Försök med donator-T-celler sensibiliserade med pentadekapeptider av CMV-PP65-proteinet för behandling av cytomegalovirus (CMV)-infektioner efter allogena hematopoetiska stamcellstransplantationer

Inklusionskriterier:

Innan de får behandling kan vissa patienter genomgå diagnostisk och/eller annan testning av sin vävnad, om tillgänglig, för att avgöra om deras CMV-infekterade celler sannolikt kommer att svara på behandling med CMV-specifika T-celler. Alternativt kan blodprov krävas för forskningstester för att fastställa att de CMV-specifika T-cellerna inte innehåller några celler som skulle kunna reagera mot patienten. Dessa patienter kommer att underteckna ett separat samtycke före behandling. Om det fastställs att en patient kommer att kvalificera sig för och kan ha nytta av infusioner av CMV CTL, kommer han/hon att fortsätta med att underteckna standardbehandlingssamtycket för MSKCC IRB # 05-065 och bli inskriven och behandlad på prov, om alla andra kvalificerade kriterierna är uppfyllda.

• Varje patient måste uppfylla minst ett av följande kriterier:
• Patienten måste ha ett kliniskt dokumenterat tillstånd associerat med CMV (t. interstitiell lunginflammation, hepatit, retinit) eller
• Patienten måste ha mikrobiologiska bevis för CMV-viremi eller vävnadsinvasion som intygas av virusodling, eller detektering av CMV-antigenemi eller detektering av nivåer av CMV-DNA i blod eller kroppsvätskor som överensstämmer med CMV-infektion.
• Patientens CMV-infektion fortskrider kliniskt eller CMV-viremi är ihållande eller ökar (vilket framgår av kvantifiering av CMV-antigenemi eller CMV-DNA i blodet) trots två veckors induktionsbehandling med antivirala läkemedel.
• Patienten har utvecklat CMV-viremi som intygas genom viral odling, eller detektering av CMV-antigenemi eller detektering av nivåer av CMV-DNA i blod eller kroppsvätskor samtidigt som han fått profylaktiska doser av antivirala läkemedel för att förhindra CMV-infektion efter transplantation. eller
• patienten kan inte upprätthålla behandling med antivirala läkemedel på grund av läkemedelsrelaterade toxiciteter (t. myelosuppression [ANC < 1000 ul/ml utan GCSF-stöd] eller nefrotoxicitet [korrigerat kreatininclearance < än eller lika med 60 ml/min/1,73 m2 eller kreatinin >2 mg/dl]).
• Eftersom CMV-infektioner är livshotande och kan involvera lungor, lever, mag-tarmkanalen, hematopoetiska och centrala nervsystem, och antivirala läkemedel kan även äventyra njur- och hematopoetisk funktion, kommer dysfunktioner i dessa organ inte att påverka valbarheten för detta protokoll.

Men för att vara berättigade bör patienterna uppfylla följande kliniska kriterier:

• De måste ha ett stabilt blodtryck och cirkulation som inte kräver pressorstöd.
• De bör ha adekvat hjärtfunktion, vilket framgår av EKG och/eller ekokardiografiska bevis.
• De bör ha en förväntad livslängd, även om de behöver respiratorstöd, på minst 3 veckor.
• De är inga åldersbegränsningar för berättigande till detta protokoll.

Exklusions kriterier:

• Patienter som behöver höga doser av glukokortikosteroider (>0,5 mg/kg prednison eller motsvarande) som behandling för aktiv (grad 2-4) akut transplantat vs. värdsjukdom (GVHD) eller kronisk GVHD.
• Patienter som är döende.
• Patienter med andra tillstånd som inte är relaterade till CMV-infektion (t. okontrollerad bakteriell sepsis eller invasiv svampinfektion) som också är livshotande och som skulle utesluta utvärdering av effekterna av en T-cellsinfusion.

Donator Berättigande för donation av blodlymfocyter för generering av

Donator-härledda CMV-specifika T-celler:

Tillräcklig hälsa för donation enligt institutionella (relaterad givare) eller NMDP (oberoende givare) riktlinjer. Normala donatorer kommer att utvärderas för bevis på tidigare sensibilisering för CMV genom CMV-serologi. De kommer också att skrivas för HLA A, B, C och DR. För mottagare av allogena hematopoetiska progenitorcellstransplantationer (HSCT) kommer märgtransplantationsdonatorn att utgöra den valda donatorn, eftersom dessa T-celler kommer att växa och kvarstå hos en patient som redan har ympat med ett transplantat från den donatorn. Men om HSCT-givaren är CMV-seronegativ eller inte tillgänglig (t.ex. en navelsträngsblodtransplantation eller en obesläktad givare som inte redan har donerat T-celler för adoptivbehandling), matchade CMV-specifika T-celler som genererats från en seropositiv givare under minst 2 HLA-alleler som delas av patienten kan användas.

