Trisomi af kromosom 21-diagnose ved høj output-sekventering (SEQ21)

Begrundelse for undersøgelsen:

Trisomi 21 er den hyppigste årsag til handicap af genetisk oprindelse med en forekomst på 1,3/1 000 fødsler, som stiger med moderens alder. Adskillige strategier til antenatal screening blev udviklet. The High Authority of Health anbefalede for nylig at foreslå gravide kvinder en kombineret screening i 1. trimester, realiseret mellem 11+0 og 13+6 ugers amenoré, associeret mål for NUCALE-gennemskinneligheden og doseringen i moderens serum: PAPP-A (Pregnancy Associated Plasma Protein A) og βhCG (frit β humant chorionisk 1. trimester Gonadotrophin). Følsomheden af ​​disse screeningstest er dog omkring 80 % for 5 % af positive falske. Diagnosen aneuploidi stilles derefter på en population, der er klassificeret med høj risiko, ved en føtal karyotype (der kræver en invasiv procedure: biopsi af trofoblast eller fostervandsprøve). En positiv screening øger mødres og medicinske angst. Desuden er den uhensigtsmæssige kombination af testene årsagen til adskillige ubrugelige invasive procedurer (national andel af fostervandsprøver på 11 %) med risiko for fostertab (0,5 ud af 1 %). Denne inflation af invasive procedurer fører til så mange tab af ikke-ramte børn som trisomiske børn og til en dårligt kendt morbiditet.

Adskillige undersøgelser viste, at 10 % af det frie DNA fundet fra den første fjerdedel af graviditeten i moderens plasma er af føtal oprindelse, og at dette DNA er specifikt for det føtale nukleare DNA fra den aktuelle graviditet. Dette åbnede vejen for en mulig ikke-invasiv antenatal diagnose af føtal aneuploidi, som kolliderede i løbet af de sidste 10 år med ydeevnen begrænset af isolationen og af sekventeringen af ​​fosterets DNA i moderens plasma. En ny analyseteknik ved bredbåndssekventering af DNA'et, der cirkulerer i moderens blod, til diagnosticering af den hyppigste aneuploid, hvis trisomi 21 blev bragt tilbage (rapporteret). High-output haglgevær-sekventering af alt DNA, der cirkulerer i moderens blod, derefter aflæsning og identifikation af alle kromosomsekvenserne gør det muligt at analysere mængden af ​​DNA, der stammer fra det overtallige kromosom, uden at det er nødvendigt at differentiere moder- og foster-DNA. På grundlag af meget nyere værker 10 tillader dette overskud af sekvenser, der specifikt stammer fra kromosom 21 føtale overtallige, en fuldstændig skelnen mellem trisomi 21 og disomi 21. Imidlertid analyserede denne undersøgelse kun 9 tilfælde af trisomi 21, og prøveudtagningen af ​​moderens blod blev realiseret efter fostervandsprøven eller choriocentese, hvad der kunstigt kunne have øget mængden af ​​cirkulerende føtalt DNA.

Mål:

Demonstrere, at High-output haglgeværsekventeringen af ​​fosterets DNA i moderens blod kunne tillade en fuldstændig skelnen mellem mødrene til et trisomisk foster 21 eller et DISOMIQUE foster 21 fra det første kvartal af graviditeten, og således at opnå et pålideligt alternativ i invasiv procedure.

Metode To offentlige centre for prænatal screening blev oprettet for specifikt at svare på anbefalingerne fra Den Høje Sundhedsmyndighed og har kapacitet til at foretage 20 000 screeninger om året. Alle kvinder med høj risiko (> 1/250) for aneuploidi og kandidater til en invasiv procedure vil foreslå at deltage i undersøgelsen. De inkluderede patienter vil få en moderblodprøve før den invasive test. Denne udtagning vil blive sat i bero ved -80°C efter centrifugering i henhold til den anbefalede protokol. Ved afslutningen af ​​inklusion vil teknikken til analyse af det cirkulerende DNA blive realiseret og derefter blindt af laboratoriet på alle de diagnosticerede tilfælde (ved sædvanlig invasiv undersøgelse eller ved afslutningen af ​​graviditeten) af trisomi 21 og på kontrol, der er repræsentativ for alle spøgelset for risikoniveauerne. En undersøgelse af reproducerbarheden af ​​kvantificeringen af ​​DNA'et fra kromosom 21 vil blive realiseret.

Antal fag:

vi planlægger at inkludere 75 tilfælde af trisomi 21 og 150 kontroltilfælde med normal karyotype, hvilket gør det muligt at detektere en 99,9 % sensibilitet og en 99,99 % specificitet med en styrke på mindst 95 %.

Undersøgelsens varighed:

disse mål er gennemførlige om to år på grundlag af antallet af invasive indsamlinger, der er realiseret i både center og en allerede realiseret undersøgelse

Etiske aspekter: forskning i data og biologisk indsamling. Der vil ikke blive truffet nogen individuel medicinsk beslutning i henhold til den estimerede test.

Perspektiver:

denne nye teknik, hvis den er generaliserbar, vil gøre det muligt at begrænse antallet af procedurer for invasiv diagnose (amniocentese og choriocentese), som indeholder en betydelig risiko for alvorlige maternelle og føtale komplikationer, samtidig med at kapaciteten af ​​denne screening optimeres.