Fase II undersøgelse af metastatisk melanom med lymfodepletende konditionering og anti-gp100:154-162 TCR genmanipulerede lymfocytter

Baggrund:

• Vi har konstrueret humane tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) og perifere blodlymfocytter (PBL'er) til at udtrykke en T-cellereceptor, der genkender en HLAA 0201-begrænset epitop afledt af gp100-proteinet.
• Vi konstruerede en enkelt retroviral vektor, der indeholder både alfa- og beta-kæder og kan mediere genetisk overførsel af denne TCR med høj effektivitet (større end 30 procent) uden behov for at udføre nogen selektion.
• I co-kulturer med HLA-A*0201 positivt melanom gp100:154-162 udskilte TCR-transducerede T-celler en betydelig mængde IFN-Beta (men ingen signifikant sekretion blev observeret i kontrol-co-kulturer med cellelinjer.
• gp100:154-162 TCR-transducerede T-celler kunne effektivt dræbe HLA-A*0201-positive tumorer. Der var ringe eller ingen genkendelse af normale fibroblastceller.
• Denne TCR er over 10 gange mere reaktiv med melanomceller end MART-1 TCR, der medierede tumorregression hos to patienter med metastatisk melanom.

Mål:

Primære mål:

- Bestem, om administration af anti-gp100:154-162 TCR-konstruerede perifere blodlymfocytter (PBL) eller tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) og aldesleukin til patienter efter en ikke-myeloablativ, men lymfoid-depleterende præparativ kur vil resultere i klinisk tumorregression hos patienter metastatisk melanom.

Sekundære mål:

• Bestem in vivo-overlevelsen af ​​TCR-gen-konstruerede celler.
• Bestem toksicitetsprofilen for dette behandlingsregime.
• Bestem, om behandlede patienter udvikler anti-muse TCR-antistof.

Berettigelse:

Patienter, der er HLA-A*0201 positive og 18 år eller ældre skal have

• metastatisk melanom;
• tidligere modtaget og har været non-responder på eller gentaget efter aldesleukin
• normale værdier for grundlæggende laboratorieværdier.

Patienter har muligvis ikke:

• samtidige større medicinske sygdomme;
• enhver form for primær eller sekundær immundefekt;
• svær overfølsomhed over for et hvilket som helst af midlerne anvendt i denne undersøgelse;
• kontraindikationer for høj dosis aldesleukin administration.

Design:

• Hvis TIL kan opnås og dyrkes, men er ikke-reaktive, vil patienter blive tildelt til at modtage TIL transduceret med anti-gp100:154-162 TCR retroviral vektor. Hvis TIL ikke kan opnås, vil perifere blodmononukleære celler (PBMC) blive opnået ved leukaferese (ca. 5 gange 10(9) celler) og dyrket i nærvær af anti-CD3 (OKT3) og aldesleukin og transduceret med antigp100:154- 162 TCR retroviral vektor. Hvis TIL-celler er reaktive over for autolog tumor eller major histocompatibility complex (MHC)-matchede tumorceller eller PBL ikke kan dyrkes, vil patienter ikke blive behandlet efter denne protokol.
• Transduktion initieres ved eksponering af ca. 10(8) til 5 gange 10(8) celler for supernatant indeholdende anti-gp100:154-162 TCR retroviral vektor. Disse transducerede celler vil blive udvidet og testet for deres antitumoraktivitet.
• Når konstruerede lymfocytter er påvist at være biologisk aktive i henhold til de strenge kriterier, der er skitseret i analysecertifikatet, vil patienter modtage en ikke-myeloablativ, men lymfocytdepleterende præparativ kur bestående af cyclophosphamid og fludarabin efterfulgt af intravenøs infusion af ex vivo tumorreaktive, TCR-gentransducerede. PBMC plus IV aldesleukin (720.000 IE/kg q8h for maksimalt 15 doser).
• Patienterne vil gennemgå en fuldstændig evaluering af tumor med fysisk undersøgelse, CT (computertomografi) af brystet, maven og bækkenet og klinisk laboratorieevaluering fire til seks uger efter behandlingen og derefter månedligt i ca. 3 til 4 måneder eller indtil kriterierne uden for undersøgelsen er opfyldt.
• Studiet vil blive udført ved hjælp af et fase II optimalt design, hvor indledningsvis 21 evaluerbare patienter vil blive indskrevet i hver af to kohorter. Hvis 0 eller 1 ud af de 21 patienter pr. kohorte oplever et klinisk respons, vil der ikke blive indskrevet flere patienter, men hvis 2 eller flere af de første 21 evaluerbare patienter, der er indskrevet i den kohorte, har et klinisk respons, fortsætter opbygningen af ​​denne kohorte indtil i alt 41 evaluerbare patienter er blevet indskrevet i denne kohorte.
• Målet vil være at bestemme i to kohorter, om kombinationen af ​​højdosis aldesleukin, lymfocytdepleterende kemoterapi og anti-gp100:154-162 TCR-genmanipulerede lymfocytter (TIL og PBL) er i stand til at associeres med en klinisk responsrate, der kan udelukke 5 procent (p0=0,05) til fordel for en beskeden 20 procent PR (delvis respons) plus CR (komplet respons) rate (p1=0,20).