Forsøk med donor-T-celler sensibilisert med pentadekapeptider av CMV-PP65-proteinet for behandling av cytomegalovirus (CMV)-infeksjoner etter allogene hematopoietiske stamcelletransplantasjoner

Inklusjonskriterier:

Før de mottar behandling, kan noen pasienter gjennomgå diagnostisk og/eller annen testing av vevet deres, hvis tilgjengelig, for å avgjøre om deres CMV-infiserte celler sannsynligvis vil reagere på behandling med CMV-spesifikke T-celler. Alternativt kan det kreves blodprøver for forskningstester for å fastslå at de CMV-spesifikke T-cellene ikke inneholder noen celler som kan reagere mot pasienten. Disse pasientene vil signere et eget samtykke før behandling. Hvis det fastslås at en pasient vil kvalifisere for og kan ha nytte av infusjoner av CMV CTL, vil han/hun fortsette med å signere standard behandlingssamtykke for MSKCC IRB # 05-065 og bli registrert og behandlet på prøve, hvis alle andre kvalifikasjoner kriterier er oppfylt.

• Hver pasient må tilfredsstille minst ett av følgende kriterier:
• Pasienten må ha en klinisk dokumentert tilstand assosiert med CMV (f. interstitiell pneumoni, hepatitt, netthinnebetennelse) eller
• Pasienten må ha mikrobiologiske bevis på CMV-viremi eller vevsinvasjon som attestert ved viral kultur, eller påvisning av CMV-antigenemi eller påvisning av nivåer av CMV-DNA i blod eller kroppsvæsker i samsvar med CMV-infeksjon.
• Pasientens CMV-infeksjon utvikler seg klinisk eller CMV-viremi er vedvarende eller økende (som vist ved kvantifisering av CMV-antigenemi eller CMV-DNA i blodet) til tross for to ukers induksjonsbehandling med antivirale legemidler.
• Pasienten har utviklet CMV-viremi som attesteres ved viral kultur, eller påvisning av CMV-antigenemi eller påvisning av nivåer av CMV-DNA i blod eller kroppsvæsker mens han har mottatt profylaktiske doser av antivirale legemidler for å forhindre CMV-infeksjon etter transplantasjon. eller
• pasienten er ikke i stand til å opprettholde behandling med antivirale legemidler på grunn av legemiddelassosierte toksisiteter (f. myelosuppresjon [ANC < 1000 ul/ml uten GCSF-støtte] eller nefrotoksisitet [korrigert kreatininclearance < enn eller lik 60 ml/min/1,73 m2 eller kreatinin >2 mg/dl]).
• Fordi CMV-infeksjoner er livstruende og kan involvere lungene, leveren, mage-tarmkanalen, hematopoietiske og sentralnervesystemer, og antivirale legemidler kan også kompromittere nyre- og hematopoetisk funksjon, vil dysfunksjoner i disse organene ikke påvirke kvalifikasjonen for denne protokollen.

Men for å være kvalifisert, bør pasientene oppfylle følgende kliniske kriterier:

• De må ha et stabilt blodtrykk og sirkulasjon, uten behov for pressorstøtte.
• De bør ha tilstrekkelig hjertefunksjon som demonstrert ved EKG og/eller ved ekkokardiografisk bevis.
• De bør ha en forventet levealder, selv om de trenger respiratorstøtte, på minst 3 uker.
• De er ingen aldersbegrensninger for kvalifisering for denne protokollen.

Ekskluderingskriterier:

• Pasienter som trenger høye doser av glukokortikosteroider (>0,5 mg/kg prednison eller tilsvarende) som behandling for aktiv (grad 2-4) akutt graft vs. vert sykdom (GVHD) eller kronisk GVHD.
• Pasienter som er døende.
• Pasienter med andre tilstander som ikke er relatert til CMV-infeksjon (f. ukontrollert bakteriell sepsis eller invasiv soppinfeksjon) som også er livstruende og som vil utelukke evaluering av effekten av en T-celleinfusjon.

Donor berettiget til donasjon av blodlymfocytter for generering av

Donor-avledede CMV-spesifikke T-celler:

Tilstrekkelig helse for donasjon som bestemt av institusjonelle (relatert donor) eller NMDP (urelatert donor) retningslinjer. Normale donorer vil bli evaluert for bevis på tidligere sensibilisering for CMV ved CMV-serologi. De vil også bli skrevet for HLA A, B, C og DR. For mottakere av allogen hematopoietisk progenitorcelletransplantasjon (HSCT), vil margtransplantasjonsdonoren utgjøre den foretrukne donoren, siden disse T-cellene vil vokse og vedvare i en pasient som allerede har transplantert med en transplantasjon fra den donoren. Men hvis HSCT-donoren er CMV-seronegativ eller ikke tilgjengelig (f.eks. en navlestrengsblodtransplantasjon eller en ubeslektet donor som ikke allerede har donert T-celler for adoptivterapi), matchet CMV-spesifikke T-celler generert fra en seropositiv donor i minst 2 HLA-alleler som deles av pasienten kan brukes.