Normala givare som uppfyller dessa kriterier och som samtycker till att donera blod för generering av CMV-specifika T-celler för adoptivterapeutiska ändamål kommer att få en detaljerad klinisk utvärdering, inklusive en medicinsk historia, fysisk undersökning och serologiska tester för överförbara sjukdomar inom 1 vecka efter donationen inklusive hepBs Ag och hepatit C-antikropp, HIV-1 och 2, HTLV-1 och 2, CMV (endast om tidigare negativ), VDRL, WNV och Chagas En HIV+-givare kommer att avvisas på medicinska grunder. Donatorer måste ha ett Hgb-värde > 10 gm/dl och måste kunna genomgå en enda 3-6 enheter leukaferes (föredraget) eller en enda enhet blod för T-celler (för pediatriska donatorer, inte mer än 5 ml/kg vid någon blodprov).

En presumtiv givare kommer att informeras om syftet med denna studie och dess krav. Om han/hon samtycker kommer givaren att uppmanas att lämna två blodprover:

i. En första donation av 25 ml blod antikoagulerat med heparin eller ACD. Detta blod används för att etablera en B-cellinje transformerad med B95.8-laboratoriestammen av EBV. Denna EBV+ B-cellinje/(EBVBLCL) kommer att användas som en antigenpresenterande cell. När den laddas med poolen av CMVpp65-pentadekapeptider sensibiliserar EBVBLCL effektivt T-celler från samma donatorer mot CMV såväl som EBV.

Eftersom etablering och testning av en EBV-transformerad B-cellinje lämplig för användning eller som en antigenpresenterande cell kräver 4-5 veckors in vitro-odling, är det viktigt att detta prov tas så tidigt som möjligt för patienter med risk för en CMV-infektion. Eftersom patienter som får HSCT från icke-besläktade eller HLA-disparata donatorer löper särskilt stor risk för allvarliga CMV-infektioner under de första 2-3 månaderna efter transplantationen, bör detta blodprov tas från givaren före donation av hematopoetisk progenitorcellstransplantation när så är möjligt.

ii. En donation av antingen en enkel standard 2-blodvolym leukaferes uppsamlad i standard ACD-antikoagulant. Om det är omöjligt att samla in en leukaferes från några av donatorerna kommer en enhet helblod att accepteras. AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility som tillverkar cellprodukter av klinisk kvalitet under GMP-förhållanden i MSKCC) kanske bara kan generera ett begränsat antal T-celler från en blodenhet. Detta blod krävs för isolering av T-cellerna som ska sensibiliseras med poolen av CMVpp65 15-merer laddade på den autologa EBVBLCL och förökas in vitro. Dessutom krävs det att tillhandahålla autologa matarceller som är nödvändiga för att upprätthålla T-celltillväxt utan risk för att stimulera tillväxten av alloreaktiva T-celler som kan inducera GVHD.

Denna donation av en leukaferes eller en blodenhet kommer att erhållas från icke-relaterade HSCT-givare minst 2 veckor efter deras donation av en HSCT, eller så snart som möjligt därefter.

För att begränsa antalet blod- eller leukaferesdonationer som skulle krävas av en donator, kommer varje donator att informeras om följande potentiella tillämpningar av de donerade blodkropparna. De vita blodkropparna som ingår i en leukaferes är tillräckliga för att växa tillräckligt med T-celler för att behandla de tre tillstånden nedan hos en transplanterad patient:

1. Användning av celler för att generera CMV-specifika T-celler för potentiell användning vid behandling av patienten för vilken donatorn har tillhandahållit en HSCT, under MSKCC IRB # 05-065.

2. Användningen av en bråkdel av cellerna isolerade för att generera:

   1. immuna T-celler specifika för ett annat virus, såsom Epstein-Barr-virus, som kan orsaka dödliga lymfom hos transplantationsmottagare, och
   2. immuna T-celler specifika för ett protein som kallas WT-1, som uttrycks differentiellt av maligna blodkroppar.

   Sådana T-celler skulle kunna användas, enligt separata protokoll, för att behandla EBV-associerade sjukdomar (IRB 95-024) och/eller för att behandla eller förhindra återfall av leukemi (07-055) hos patienten som får donatorns hematopoetiska stamcellstransplantation.

3. Donationen av immun-T-celler som genereras från givaren och som inte används för eller krävs av patienten för vilken de ursprungligen var avsedda till en bank av immunceller som kommer att lagras och bibehållas kryokonserverade under GMP-förhållanden i Adoptive Immune Cell Therapy Faciliteten vid MSKCC, Dessa lagrade T-celler, kan användas för behandling av andra patienter med CMV- eller EBV-infektioner/maligniteter som uttrycker HLA-alleler som delas av givaren.

Utöver dessa prospektivt samlade donatorer har vi, sedan initieringen av detta protokoll, genererat över 100 CMV-specifika T-celler för patienter med hög risk för infektion, varav mycket färre patienter har krävt behandling. Eftersom dessa patienter nu är längre än risken för CMV-infektion, kommer deras donatorer att kontaktas med ett separat samtycke för att tillåta användning av deras T-celler hos andra mottagare än de primära patienter som de ursprungligen donerade celler till.