Forsøg med donor-T-celler sensibiliseret med Pentadecapeptider af CMV-PP65-proteinet til behandling af cytomegalovirus (CMV)-infektioner efter allogene hæmatopoietiske stamcelletransplantationer

Inklusionskriterier:

Inden de modtager behandling, kan nogle patienter gennemgå diagnostisk og/eller anden test af deres væv, hvis det er tilgængeligt, for at afgøre, om deres CMV-inficerede celler sandsynligvis vil reagere på behandling med CMV-specifikke T-celler. Alternativt kan der kræves blodprøver til forskningstests for at sikre, at de CMV-specifikke T-celler ikke indeholder celler, der kan reagere mod patienten. Disse patienter vil underskrive et særskilt forudgående samtykke. Hvis det fastslås, at en patient vil kvalificere sig til og kan drage fordel af infusioner af CMV CTL'er, vil han/hun fortsætte med at underskrive standardbehandlingssamtykke for MSKCC IRB # 05-065 og blive tilmeldt og behandlet på forsøg, hvis alle andre kvalificerede kriterier er opfyldt.

• Hver patient skal opfylde mindst et af følgende kriterier:
• Patienten skal have en klinisk dokumenteret tilstand forbundet med CMV (f. interstitiel lungebetændelse, hepatitis, retinitis) eller
• Patienten skal have mikrobiologiske tegn på CMV-viræmi eller vævsinvasion som attesteret ved viral kultur, eller påvisning af CMV-antigenæmi eller påvisning af niveauer af CMV-DNA i blod eller kropsvæsker i overensstemmelse med CMV-infektion.
• Patientens CMV-infektion skrider klinisk frem, eller CMV-viræmi er vedvarende eller stigende (som det fremgår af kvantificering af CMV-antigenæmi eller CMV-DNA i blodet) på trods af to ugers induktionsbehandling med antivirale lægemidler.
• Patienten har udviklet CMV-viræmi som attesteret ved viral kultur eller påvisning af CMV-antigenæmi eller påvisning af niveauer af CMV-DNA i blod eller kropsvæsker, mens han har modtaget profylaktiske doser af antivirale lægemidler for at forhindre CMV-infektion efter transplantation. eller
• patienten er ude af stand til at opretholde behandling med antivirale lægemidler på grund af lægemiddelassocierede toksiciteter (f. myelosuppression [ANC < 1000 ul/ml uden GCSF-støtte] eller nefrotoksicitet [korrigeret kreatininclearance < end eller lig med 60 ml/min/1,73 m2 eller kreatinin >2 mg/dl]).
• Da CMV-infektioner er livstruende og kan involvere lunger, lever, mave-tarmkanalen, hæmatopoietiske og centralnervesystemer, og antivirale lægemidler også kan kompromittere nyre- og hæmatopoietisk funktion, vil dysfunktioner i disse organer ikke påvirke berettigelsen til denne protokol.

For at være berettiget skal patienterne dog opfylde følgende kliniske kriterier:

• De skal have et stabilt blodtryk og cirkulation, der ikke kræver trykstøtte.
• De skal have tilstrækkelig hjertefunktion som påvist ved EKG og/eller ved ekkokardiografisk bevis.
• De skal have en forventet levetid på mindst 3 uger, selvom de kræver respiratorstøtte.
• De er ingen aldersbegrænsninger for berettigelse til denne protokol.

Ekskluderingskriterier:

• Patienter, der har behov for høje doser af glukokortikosteroider (>0,5 mg/kg prednison eller tilsvarende) som behandling for aktiv (grad 2-4) akut graft vs. værtssygdom (GVHD) eller kronisk GVHD.
• Patienter, der er døende.
• Patienter med andre tilstande, der ikke er relateret til CMV-infektion (f. ukontrolleret bakteriel sepsis eller invasiv svampeinfektion), som også er livstruende, og som ville udelukke evaluering af virkningerne af en T-celle-infusion.

Donorberettigelse til donation af blodlymfocytter til generering af

Donor-afledte CMV-specifikke T-celler:

Tilstrækkelig sundhed til donation som bestemt af institutionelle (relateret donor) eller NMDP (ikke-relateret donor) retningslinjer. Normale donorer vil blive evalueret for tegn på forudgående sensibilisering over for CMV ved CMV-serologi. De vil også blive skrevet til HLA A, B, C og DR. For modtagere af allogen hæmatopoietisk progenitorcelletransplantation (HSCT) vil marvtransplantationsdonoren udgøre den foretrukne donor, eftersom disse T-celler vil vokse og persistere i en patient, som allerede har transplanteret med et transplantat fra denne donor. Men hvis HSCT-donoren er CMV-seronegativ eller ikke tilgængelig (f.eks. en navlestrengsblodtransplantation eller en ubeslægtet donor, som ikke allerede har doneret T-celler til adoptivbehandling), matchede CMV-specifikke T-celler genereret fra en seropositiv donor i mindst Der kan anvendes 2 HLA-alleller, som deles af patienten.

