Prova di cellule T del donatore sensibilizzate con pentadecapeptidi della proteina CMV-PP65 per il trattamento delle infezioni da citomegalovirus (CMV) a seguito di trapianti di cellule staminali emopoietiche allogeniche

Criterio di inclusione:

Prima di ricevere il trattamento, alcuni pazienti possono sottoporsi a test diagnostici e/o di altro tipo sui loro tessuti, se disponibili, per determinare se è probabile che le loro cellule infette da CMV rispondano al trattamento con cellule T specifiche per CMV. In alternativa, possono essere richiesti campioni di sangue per i test di ricerca per accertare che le cellule T specifiche del CMV non contengano cellule che potrebbero reagire contro il paziente. Questi pazienti firmeranno un consenso pre-trattamento separato. Se viene determinato che un paziente si qualificherà e potrebbe beneficiare delle infusioni di CMV CTL, firmerà il consenso al trattamento standard per MSKCC IRB n. i criteri sono soddisfatti.

• Ogni paziente deve soddisfare almeno uno dei seguenti criteri:
• Il paziente deve avere una condizione clinicamente documentata associata a CMV (ad es. polmonite interstiziale, epatite, retinite) o
• Il paziente deve avere evidenza microbiologica di viremia da CMV o invasione tissutale come attestato dalla coltura virale, o rilevamento di antigenemia da CMV o rilevamento di livelli di DNA di CMV nel sangue o nei fluidi corporei coerenti con l'infezione da CMV.
• L'infezione da CMV del paziente è clinicamente in progressione o la viremia da CMV è persistente o in aumento (come evidenziato dalla quantificazione dell'antigenemia da CMV o dal DNA di CMV nel sangue) nonostante due settimane di terapia di induzione con farmaci antivirali.
• Il paziente ha sviluppato viremia da CMV come attestato dalla coltura virale, o dal rilevamento di antigenemia da CMV o dal rilevamento di livelli di DNA di CMV nel sangue o nei fluidi corporei mentre riceveva dosi profilattiche di farmaci antivirali per prevenire l'infezione da CMV dopo il trapianto. o
• il paziente non è in grado di sostenere il trattamento con farmaci antivirali a causa di tossicità associate al farmaco (ad es. mielosoppressione [ANC < 1000 ul/ml senza supporto GCSF] o nefrotossicità [clearance corretta della creatinina < o uguale a 60 ml/min/1,73 m2 o creatinina > 2 mg/dl]).
• Poiché le infezioni da CMV sono pericolose per la vita e possono coinvolgere i polmoni, il fegato, il tratto gastrointestinale, il sistema ematopoietico e nervoso centrale e i farmaci antivirali possono anche compromettere la funzione renale ed ematopoietica, le disfunzioni di questi organi non influiranno sull'ammissibilità a questo protocollo.

Tuttavia, per essere ammissibili, i pazienti devono soddisfare i seguenti criteri clinici:

• Devono avere una pressione sanguigna e una circolazione stabili, non richiedono supporto pressorio.
• Devono avere una funzione cardiaca adeguata, come dimostrato dall'ECG e/o dall'evidenza ecocardiografica.
• Dovrebbero avere un'aspettativa di vita, anche se richiedono il supporto del respiratore, di almeno 3 settimane.
• Non ci sono limiti di età per l'ammissibilità a questo protocollo.

Criteri di esclusione:

• Pazienti che richiedono alte dosi di glucocorticosteroidi (>0,5 mg/kg di prednisone o suo equivalente) come trattamento per la malattia acuta del trapianto contro l'ospite (GVHD) attiva (grado 2-4) o per la GVHD cronica.
• Pazienti moribondi.
• Pazienti con altre condizioni non correlate all'infezione da CMV (ad es. sepsi batterica incontrollata o infezione fungina invasiva) che sono anche pericolose per la vita e che precluderebbero la valutazione degli effetti di un'infusione di cellule T.

Idoneità del donatore alla donazione di linfociti del sangue per la generazione di

Cellule T specifiche per CMV derivate da donatori:

Salute adeguata per la donazione come determinato dalle linee guida istituzionali (donatore correlato) o NMDP (donatore non correlato). I donatori normali saranno valutati per evidenza di precedente sensibilizzazione al CMV mediante sierologia CMV. Saranno anche tipizzati per HLA A, B, C e DR. Per i riceventi di trapianto allogenico di cellule progenitrici ematopoietiche (HSCT), il donatore di trapianto di midollo costituirà il donatore di scelta, poiché quelle cellule T cresceranno e persisteranno in un paziente che si è già innestato con un trapianto da quel donatore. Tuttavia, se il donatore di HSCT è CMV sieronegativo o non disponibile (ad esempio un trapianto di sangue cordonale o un donatore non imparentato che non ha già donato cellule T per la terapia adottiva), le cellule T specifiche per CMV generate da un donatore sieropositivo abbinate per almeno Possono essere utilizzati 2 alleli HLA condivisi dal paziente.

