaspázu-3 a dystrofin detekovat v lidském oběhu po akutním infarktu myokardu
• Porovnat sérové ​​hladiny těchto dvou markerů u těch, u kterých se rozvine srdeční selhání, a těch, u kterých se nevyskytuje

Vědecké pozadí a význam: Apoptóza je regulovaný biologický proces vedoucí k buněčné smrti (4-9). Kaspázy, rodina cysteinových kyselých proteáz regulují proces a ve skutečnosti vedou k apoptóze. Apoptotický spouštěč nebo signál vede k aktivaci proximálních nebo iniciačních kaspáz (jako je kaspáza-8, -9, 10). Tyto iniciační kaspázy pak štěpí a následně aktivují downstream efektorové kaspázy, jako jsou kaspázy-3, -6 a -7. Tyto efektorové kaspázy pak štěpí různé proteiny, jako jsou proteiny přítomné v cytoskeletech a jádře, jako je lamin A, alfa-fodrin a poly (ADP-ribóza) polymeráza, což vede k apoptóze. Kaspáza-3 je klíčovým popravčím v této apoptotické dráze, zcela nebo kriticky odpovědná za proteolytické štěpení buněčných a jaderných proteinů. Aktivace kaspázy-3 vyžaduje proteolytické zpracování jejího neaktivního zymogenu na aktivní fragmenty p17 a p12. Štěpená kaspáza-3 může být detekována protilátkami specifickými pro tento štěpený enzym (fragment p17) v buněčných lyzátech imunoblotováním nebo testem ELISA využívajícím spektrofotometrické stanovení pomocí čtečky mikrodestiček při OD450 nm. Je známo, že ischemie a reperfuze způsobují apoptózu. Akutní IM tedy může být spojen s uvolněním posledního vykonavatele apoptózy, kterým je kaspáza-3, do oběhu. Dalším potenciálním markerem akutního zhoršení je dystrofin. Dystrofin byl původně identifikován jako gen vázaný na x, jehož mutace na jeho N-konci způsobují kardiomyopatii. Dystrofin poskytuje důležitou strukturální podporu pro srdeční myocyt a jeho sarkolemální membránu (10-11). Spojuje aktin na svém N-konci s proteinovým komplexem spojeným s dystrofinem a sarkolemou na C-konci a extracelulární matrix svalu. Mutace způsobují ztrátu podpory a sarkolemální nestabilitu a myopatii. Translokace a štěpení myokardiálního dystrofinu jsou spojeny s progresí srdečního selhání a kontraktilní dysfunkce. Tyto změny jsou obráceny po snížení mechanického namáhání z komorového asistenčního zařízení (12). Protože MI je spojen se sarkolemální nestabilitou, může se do oběhu uvolňovat i dystrofin.