Versuch mit Spender-T-Zellen, die mit Pentadecapeptiden des CMV-PP65-Proteins zur Behandlung von Cytomegalovirus (CMV)-Infektionen nach allogenen hämatopoetischen Stammzelltransplantationen sensibilisiert wurden

Einschlusskriterien:

Vor der Behandlung werden einige Patienten gegebenenfalls diagnostischen und/oder anderen Gewebetests unterzogen, um festzustellen, ob ihre CMV-infizierten Zellen wahrscheinlich auf eine Behandlung mit CMV-spezifischen T-Zellen ansprechen. Alternativ können Blutproben für Forschungstests erforderlich sein, um sicherzustellen, dass die CMV-spezifischen T-Zellen keine Zellen enthalten, die gegen den Patienten reagieren könnten. Diese Patienten werden eine separate Einwilligung vor der Behandlung unterzeichnen. Wenn festgestellt wird, dass ein Patient für Infusionen von CMV-CTL geeignet ist und davon profitieren könnte, wird er/sie die Standardbehandlungszustimmung für MSKCC IRB Nr. 05-065 unterzeichnen und bei allen anderen Voraussetzungen für die Studie eingeschrieben und behandelt Kriterien erfüllt sind.

• Jeder Patient muss mindestens eines der folgenden Kriterien erfüllen:
• Der Patient muss einen klinisch dokumentierten Zustand im Zusammenhang mit CMV haben (z. interstitielle Pneumonie, Hepatitis, Retinitis) oder
• Der Patient muss einen mikrobiologischen Nachweis einer CMV-Virämie oder einer Gewebeinvasion haben, wie durch eine Viruskultur bestätigt, oder einen Nachweis einer CMV-Antigenämie oder einen Nachweis von CMV-DNA-Spiegeln in Blut oder Körperflüssigkeiten, die einer CMV-Infektion entsprechen.
• Die CMV-Infektion des Patienten schreitet klinisch voran oder die CMV-Virämie ist trotz zweiwöchiger Induktionstherapie mit antiviralen Medikamenten anhaltend oder nimmt zu (wie durch Quantifizierung der CMV-Antigenämie oder CMV-DNA im Blut belegt).
• Der Patient hat eine CMV-Virämie entwickelt, wie durch eine Viruskultur bestätigt, oder der Nachweis einer CMV-Antigenämie oder der Nachweis von CMV-DNA-Spiegeln in Blut oder Körperflüssigkeiten, während er prophylaktische Dosen antiviraler Medikamente erhielt, um eine CMV-Infektion nach der Transplantation zu verhindern. oder
• Der Patient kann die Behandlung mit antiviralen Medikamenten aufgrund arzneimittelbedingter Toxizitäten (z. Myelosuppression [ANC < 1000 ul/ml ohne GCSF-Unterstützung] oder Nephrotoxizität [korrigierte Kreatinin-Clearance < als oder gleich 60 ml/min/1,73 m2 oder Kreatinin > 2 mg/dl]).
• Da CMV-Infektionen lebensbedrohlich sind und Lunge, Leber, Magen-Darm-Trakt, hämatopoetische und zentrale Nervensysteme betreffen können und antivirale Medikamente auch die Nieren- und hämatopoetische Funktion beeinträchtigen können, beeinträchtigen Funktionsstörungen dieser Organe die Eignung für dieses Protokoll nicht.

Um jedoch in Frage zu kommen, sollten die Patienten die folgenden klinischen Kriterien erfüllen:

• Sie müssen einen stabilen Blutdruck und Kreislauf haben und benötigen keine Pressorunterstützung.
• Sie sollten über eine ausreichende Herzfunktion verfügen, wie durch EKG und/oder echokardiographischen Nachweis nachgewiesen.
• Sie sollten eine Lebenserwartung von mindestens 3 Wochen haben, auch wenn sie eine Atemschutzunterstützung benötigen.
• Es gibt keine Altersbeschränkungen für die Eignung für dieses Protokoll.

