II. fázisú metasztatikus melanoma vizsgálata limfodepléciós kondicionálással és anti-gp100:154-162 TCR géntechnológiás limfocitákkal

Háttér:

• Humán tumorba infiltráló limfocitákat (TIL) és perifériás vér limfocitákat (PBL-eket) alakítottunk ki, hogy expresszáljanak egy T-sejt receptort, amely felismeri a gp100 fehérjéből származó HLAA 0201 korlátozott epitópot.
• Egyetlen retrovírus vektort hoztunk létre, amely alfa és béta láncokat is tartalmaz, és nagy hatékonysággal (több mint 30 százalék) képes közvetíteni ennek a TCR-nek a genetikai átvitelét anélkül, hogy szelekciót kellene végrehajtani.
• A HLA-A*0201 pozitív melanoma gp100:154-162 TCR-rel transzdukált T-sejtek jelentős mennyiségű IFN-Bétát szekretáltak (de a sejtvonalakkal végzett kontroll kotenyészetekben nem figyeltek meg szignifikáns szekréciót).
• A gp100:154-162 TCR-rel transzdukált T-sejtek hatékonyan elpusztíthatják a HLA-A*0201 pozitív daganatokat. A normál fibroblaszt sejteket alig vagy egyáltalán nem ismerték fel.
• Ez a TCR több mint 10-szer reaktívabb a melanomasejtekkel, mint a MART-1 TCR, amely két áttétes melanomában szenvedő betegnél tumorregressziót közvetített.

Célok:

Elsődleges célok:

- Határozza meg, hogy az anti-gp100:154-162 TCR-módosított perifériás vér limfociták (PBL) vagy tumor infiltráló limfociták (TIL) és aldesleukin beadása nem myeloablatív, de limfoid kimerítő preparatív kezelést követő betegeknél klinikai tumorregressziót eredményez-e metasztatikus melanoma.

Másodlagos célok:

• Határozza meg a TCR génmanipulált sejtek in vivo túlélését.
• Határozza meg ennek a kezelési rendnek a toxicitási profilját.
• Határozza meg, hogy a kezelt betegeknél kialakul-e anti-egér TCR antitest.

Jogosultság:

A HLA-A*0201 pozitív és 18 éves vagy idősebb betegeknek rendelkezniük kell

• metasztatikus melanoma;
• korábban kaptak és nem reagáltak az aldesleukinra, vagy kiújultak az aldesleukin után
• normál értékek az alapvető laboratóriumi értékekhez.

Előfordulhat, hogy a betegek nem rendelkeznek:

• egyidejű súlyos egészségügyi betegségek;
• az elsődleges vagy másodlagos immunhiány bármely formája;
• súlyos túlérzékenység a vizsgálatban használt bármely szerrel szemben;
• ellenjavallatok nagy dózisú aldesleukin adagolására.

Tervezés:

• Ha a TIL beszerezhető és szaporítható, de nem reaktívak, a betegeket az anti-gp100:154-162 TCR retrovirális vektorral transzdukált TIL-re kell beosztani. Ha a TIL nem nyerhető, perifériás vér mononukleáris sejteket (PBMC) nyerünk leukaferézissel (körülbelül 5-ször 10(9) sejt), és anti-CD3 (OKT3) és aldesleukin jelenlétében tenyésztjük, és az antigp100:154-vel transzdukáljuk. 162 TCR retrovirális vektor. Ha a TIL-sejtek reaktívak az autológ tumorra vagy a major hisztokompatibilitási komplexhez (MHC) illeszkedő tumorsejteket vagy PBL-t nem lehet szaporítani, a betegeket nem kezelik ezzel a protokollal.
• A transzdukciót körülbelül 10(8)-5-szörös 10(8) sejtnek az anti-gp100:154-162 TCR retrovirális vektort tartalmazó felülúszóval indítjuk el. Ezeket a transzdukált sejteket szaporítjuk, és megvizsgáljuk daganatellenes aktivitásukat.
• Ha a módosított limfociták biológiailag aktívak az Elemzési Tanúsítványban körvonalazott szigorú kritériumok szerint, a betegek nem myeloablatív, de limfocita kimerítő preparatív kezelést kapnak, amely ciklofoszfamidból és fludarabinból áll, majd intravénás infúziót ex vivo tumorreaktív, TCR-génnel transzdukált. PBMC plusz IV aldesleukin (720 000 NE/kg 8 óránként, maximum 15 adag).
• A betegek a daganat teljes kiértékelését fizikális vizsgálattal, a mellkas, a has és a medence CT-vel (számítógépes tomográfiával), valamint a kezelés után négy-hat héttel, majd havonta, körülbelül 3-4 hónapon keresztül, vagy addig, amíg a vizsgálaton kívüli kritériumok teljesülnek, klinikai laboratóriumi értékelésnek vetik alá.
• A vizsgálatot a II. fázis optimális elrendezésével végezzük, ahol kezdetben 21 értékelhető beteget vonnak be két-két kohorszba. Ha kohorszonként a 21 beteg közül 0 vagy 1 tapasztal klinikai választ, akkor nem vesznek fel további betegeket, de ha az adott kohorszba bevont első 21 értékelhető beteg közül 2 vagy többnél jelentkezik klinikai válasz, akkor az adott kohorszba való halmozódás a következő időpontig folytatódik. összesen 41 értékelhető beteget vontak be ebbe a kohorszba.
• A cél az lesz, hogy két kohorszban meghatározzuk, hogy a nagy dózisú aldesleukin, a limfocita-depletáló kemoterápia és az anti-gp100:154-162 TCR-gén-manipulált limfociták (TIL és PBL) kombinációja összefüggésbe hozható-e olyan klinikai válaszaránnyal, amely kizárhatja az 5 százalékot (p0=0,05) a szerény, 20 százalékos PR (részleges válasz) plusz CR (teljes válasz) arány javára (p1=0,20).