Normale givere som oppfyller disse kriteriene og samtykker i å donere blod for generering av CMV-spesifikke T-celler for adoptivterapeutiske formål, vil motta en detaljert klinisk evaluering, inkludert en sykehistorie, fysisk undersøkelse og serologisk testing for overførbare sykdommer innen 1 uke etter donasjonen. inkludert hepBs Ag og hepatitt C antistoff, HIV-1 og 2, HTLV-1 og 2, CMV (bare hvis tidligere negativ), VDRL, WNV og Chagas En HIV+ donor vil bli avvist på medisinsk grunn. Donorer må ha Hgb-verdi > 10 gm/dl og må være i stand til å gjennomgå en enkelt 3-6 enheter leukaferese (fortrinnsvis) eller en enkelt enhet blod for T-celler (for pediatriske donorer, ikke mer enn 5 ml/kg på noen blodprøve).

En potensiell giver vil bli informert om formålet med denne studien og dens krav. Hvis han/hun samtykker, vil giveren bli bedt om å gi to blodprøver:

Jeg. En første donasjon av 25 ml blod antikoagulert med heparin eller ACD. Dette blodet brukes til å etablere en B-cellelinje transformert med B95.8-laboratoriestammen av EBV. Denne EBV+ B-cellelinjen/(EBVBLCL) vil bli brukt som en antigenpresenterende celle. Når den er lastet med poolen av CMVpp65 pentadekapeptider, sensibiliserer EBVBLCL effektivt T-celler fra de samme giverne mot CMV så vel som EBV.

Fordi etablering og testing av en EBV-transformert B-cellelinje egnet for bruk eller som en antigenpresenterende celle krever 4-5 ukers in vitro-kultur, er det viktig at denne prøven tas så tidlig som mulig for pasienter med risiko for en CMV-infeksjon. Fordi pasienter som mottar HSCT fra urelaterte eller HLA-disparate donorer er spesielt utsatt for alvorlige CMV-infeksjoner i løpet av de første 2-3 månedene etter transplantasjon, bør denne blodprøven tas fra giveren før donasjon av hematopoetisk stamcelletransplantasjon når det er mulig.

ii. En donasjon av enten en enkelt standard 2 blodvolum leukaferese samlet i standard ACD antikoagulant. Hvis det er umulig å samle en leukaferese fra noen av giverne, vil en enhet fullblod være akseptabelt. Imidlertid kan AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility som produserer celleprodukter av klinisk kvalitet under GMP-betingelser i MSKCC) bare være i stand til å generere et begrenset antall T-celler fra en blodenhet. Dette blodet er nødvendig for isolering av T-cellene for å bli sensibilisert med poolen av CMVpp65 15-merer lastet på den autologe EBVBLCL, og forplantet in vitro. I tillegg er det nødvendig å tilveiebringe autologe fødeceller som er essensielle for å opprettholde T-cellevekst uten risiko for å stimulere veksten av alloreaktive T-celler som er i stand til å indusere GVHD.

Denne donasjonen av en leukaferese eller en blodenhet vil bli innhentet fra ubeslektede HSCT-givere minst 2 uker etter deres donasjon av en HSCT, eller så snart som mulig deretter.

For å begrense antallet blod- eller leukaferesedonasjoner som vil kreves av enhver donor, vil hver donor bli informert om følgende potensielle anvendelser av blodcellene som doneres. De hvite cellene i en leukaferese er tilstrekkelig til å vokse nok T-celler til å behandle de tre tilstandene nedenfor hos en transplantert pasient:

1. Bruken av celler for å generere CMV-spesifikke T-celler for potensiell bruk i behandlingen av pasienten som giveren har gitt en HSCT for, under MSKCC IRB # 05-065.

2. Bruken av en brøkdel av cellene isolert for å generere:

   1. immune T-celler spesifikke for et annet virus, som Epstein-Barr-virus, som kan forårsake dødelige lymfomer hos transplanterte mottakere, og
   2. immune T-celler spesifikke for et protein kalt WT-1, som uttrykkes differensielt av ondartede blodceller.

   Slike T-celler kan brukes, under separate protokoller, for å behandle EBV-assosierte sykdommer (IRB 95-024) og/eller for å behandle eller forhindre tilbakefall av leukemi (07-055) hos pasienten som mottar donorens hematopoetiske stamcelletransplantasjon.

3. Donasjonen av immun-T-cellene generert fra giveren som ikke brukes til eller kreves av pasienten som de opprinnelig var ment for, til en bank av immunceller som vil bli lagret og vedlikeholdt kryokonservert under GMP-betingelser i Adoptive Immune Cell Therapy Fasilitet ved MSKCC, Disse lagrede T-cellene, kan brukes til behandling av andre pasienter med CMV- eller EBV-infeksjoner/maligniteter som uttrykker HLA-alleler som deles av giveren.

I tillegg til disse prospektivt påløpte giverne har vi siden starten av denne protokollen generert over 100 CMV-spesifikke T-celler for pasienter med høy risiko for infeksjon, hvorav langt færre pasienter har krevd behandling. Siden disse pasientene nå er utenfor risikoperioden for CMV-infeksjon, vil deres givere bli kontaktet med et eget samtykke for å tillate bruk av T-cellene deres hos andre mottakere enn primærpasientene som de opprinnelig donerte celler for.