Ausschlusskriterien:

• Patienten, die hohe Dosen von Glukokortikosteroiden (> 0,5 mg/kg Prednison oder dessen Äquivalent) zur Behandlung einer aktiven (Grad 2-4) akuten Graft-versus-Host-Disease (GVHD) oder chronischen GVHD benötigen.
• Patienten, die moribund sind.
• Patienten mit anderen Erkrankungen, die nicht mit einer CMV-Infektion zusammenhängen (z. unkontrollierte bakterielle Sepsis oder invasive Pilzinfektion), die ebenfalls lebensbedrohlich sind und die Bewertung der Wirkungen einer T-Zell-Infusion ausschließen würden.

Eignung des Spenders für die Spende von Blut-Lymphozyten zur Erzeugung von

Vom Spender stammende CMV-spezifische T-Zellen:

Angemessene Gesundheit für die Spende gemäß den Richtlinien der Institution (verwandter Spender) oder NMDP (unverwandter Spender). Normale Spender werden auf Anzeichen einer früheren Sensibilisierung gegenüber CMV durch CMV-Serologie untersucht. Sie werden auch für HLA A, B, C und DR typisiert. Für Empfänger von allogenen hämatopoetischen Vorläuferzelltransplantaten (HSCT) stellt der Marktransplantatspender den Spender der Wahl dar, da diese T-Zellen in einem Patienten wachsen und bestehen bleiben, der bereits mit einem Transplantat dieses Spenders transplantiert wurde. Wenn der HSCT-Spender jedoch CMV-seronegativ oder nicht verfügbar ist (z. B. eine Nabelschnurbluttransplantation oder ein nicht verwandter Spender, der noch keine T-Zellen für eine adoptive Therapie gespendet hat), sind CMV-spezifische T-Zellen, die von einem seropositiven Spender generiert wurden, mindestens passend Es können 2 vom Patienten geteilte HLA-Allele verwendet werden.

Normale Spender, die diese Kriterien erfüllen und einer Blutspende für die Generierung von CMV-spezifischen T-Zellen für adoptive therapeutische Zwecke zustimmen, erhalten eine detaillierte klinische Bewertung, einschließlich einer Anamnese, körperlichen Untersuchung und serologischen Tests auf übertragbare Krankheiten innerhalb von 1 Woche nach der Spende einschließlich hepBs Ag und Hepatitis-C-Antikörper, HIV-1 und 2, HTLV-1 und 2, CMV (nur wenn zuvor negativ), VDRL, WNV und Chagas Ein HIV+-Spender wird aus medizinischen Gründen abgelehnt. Spender müssen einen Hgb-Wert > 10 gm/dl haben und in der Lage sein, sich einer einzelnen Leukapherese von 3-6 Einheiten (bevorzugt) oder einer einzelnen Bluteinheit für T-Zellen (für pädiatrische Spender nicht mehr als 5 ml/kg auf einmal) zu unterziehen Blutabnahme).

Ein potenzieller Spender wird über den Zweck dieser Studie und ihre Anforderungen informiert. Wenn er/sie zustimmt, wird der Spender aufgefordert, zwei Blutproben abzugeben:

ich. Eine anfängliche Spende von 25 ml mit Heparin oder ACD antikoaguliertem Blut. Dieses Blut wird verwendet, um eine B-Zelllinie zu etablieren, die mit dem B95.8-Laborstamm von EBV transformiert ist. Diese EBV+ B-Zelllinie/ (EBVBLCL) wird als Antigen-präsentierende Zelle verwendet. Wenn es mit dem Pool von CMVpp65-Pentadecapeptiden beladen wird, sensibilisiert das EBVBLCL effizient T-Zellen von denselben Spendern sowohl gegen CMV als auch gegen EBV.