I donatori normali che soddisfano questi criteri e che acconsentono a donare il sangue per la generazione di cellule T specifiche per CMV per scopi terapeutici adottivi riceveranno una valutazione clinica dettagliata, che comprende anamnesi, esame fisico e test sierologici per le malattie trasmissibili entro 1 settimana dalla donazione inclusi hepBs Ag e anticorpo dell'epatite C, HIV-1 e 2, HTLV-1 e 2, CMV (solo se precedentemente negativo), VDRL, WNV e Chagas Un donatore HIV+ sarà rifiutato per motivi medici. I donatori devono avere un valore di Hgb > 10 gm/dl e devono essere in grado di sottoporsi a una singola leucaferesi di 3-6 unità (preferibile) o a una singola unità di sangue per cellule T (per i donatori pediatrici, non più di 5 ml/kg per volta) prelievo di sangue).

Un potenziale donatore sarà informato degli scopi di questo studio e dei suoi requisiti. Se acconsente, al donatore verrà richiesto di fornire due campioni di sangue:

io. Una donazione iniziale di 25 ml di sangue anticoagulato con eparina o ACD. Questo sangue viene utilizzato per stabilire una linea cellulare B trasformata con il ceppo di laboratorio B95.8 di EBV. Questa linea cellulare EBV+ B/ (EBVBLCL) verrà utilizzata come cellula presentante l'antigene. Quando viene caricato con il pool di pentadecapeptidi CMVpp65, l'EBVBLCL sensibilizza efficacemente le cellule T degli stessi donatori contro CMV e EBV.

Poiché la creazione e l'analisi di una linea cellulare B trasformata da EBV idonea all'uso o come cellula presentante l'antigene richiedono 4-5 settimane di coltura in vitro, è importante che questo campione sia ottenuto il prima possibile per i pazienti a rischio di infezione Infezione da CMV. Poiché i pazienti sottoposti a HSCT da donatori non imparentati o HLA disparati sono particolarmente a rischio di gravi infezioni da CMV nei primi 2-3 mesi dopo il trapianto, questo campione di sangue dovrebbe essere ottenuto dal donatore prima della donazione del trapianto di cellule progenitrici emopoietiche quando possibile.

ii. Una donazione di una singola leucaferesi del volume sanguigno standard 2 raccolta in anticoagulante ACD standard. Se è impossibile raccogliere una leucaferesi da alcuni dei donatori, sarà accettabile un'unità di sangue intero. Tuttavia, l'AICTF (Adoptive Immune Cell Therapy Facility che produce i prodotti cellulari di grado clinico in condizioni GMP in MSKCC) potrebbe essere in grado di generare solo un numero limitato di cellule T da un'unità di sangue. Questo sangue è necessario per l'isolamento delle cellule T da sensibilizzare con il pool di CMVpp65 15-meri caricato sull'EBVBLCL autologo e propagato in vitro. Inoltre, è necessario fornire cellule feeder autologhe essenziali per sostenere la crescita delle cellule T senza il rischio di stimolare la crescita delle cellule T alloreattive in grado di indurre la GVHD.

Questa donazione di una leucaferesi o di un'unità di sangue sarà ottenuta da donatori di HSCT non imparentati almeno 2 settimane dopo la loro donazione di un HSCT, o il più presto possibile dopo.

Al fine di limitare il numero di donazioni di sangue o leucaferesi che sarebbero richieste a qualsiasi donatore, ciascun donatore sarà informato delle seguenti potenziali applicazioni delle cellule del sangue donate. I globuli bianchi contenuti in una leucaferesi sono sufficienti per far crescere un numero sufficiente di cellule T per trattare le tre seguenti condizioni in un paziente trapiantato:

1. L'uso di cellule per generare cellule T specifiche per CMV per un potenziale utilizzo nel trattamento del paziente per il quale il donatore ha fornito un HSCT, sotto MSKCC IRB # 05-065.

2. L'uso di una frazione delle cellule isolate per generare:

   1. cellule T immunitarie specifiche per un altro virus, come il virus di Epstein-Barr, che può causare linfomi letali nei riceventi di trapianto, e
   2. cellule T immunitarie specifiche per una proteina chiamata WT-1, che è espressa in modo differenziato dalle cellule del sangue maligne.

   Tali cellule T potrebbero essere utilizzate, secondo protocolli separati, per trattare malattie associate a EBV (IRB 95-024) e/o per trattare o prevenire recidive di leucemia (07-055) nel paziente che riceve il trapianto di cellule progenitrici emopoietiche del donatore.

3. La donazione delle cellule T immunitarie generate dal donatore che non sono utilizzate o richieste dal paziente per il quale erano originariamente destinate a una banca di cellule immunitarie che saranno conservate e mantenute criopreservate in condizioni GMP nella terapia cellulare immunitaria adottiva Struttura presso MSKCC, queste cellule T immagazzinate possono essere utilizzate per il trattamento di altri pazienti con infezioni/neoplasie da CMV o EBV che esprimono alleli HLA condivisi dal donatore.

Oltre a questi donatori maturati in modo prospettico, dall'inizio di questo protocollo, abbiamo generato oltre 100 cellule T specifiche per CMV per pazienti ad alto rischio di infezione, di cui molti meno pazienti hanno richiesto un trattamento. Poiché questi pazienti sono ora oltre il periodo di rischio per l'infezione da CMV, i loro donatori saranno contattati con un consenso separato per consentire l'uso delle loro cellule T in riceventi diversi dai pazienti primari per i quali inizialmente hanno donato le cellule.