Fas II-studie av metastaserande melanom med lymfodpletterande konditionering och anti-gp100:154-162 TCR genmanipulerade lymfocyter

Bakgrund:

• Vi har konstruerat humana tumörinfiltrerande lymfocyter (TIL) och perifera blodlymfocyter (PBL) för att uttrycka en T-cellsreceptor som känner igen en HLAA 0201-begränsad epitop härledd från gp100-proteinet.
• Vi konstruerade en enda retroviral vektor som innehåller både alfa- och beta-kedjor och kan förmedla genetisk överföring av denna TCR med hög effektivitet (mer än 30 procent) utan att behöva göra något urval.
• I samkulturer med HLA-A*0201 positivt melanom gp100:154-162 utsöndrade TCR-transducerade T-celler en betydande mängd IFN-Beta (men ingen signifikant utsöndring observerades i kontrollsamkulturer med cellinjer.
• gp100:154-162 TCR-transducerade T-celler kunde effektivt döda HLA-A*0201-positiva tumörer. Det fanns liten eller ingen igenkänning av normala fibroblasterceller.
• Denna TCR är över 10 gånger mer reaktiv med melanomceller än MART-1 TCR som medierade tumörregression hos två patienter med metastaserande melanom.

Mål:

Primära mål:

- Bestäm om administrering av anti-gp100:154-162 TCR-konstruerade perifera blodlymfocyter (PBL) eller tumörinfiltrerande lymfocyter (TIL) och aldesleukin till patienter som följer en icke-myeloablativ men lymfoidutarmande preparativ regrim kommer att resultera i klinisk tumörregression hos patienter metastaserande melanom.

Sekundära mål:

• Bestäm in vivo-överlevnaden för TCR-genkonstruerade celler.
• Bestäm toxicitetsprofilen för denna behandlingsregim.
• Bestäm om behandlade patienter utvecklar anti-mus-TCR-antikroppar.

Behörighet:

Patienter som är HLA-A*0201 positiva och 18 år eller äldre måste ha

• metastaserande melanom;
• tidigare mottagit och har varit en icke-svarare på eller återkommit efter aldesleukin
• normala värden för grundläggande laboratorievärden.

Patienter kanske inte har:

• samtidiga allvarliga medicinska sjukdomar;
• någon form av primär eller sekundär immunbrist;
• allvarlig överkänslighet mot något av de medel som används i denna studie;
• kontraindikationer för administrering av hög dos aldesleukin.

Design:

• Om TIL kan erhållas och odlas men är icke-reaktiva, kommer patienter att tilldelas att ta emot TIL transducerad med anti-gp100:154-162 TCR retroviral vektor. Om TIL inte kan erhållas kommer mononukleära celler från perifert blod (PBMC) att erhållas genom leukaferes (cirka 5 gånger 10(9) celler) och odlas i närvaro av anti-CD3 (OKT3) och aldesleukin och transduceras med antigp100:154- 162 TCR retroviral vektor. Om TIL-celler är reaktiva mot autologa tumörer eller major histocompatibility complex (MHC)-matchade tumörceller eller PBL inte kan odlas, kommer patienter inte att behandlas enligt detta protokoll.
• Transduktion initieras genom exponering av cirka 10(8) till 5 gånger 10(8) celler för supernatant innehållande anti-gp100:154-162 TCR retroviral vektor. Dessa transducerade celler kommer att expanderas och testas för deras antitumöraktivitet.
• När konstruerade lymfocyter har visat sig vara biologiskt aktiva enligt de strikta kriterierna som beskrivs i analyscertifikatet, kommer patienterna att få en icke-myeloablativ men lymfocytutarmande preparativ regim bestående av cyklofosfamid och fludarabin följt av intravenös infusion av ex vivo tumörreaktiv, TCR-gentransducerad PBMC plus IV aldesleukin (720 000 IE/kg q8h för maximalt 15 doser).
• Patienterna kommer att genomgå en fullständig utvärdering av tumören med fysisk undersökning, CT (datortomografi) av bröstet, buken och bäckenet och klinisk laboratorieutvärdering fyra till sex veckor efter behandling och sedan varje månad i cirka 3 till 4 månader eller tills kriterierna utanför studien är uppfyllda.
• Studien kommer att genomföras med en optimal fas II-design där initialt 21 utvärderbara patienter kommer att registreras i var och en av två kohorter. Om 0 eller 1 av de 21 patienterna per kohort upplever ett kliniskt svar, kommer inga ytterligare patienter att registreras, men om 2 eller fler av de första 21 evaluerbara patienterna som registrerats i den kohorten har ett kliniskt svar, kommer tillkomsten till den kohorten att fortsätta tills totalt 41 utvärderbara patienter har registrerats i den kohorten.
• Målet är att i två kohorter fastställa om kombinationen av högdos aldesleukin, lymfocytutarmande kemoterapi och anti-gp100:154-162 TCR-genmanipulerade lymfocyter (TIL och PBL) kan associeras med en klinisk svarsfrekvens som kan utesluta 5 procent (p0=0,05) till förmån för en blygsam 20 procent PR (partiell respons) plus CR (fullständig respons)-frekvens (p1=0,20).