Immunitás két adag sárgaláz vakcina után (IATDYFV)

Adatgyűjtés Az önkéntesek felkérést kapnak a részvételre, ha magukkal hoznak egy oltási kártyát, vagy olyan nyilvántartás(ok) másolatát, amelyeken szerepel (m) sárgaláz elleni oltásban részesült adag(ok) és a dátum ( ok ) . Azokat a személyeket, akik beleegyeznek a vizsgálatban való részvételbe, és aláírtak egy tájékozott beleegyezési űrlapot, elküldik az interjúra és az Inclusion Questionnaire alkalmazására, amely azonosítja a vizsgálatban való részvételre alkalmas személyeket, és besorolja őket az oltás időpontja szerint. Ezt követően orvosi áttekintést készítenek az oltás történetéről, az oltás időpontjával vagy életkorával, a városokkal és életkorával, valamint a megfelelő kórtörténettel, kórházi kezelésekkel és krónikus betegségek kezelésével, majd folytatják a vérvételt. .

Az alanynak a kutatási vizsgálatban való részvételének befejezése után a vizsgálatban való részvételhez a regisztrációt a záráskor meg kell tenni. Önkéntesek csoportja, akiket korábban egy adag sárgaláz vakcinával és emlékeztető oltással oltottak be, és a jelzett aktivitással rendelkeznek azokon a területeken, ahol a vakcina Javasoljuk, hogy 110 betegből álló csoportot alkossanak a keresési megközelítéstől eltérően, amelyben teljes vér felvételt végeznek a celluláris immunitás elemzésére 30-45 nappal az újraoltás után.

A vizsgálat klinikai formáit a „TELEform” programban készítjük el és dolgozzuk fel, amely lehetővé teszi az adatbázis digitalizálását és elkészítését.

Mintaméret Míg 98%-os szeropozitivitás és sejtes válasz jelenléte 30 napos revakcináció után referenciaként szolgál, minden csoportban 110 önkéntesre lesz szükség, hogy 80%-os erővel és 5%-os szignifikanciaszinttel észleljék a 10 százalékpontos apró különbségeket.

Összesen 440 önkéntes, 110-en csoportonként. A 110 egyedből álló minták 50%-ig becsülik meg a szeropozitív arányt 9 százalékpontos pontossággal mindkét oldalon.

Biológiai minták A mintákat kezdetben 10 ml perifériás vérből vették, amelyet antikoaguláns nélkül gyűjtöttek össze szerológiai célra, minden önkéntestől (N = 440).

Egy 200 alanyból (minden csoportból 50-en) 20 ml vért is gyűjtünk heparinban (10 ml 2 cső) a celluláris immunitás meghatározásához. Kifejezetten a referenciacsoport esetében a 20 ml-es begyűjtést két különböző időpontban tartják meg, az első és a visszatérő látogatáskor, az újraoltás után 30-45 nappal.

Laboratóriumi vizsgálatok Semlegesítő antitestek (PRNT) titrálása: az önkéntesek neutralizáló antitest-titereit neutralizációs teszttel határozzák meg a lízispuffer (PRNT50) plakkok 50%-os csökkentésére a Vero sejtek egyrétegű sejtjeiben.

A közömbösítési tesztekhez az antitest dózisa alapján mért PRNT-t milli-nemzetközi egységben adják meg a szérum milliliterére (mlU/ml).

Az egyedek 20%-os részmintájában a subaliquota szérumot szétválasztják, hogy a PRNT-vel megvizsgálják a sárgaláz miatt annak ellenőrzése érdekében, hogy a szerológiai vizsgálatokat egy másik csoport végezte-e el.

ELISA: A dengue-lázra szerológiai teszteket (IgG) fognak tartani. Ugyanezeket a mintákat IgG-ELISA-vizsgálatra is megvizsgálják, hogy megerősítsék az antiamarílicos antitesteket a beoltott emberek szérumában. Ezenkívül az IgG antitestek szintjét a szérumban hagyományos módszerrel önkéntesektől gyűjtöttük össze az irodalomból származó adatok összehasonlítása céljából.

Celluláris immunitás jelenléte: 20 ml teljes vér alikvotjait nátrium-heparin antikoagulánst (Vacutainer, BD, USA) tartalmazó csövekbe gyűjtjük a perifériás vér mononukleáris sejtek (PBMC) tenyésztéséhez.

A nemkívánatos események nyomon követése Mivel a vakcinák beadása nem kutatási tevékenység, az oltás utáni nemkívánatos események nyilvántartását olyan szakembereknek kell elvégezniük, akik az oltást követő nemkívánatos események epidemiológiai felügyeletéről szóló kézikönyv 2. számának megfelelően adják be a vakcinát. Kiadás - 2009, Egészségügyi Minisztérium, a sárgaláz elleni védőoltás utáni súlyos nemkívánatos események kutatása és monitorozása, az Egészségügyi Minisztérium

Statisztikai analízis Az érdeklődésre számot tartó válaszváltozó a szérum neutralizáló antitesteinek titere (mIU/ml-ben), és 10-es logaritmus-bázisra transzformálva. A szerológiai állapot változó lesz - szeropozitív : 2,8 log10 mIU / ml vagy annál nagyobb antitest - titer ; szeronegatív: 2,6 log10 mIU/mL vagy annál kisebb értékpapírok, és határozatlanok: 2,7 log10 mIU/mL értékpapírok.

A szeropozitivitás és a geometriai átlag antitesttiterek arányát megbecsülik (a megfelelő 95%-os megbízhatósággal) minden vizsgálati csoportban: 30 napig újraoltottak, két adaggal oltva 1-5 évig, 6 évig vagy tovább, három vagy több dózissal vakcinázva.

A szeropozitivitás és a celluláris immunitás profilja a harminc nappal újraoltott egyedek alcsoportjában referenciaként szolgál a többi csoporttal való összehasonlításhoz. Az ebben az alcsoport-profilban a második vakcináció előtti szerológiai és celluláris immunitás szintén referenciaként szolgál az összehasonlításhoz.

Az elemzéshez szükséges kovariánsok a következők: életkor (folyamatos változó években), a sárgaláz elleni vakcina utolsó adagja, nem, dengue-oltás elleni antitestek jelenléte a kórelőzményben, súlyos betegség (kórházi kezelés, következmények, rokkantság) anamnézisében és társbetegség (ki használt gyógyszert) a vérvétel időpontjában).