Imunita po dvou dávkách vakcíny proti žluté zimnici (IATDYFV)

Sběr dat Dobrovolníci budou pozváni k účasti tím, že přinesou průkaz(y) očkování nebo kopii(y) záznamu(ů), ve kterých je uvedeno (m)(y) dávka(y) obdržená(é) vakcína(y) a(y) proti žluté zimnici jejich datum (data). Jednotlivci, kteří souhlasí s účastí ve studii a podepsali formulář informovaného souhlasu, budou předáni k pohovoru a aplikaci zařazovacího dotazníku, který identifikuje možné způsobilé pro studii a klasifikuje je podle doby očkování. Poté se provede lékařská revize historie očkování s datem nebo věkem, ve kterém k nim došlo, města a období, ve kterém žil, a příslušná patologická historie, hospitalizace a léčba chronických onemocnění, poté se přistoupí k odběru krve. .

Po dokončení účasti subjektu ve výzkumné studii musí být při uzavření provedena registrace pro účast ve studii. Doporučuje se, aby tvořili skupinu 110 pacientů s odlišným přístupem než vyhledáváním, u kterého se provádí odběr Plná krev pro analýzu buněčné imunity 30-45 dní po revakcinaci.

Klinické formy studia budou připraveny a zpracovány v programu „TELEform“, který umožní digitalizaci a přípravu databáze.

Velikost vzorku Zatímco 98% séropozitivita a přítomnost buněčné odpovědi po 30 dnech revakcinace jako reference, bude zapotřebí 110 dobrovolníků v každé skupině k detekci nepatrných rozdílů 10 procentních bodů s 80% silou a hladinou významnosti 5%.

Celkem 440 dobrovolníků, 110 rozdělených do každé skupiny. Vzorky 110 jedinců odhadnou podíly séropozitivních do 50 % s přesností 9 procentních bodů pro každou stranu.

Biologické vzorky Vzorky se zpočátku odebírají z 10 ml periferní krve odebrané bez antikoagulantu pro sérologii, u všech dobrovolníků (N = 440).

Podskupině 200 subjektů (50 v každé skupině) se také odebere 20 ml krve v heparinu (10 ml ze 2 zkumavek) pro stanovení buněčné imunity. Konkrétně pro referenční skupinu bude odběr 20 ml proveden ve dvou různých časech, první a zpětná návštěva, 30 až 45 dní po revakcinaci.

Laboratorní testy Titrace neutralizačních protilátek (PRNT): titry neutralizačních protilátek dobrovolníků budou stanoveny neutralizačním testem pro 50% redukci plaků lyzačního pufru (PRNT50) v monovrstvách buněk Vero.

Pro neutralizační testy je PRNT pomocí dávky protilátky vyjádřen v mililitrových mezinárodních jednotkách na mililitr (mlU/ml) séra.

U dílčího vzorku 20 % jedinců bude odděleno subalikvótní sérum, které bude zkontrolováno PRNT na přítomnost žluté zimnice, aby bylo možné ověřit, že sérologické testy provedl jiný tým.

ELISA: Budou provedeny sérologické testy ( IgG ) na horečku dengue . Tyto stejné vzorky budou testovány na IgG-ELISA pro potvrzení antiamarílických protilátek v séru očkovaných osob. Kromě toho je prováděna hladina IgG protilátek v séru konvenční metodou shromážděnou od dobrovolníků pro porovnání dat z literatury.

Přítomnost buněčné imunity: Alikvoty 20 ml plné krve se odebírají do zkumavek obsahujících antikoagulant heparin sodný (Vacutainer, BD, USA) pro kultivaci mononukleárních buněk periferní krve (PBMC).

Sledování nežádoucích účinků Vzhledem k tomu, že aplikace vakcín není výzkumnou činností, záznam postvakcinačních nežádoucích účinků by měli provádět odborníci, kteří aplikují vakcínu v souladu s Manuálem epidemiologického dozoru nad nežádoucími účinky po imunizaci, 2. Vydání - 2009, Ministerstvo zdravotnictví, výzkum a sledování závažných nežádoucích příhod po očkování proti žluté zimnici, Ministerstvo zdravotnictví

Statistická analýza Proměnnou odezvy, která je předmětem zájmu, je titr neutralizačních protilátek (v mIU/ml) séra a transformovaný na logaritmický základ10. Proměnná sérologického stavu bude odvozena - séropozitivní: titry protilátek rovné nebo vyšší než 2,8 log10 mIU/ml; séronegativní: cenné papíry rovné nebo menší než 2,6 log10 mIU/ml a neurčité: cenné papíry rovné 2,7 log10 mIU/ml.

Podíl séropozitivity a geometrický průměr titrů protilátek se odhaduje (s jejich odpovídající 95% spolehlivostí) pro každou studijní skupinu: revakcinovaná po dobu 30 dnů vakcinovaná dvěma dávkami 1-5 let, 6 let nebo více očkovaná třemi nebo více dávkami.

Séropozitivita a profil buněčné imunity v podskupině jedinců přeočkovaných třicet dní budou brány jako reference pro srovnání s jinými skupinami. Sérologická a buněčná imunita v tomto profilu podskupiny před druhou vakcinací bude také použita jako reference pro srovnání.

Kovariáty pro analýzu jsou: věk (kontinuální proměnná v letech), poslední dávka vakcíny proti žluté zimnici, pohlaví, přítomnost protilátek proti horečce dengue v anamnéze, historie závažného onemocnění (hospitalizace, následky, invalidita) a komorbidita (kdo užíval drogy v době odběru krve).