Da die Etablierung und Testung einer EBV-transformierten B-Zelllinie, die zur Verwendung oder als Antigen-präsentierende Zelle geeignet ist, eine 4–5-wöchige In-vitro-Kultur erfordert, ist es wichtig, dass diese Probe so früh wie möglich für Patienten mit einem Risiko für a CMV-Infektion. Da Patienten, die eine HSCT von nicht verwandten oder HLA-fremden Spendern erhalten, in den ersten 2-3 Monaten nach der Transplantation besonders gefährdet sind, schwere CMV-Infektionen zu erleiden, sollte diese Blutprobe nach Möglichkeit vor der Spende der hämatopoetischen Vorläuferzelltransplantation vom Spender entnommen werden.

ii. Eine Spende von entweder einem einzelnen Standard-2-Blutvolumen-Leukapherese, gesammelt in Standard-ACD-Antikoagulans. Wenn es bei einigen Spendern nicht möglich ist, eine Leukapherese zu entnehmen, ist eine Einheit Vollblut akzeptabel. Die AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility, die Zellprodukte in klinischer Qualität unter GMP-Bedingungen in MSKCC herstellt) ist jedoch möglicherweise nur in der Lage, eine begrenzte Anzahl von T-Zellen aus einer Bluteinheit zu erzeugen. Dieses Blut wird für die Isolierung der T-Zellen benötigt, die mit dem Pool von CMVpp65-15-meren, die auf das autologe EBVBLCL geladen und in vitro vermehrt werden sollen, sensibilisiert werden sollen. Darüber hinaus ist es erforderlich, autologe Feeder-Zellen bereitzustellen, die für die Aufrechterhaltung des T-Zellwachstums unerlässlich sind, ohne das Risiko einzugehen, das Wachstum alloreaktiver T-Zellen zu stimulieren, die GVHD induzieren können.

Diese Spende einer Leukapherese oder einer Bluteinheit wird von nicht verwandten HSCT-Spendern mindestens 2 Wochen nach ihrer Spende eines HSCT oder so bald wie möglich danach erhalten.

Um die Anzahl der Blut- oder Leukapheresespenden zu begrenzen, die von einem Spender benötigt würden, wird jeder Spender über die folgenden möglichen Anwendungen der gespendeten Blutzellen informiert. Die in einer Leukapherese enthaltenen weißen Blutkörperchen reichen aus, um genügend T-Zellen zu züchten, um die drei folgenden Erkrankungen bei einem Transplantationspatienten zu behandeln:

1. Die Verwendung von Zellen zur Erzeugung CMV-spezifischer T-Zellen zur potenziellen Verwendung bei der Behandlung von Patienten, für die der Spender eine HSCT bereitgestellt hat, unter MSKCC IRB # 05-065.

2. Die Verwendung eines Bruchteils der isolierten Zellen zur Erzeugung von:

   1. Immun-T-Zellen, die für ein anderes Virus spezifisch sind, wie z. B. das Epstein-Barr-Virus, das bei Transplantatempfängern tödliche Lymphome verursachen kann, und
   2. Immun-T-Zellen, die für ein Protein namens WT-1 spezifisch sind, das von malignen Blutzellen unterschiedlich exprimiert wird.

   Solche T-Zellen könnten unter separaten Protokollen zur Behandlung von EBV-assoziierten Erkrankungen (IRB 95-024) und/oder zur Behandlung oder Vorbeugung eines Wiederauftretens von Leukämie (07-055) bei dem Patienten verwendet werden, der das hämatopoetische Vorläuferzelltransplantat des Spenders erhält.

3. Die Spende der vom Spender generierten Immun-T-Zellen, die nicht für den Patienten, für den sie ursprünglich bestimmt waren, verwendet oder von diesem benötigt werden, an eine Bank von Immunzellen, die unter GMP-Bedingungen in der adoptiven Immunzelltherapie gelagert und kryokonserviert werden Einrichtung am MSKCC, Diese gelagerten T-Zellen können für die Behandlung anderer Patienten mit CMV- oder EBV-Infektionen/Malignomen verwendet werden, die HLA-Allele exprimieren, die der Spender teilt.

Zusätzlich zu diesen prospektiv gewonnenen Spendern haben wir seit Beginn dieses Protokolls über 100 CMV-spezifische T-Zellen für Patienten mit hohem Infektionsrisiko generiert, von denen weit weniger Patienten eine Behandlung benötigten. Da diese Patienten jetzt den Risikozeitraum für eine CMV-Infektion überschritten haben, werden ihre Spender mit einer separaten Zustimmung angesprochen, um die Verwendung ihrer T-Zellen bei anderen Empfängern als den primären Patienten zu ermöglichen, für die sie ursprünglich Zellen gespendet haben.