Studio di fase II sul melanoma metastatico con condizionamento linfodepletivo e linfociti geni ingegnerizzati anti-gp100:154-162 TCR

Sfondo:

• Abbiamo ingegnerizzato linfociti infiltranti il ​​tumore umano (TIL) e linfociti del sangue periferico (PBL) per esprimere un recettore delle cellule T che riconosce un epitopo ristretto HLAA 0201 derivato dalla proteina gp100.
• Abbiamo costruito un singolo vettore retrovirale che contiene sia catene alfa che beta e può mediare il trasferimento genetico di questo TCR con alta efficienza (superiore al 30 percento) senza la necessità di eseguire alcuna selezione.
• In co-colture con melanoma HLA-A*0201 positivo gp100:154-162 TCR ha trasdotto cellule T secrete quantità significative di IFN-Beta (ma nessuna secrezione significativa è stata osservata nelle co-colture di controllo con linee cellulari.
• gp100:154-162 Le cellule T trasdotte con TCR potrebbero uccidere efficacemente i tumori HLA-A*0201 positivi. C'era poco o nessun riconoscimento delle normali cellule dei fibroblasti.
• Questo TCR è oltre 10 volte più reattivo con le cellule di melanoma rispetto al MART-1 TCR che ha mediato la regressione del tumore in due pazienti con melanoma metastatico.

Obiettivi:

Obiettivi primari:

-Determinare se la somministrazione di linfociti del sangue periferico (PBL) ingegnerizzati con TCR anti-gp100:154-162 o di linfociti infiltranti il ​​tumore (TIL) e aldesleuchina a pazienti che seguono un regime preparativo non mieloablativo ma di deplezione linfoide risulterà in una regressione clinica del tumore in pazienti con melanoma metastatico.

Obiettivi secondari:

• Determinare la sopravvivenza in vivo delle cellule ingegnerizzate con geni TCR.
• Determinare il profilo di tossicità di questo regime di trattamento.
• Determinare se i pazienti trattati sviluppano anticorpi TCR anti-topo.

Eleggibilità:

I pazienti che sono HLA-A*0201 positivi e di età pari o superiore a 18 anni devono averlo

• melanoma metastatico;
• ricevuto in precedenza e non ha risposto o si è ripresentato dopo aldesleuchina
• valori normali per valori di laboratorio di base.

I pazienti potrebbero non avere:

• malattie mediche importanti concomitanti;
• qualsiasi forma di immunodeficienza primaria o secondaria;
• grave ipersensibilità a uno qualsiasi degli agenti utilizzati in questo studio;
• controindicazioni per la somministrazione di alte dosi di aldesleuchina.

Progetto:

• Se TIL può essere ottenuto e cresciuto ma non sono reattivi, i pazienti verranno assegnati a ricevere TIL trasdotto con il vettore retrovirale anti-gp100:154-162 TCR. Se il TIL non può essere ottenuto, le cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC) saranno ottenute mediante leucaferesi (circa 5 volte 10(9) cellule) e coltivate in presenza di anti-CD3 (OKT3) e aldesleuchina e trasdotte con l'antigp100:154- 162 vettore retrovirale TCR. Se le cellule TIL sono reattive al tumore autologo o alle cellule tumorali corrispondenti al complesso maggiore di istocompatibilità (MHC) o al PBL non possono essere coltivate, i pazienti non verranno trattati con questo protocollo.
• La trasduzione viene avviata dall'esposizione di circa 10(8) a 5 volte 10(8) cellule al surnatante contenente il vettore retrovirale anti-gp100:154-162 TCR. Queste cellule trasdotte saranno espanse e testate per la loro attività antitumorale.
• Una volta dimostrato che i linfociti ingegnerizzati sono biologicamente attivi secondo i rigorosi criteri delineati nel certificato di analisi, i pazienti riceveranno un regime preparativo non mieloablativo ma di deplezione dei linfociti costituito da ciclofosfamide e fludarabina seguito da infusione endovenosa di reattivo tumorale ex vivo, trasdotto dal gene TCR PBMC più aldesleuchina EV (720.000 UI/kg q8h per un massimo di 15 dosi).
• I pazienti saranno sottoposti a valutazione completa del tumore con esame fisico, TC (tomografia computerizzata) del torace, addome e pelvi e valutazione clinica di laboratorio da quattro a sei settimane dopo il trattamento e poi una volta al mese per circa 3-4 mesi o fino a quando i criteri di studio non saranno soddisfatti.
• Lo studio sarà condotto utilizzando un disegno ottimale di fase II in cui inizialmente verranno arruolati 21 pazienti valutabili in ciascuna delle due coorti. Se 0 o 1 dei 21 pazienti per coorte manifesta una risposta clinica, non verranno arruolati altri pazienti, ma se 2 o più dei primi 21 pazienti valutabili arruolati in quella coorte hanno una risposta clinica, allora l'arruolamento in quella coorte continuerà fino a quando un totale di 41 pazienti valutabili sono stati arruolati in quella coorte.
• L'obiettivo sarà determinare in due coorti se la combinazione di aldesleuchina ad alte dosi, chemioterapia di deplezione dei linfociti e linfociti ingegnerizzati con gene TCR anti-gp100:154-162 (TIL e PBL) è in grado di essere associata a un tasso di risposta clinica che può escludere il 5% (p0=0,05) a favore di un modesto 20% di PR (risposta parziale) più CR (risposta completa) (p1=0,20).