Normale donorer, der opfylder disse kriterier, og som giver samtykke til at donere blod til generering af CMV-specifikke T-celler til adoptive terapeutiske formål, vil modtage en detaljeret klinisk evaluering, herunder en sygehistorie, fysisk undersøgelse og serologisk test for overførbare sygdomme inden for 1 uge efter donation. inklusive hepBs Ag og hepatitis C antistof, HIV-1 og 2, HTLV-1 og 2, CMV (kun hvis tidligere negativ), VDRL, WNV og Chagas En HIV+ donor vil blive afvist af medicinske grunde. Donorer skal have Hgb-værdi > 10 gm/dl og skal være i stand til at gennemgå en enkelt 3-6 enheder leukaferese (foretrukket) eller en enkelt enhed blod til T-celler (for pædiatriske donorer, ikke mere end 5 ml/kg på nogen blodprøve).

En potentiel donor vil blive informeret om formålet med denne undersøgelse og dens krav. Hvis han/hun giver sit samtykke, vil donoren blive bedt om at afgive to blodprøver:

jeg. En indledende donation af 25 ml blod antikoaguleret med heparin eller ACD. Dette blod bruges til at etablere en B-cellelinje transformeret med B95.8-laboratoriestammen af ​​EBV. Denne EBV+ B-cellelinje/(EBVBLCL) vil blive brugt som en antigen-præsenterende celle. Når den er fyldt med puljen af ​​CMVpp65-pentadecapeptider, sensibiliserer EBVBLCL effektivt T-celler fra de samme donorer mod CMV såvel som EBV.

Fordi etablering og test af en EBV-transformeret B-cellelinje, der er egnet til brug eller som en antigen-præsenterende celle, kræver 4-5 ugers in vitro-dyrkning, er det vigtigt, at denne prøve tages så tidligt som muligt for patienter med risiko for en CMV-infektion. Fordi patienter, der modtager HSCT fra ikke-beslægtede eller HLA-disparate donorer, er særligt udsatte for alvorlige CMV-infektioner i de første 2-3 måneder efter transplantationen, bør denne blodprøve tages fra donoren før donation af den hæmatopoietiske progenitorcelletransplantation, når det er muligt.

ii. En donation af enten en enkelt standard 2-blodvolumen leukaferese indsamlet i standard ACD-antikoagulant. Hvis det er umuligt at indsamle en leukaferese fra nogle af donorerne, vil en enhed fuldblod være acceptabel. Imidlertid er AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility, der fremstiller celleprodukter af klinisk kvalitet under GMP-betingelser i MSKCC) muligvis kun i stand til at generere et begrænset antal T-celler fra en blodenhed. Dette blod er påkrævet til isolering af T-cellerne for at blive sensibiliseret med poolen af ​​CMVpp65 15-merer påført den autologe EBVBLCL og opformeret in vitro. Derudover er det nødvendigt at tilvejebringe autologe fødeceller, der er essentielle for at opretholde T-cellevækst uden risiko for at stimulere væksten af ​​alloreaktive T-celler, der er i stand til at inducere GVHD.

Denne donation af en leukaferese eller en blodenhed vil blive opnået fra ikke-beslægtede HSCT-donorer mindst 2 uger efter deres donation af en HSCT, eller så hurtigt som muligt derefter.

For at begrænse antallet af blod- eller leukaferesedonationer, der ville være påkrævet af enhver donor, vil hver donor blive informeret om følgende potentielle anvendelser af de donerede blodceller. De hvide celler indeholdt i en leukaferese er tilstrækkelige til at dyrke nok T-celler til at behandle de tre tilstande nedenfor hos en transplantationspatient:

1. Brugen af ​​celler til at generere CMV-specifikke T-celler til potentiel brug i behandlingen af ​​den patient, for hvem donoren har givet en HSCT, under MSKCC IRB # 05-065.

2. Brugen af ​​en brøkdel af cellerne isoleret til at generere:

   1. immun-T-celler, der er specifikke for en anden virus, såsom Epstein-Barr-virus, der kan forårsage dødelige lymfomer hos transplanterede modtagere, og
   2. immune T-celler, der er specifikke for et protein kaldet WT-1, som er differentielt udtrykt af ondartede blodceller.

   Sådanne T-celler kunne anvendes under separate protokoller til at behandle EBV-associerede sygdomme (IRB 95-024) og/eller til at behandle eller forhindre tilbagefald af leukæmi (07-055) hos patienten, der modtager donorens hæmatopoietiske progenitorcelletransplantation.

3. Donationen af ​​de immun-T-celler, der er genereret fra donoren, og som ikke bruges til eller kræves af den patient, som de oprindeligt var beregnet til, til en bank af immunceller, der vil blive opbevaret og vedligeholdt kryokonserveret under GMP-betingelser i den adoptive immuncelleterapi Facilitet hos MSKCC, Disse lagrede T-celler, kan bruges til behandling af andre patienter med CMV- eller EBV-infektioner/maligniteter, der udtrykker HLA-alleller, der deles af donoren.

Ud over disse prospektivt optjente donorer har vi siden initieringen af ​​denne protokol genereret over 100 CMV-specifikke T-celler til patienter med høj risiko for infektion, hvoraf langt færre patienter har krævet behandling. Da disse patienter nu er ude over risikoperioden for CMV-infektion, vil deres donorer blive kontaktet med et særskilt samtykke for at tillade brug af deres T-celler i andre modtagere end de primære patienter, som de oprindeligt donerede celler til.