Phase-II-Studie zum metastasierten Melanom mit Lymphodepleting-Konditionierung und gentechnisch veränderten Anti-gp100:154-162-TCR-Lymphozyten

Hintergrund:

• Wir haben menschliche tumorinfiltrierende Lymphozyten (TIL) und periphere Blutlymphozyten (PBLs) so konstruiert, dass sie einen T-Zell-Rezeptor exprimieren, der ein vom gp100-Protein abgeleitetes HLAA 0201-beschränktes Epitop erkennt.
• Wir haben einen einzelnen retroviralen Vektor konstruiert, der sowohl Alpha- als auch Beta-Ketten enthält und den genetischen Transfer dieses TCR mit hoher Effizienz (mehr als 30 Prozent) vermitteln kann, ohne dass eine Selektion erforderlich ist.
• In Co-Kulturen mit HLA-A*0201-positivem Melanom gp100:154-162 TCR-transduzierten T-Zellen sezernierten erhebliche Mengen an IFN-Beta (in Kontroll-Co-Kulturen mit Zelllinien wurde jedoch keine signifikante Sekretion beobachtet).
• gp100:154-162 TCR-transduzierte T-Zellen könnten HLA-A*0201-positive Tumoren effizient abtöten. Es wurden kaum oder keine normalen Fibroblastenzellen erkannt.
• Dieser TCR reagiert mehr als zehnmal stärker auf Melanomzellen als der MART-1-TCR, der bei zwei Patienten mit metastasiertem Melanom eine Tumorrückbildung vermittelte.

Ziele:

Hauptziele:

-Bestimmen Sie, ob die Verabreichung von anti-gp100:154-162 TCR-manipulierten peripheren Blutlymphozyten (PBL) oder tumorinfiltrierenden Lymphozyten (TIL) und Aldesleukin an Patienten nach einem nichtmyeloablativen, aber lymphoidenabbauenden präparativen Regime bei Patienten zu einer klinischen Tumorregression führt metastasiertes Melanom.

Sekundäre Ziele:

• Bestimmen Sie das In-vivo-Überleben von gentechnisch veränderten TCR-Zellen.
• Bestimmen Sie das Toxizitätsprofil dieses Behandlungsschemas.
• Bestimmen Sie, ob behandelte Patienten Anti-Maus-TCR-Antikörper entwickeln.

Teilnahmeberechtigung:

Patienten, die HLA-A*0201-positiv sind und mindestens 18 Jahre alt sind, müssen dies tun

• metastasiertes Melanom;
• Wenn Sie bereits zuvor eine Behandlung mit Aldesleukin erhalten haben und auf die Behandlung mit Aldesleukin nicht angesprochen haben oder erneut aufgetreten sind
• Normalwerte für grundlegende Laborwerte.

Patienten haben möglicherweise nicht:

• gleichzeitige schwere medizinische Erkrankungen;
• jede Form von primärem oder sekundärem Immundefekt;
• schwere Überempfindlichkeit gegen einen der in dieser Studie verwendeten Wirkstoffe;
• Kontraindikationen für die Verabreichung von hochdosiertem Aldesleukin.

Design:

• Wenn TIL gewonnen und gezüchtet werden können, aber nicht reaktiv sind, werden den Patienten TIL zugewiesen, die mit dem retroviralen Anti-gp100:154-162-TCR-Vektor transduziert wurden. Wenn TIL nicht erhalten werden kann, werden mononukleäre Zellen des peripheren Blutes (PBMC) durch Leukapherese gewonnen (ungefähr 5 mal 10(9) Zellen) und in Gegenwart von Anti-CD3 (OKT3) und Aldesleukin kultiviert und mit dem Antigp100:154- transduziert. 162 TCR retroviraler Vektor. Wenn TIL-Zellen auf autologe Tumorzellen oder mit dem Haupthistokompatibilitätskomplex (MHC) übereinstimmende Tumorzellen reagieren oder PBL nicht gezüchtet werden können, werden Patienten nicht nach diesem Protokoll behandelt.
• Die Transduktion wird eingeleitet, indem etwa 10(8) bis 5 mal 10(8) Zellen einem Überstand ausgesetzt werden, der den retroviralen Anti-gp100:154-162-TCR-Vektor enthält. Diese transduzierten Zellen werden vermehrt und auf ihre Antitumoraktivität getestet.
• Sobald sich herausstellt, dass gentechnisch veränderte Lymphozyten gemäß den im Analysezertifikat dargelegten strengen Kriterien biologisch aktiv sind, erhalten die Patienten ein nichtmyeloablatives, aber lymphozytendepletierendes präparatives Schema bestehend aus Cyclophosphamid und Fludarabin, gefolgt von einer intravenösen Infusion von ex vivo tumorreaktivem, TCR-Gen-transduziertem PBMC plus IV Aldesleukin (720.000 IE/kg alle 8 Stunden für maximal 15 Dosen).
• Die Patienten werden vier bis sechs Wochen nach der Behandlung und dann monatlich für etwa 3 bis 4 Monate oder bis die Kriterien außerhalb der Studie erfüllt sind, einer vollständigen Tumoruntersuchung mit körperlicher Untersuchung, CT (Computertomographie) von Brust, Bauch und Becken sowie einer klinischen Laboruntersuchung unterzogen.
• Die Studie wird mit einem optimalen Phase-II-Design durchgeführt, bei dem zunächst 21 auswertbare Patienten in jede der beiden Kohorten aufgenommen werden. Wenn bei 0 oder 1 der 21 Patienten pro Kohorte ein klinisches Ansprechen auftritt, werden keine weiteren Patienten aufgenommen. Wenn jedoch 2 oder mehr der ersten 21 auswertbaren Patienten in dieser Kohorte ein klinisches Ansprechen zeigen, wird die Zuordnung zu dieser Kohorte bis dahin fortgesetzt Insgesamt wurden 41 auswertbare Patienten in diese Kohorte aufgenommen.
• Das Ziel besteht darin, in zwei Kohorten festzustellen, ob die Kombination aus hochdosiertem Aldesleukin, lymphozytendepletierender Chemotherapie und gentechnisch veränderten Anti-gp100:154-162-TCR-Lymphozyten (TIL und PBL) mit einer klinischen Ansprechrate verbunden sein kann kann 5 Prozent (p0=0,05) zugunsten einer bescheidenen PR-Rate (partielles Ansprechen) plus CR (vollständiges Ansprechen) von 20 Prozent (p1=0,20) ausschließen.