Criopreservación de ovocitos: el impacto de la criopreservación en el huso meiótico y las mitocondrias de los ovocitos humanos. (WCFC)

La crioconservación de ovocitos (OC) tiene amplias aplicaciones en el campo de la endocrinología reproductiva para el manejo de problemas clínicos tanto en pacientes fértiles como infértiles. Por ejemplo, las mujeres fértiles jóvenes a las que se les diagnostican tumores malignos pueden congelar sus ovocitos antes de iniciar una radiación potencialmente tóxica o una terapia química contra el cáncer que puede volverlos estériles.

Utilizando la tecnología OC, hemos establecido un banco de ovocitos congelados utilizando donantes de óvulos sanas y compensadas que han sido preseleccionadas según los criterios de la FDA. Después de un tiempo de cuarentena adecuado, los ovocitos pueden descongelarse y ofrecerse a mujeres diagnosticadas con insuficiencia ovárica prematura o reserva ovárica disminuida. Esta aplicación de OC ya se ha mostrado prometedora al eliminar las complicaciones logísticas y clínicas asociadas con la donación tradicional de ovocitos utilizando ovocitos frescos de donantes.

Desde la perspectiva social, la criopreservación de ovocitos sobrantes en un ciclo de FIV puede eliminar algunas de las objeciones sociales y morales que rodean a la criopreservación de embriones. Actualmente, nuestra tasa de embarazo de ovocitos congelados (56 %) es equivalente a nuestra tasa de embarazo de embriones congelados (45 %). A las pacientes que han completado sus familias les resulta más fácil descartar ovocitos que embriones.

Finalmente, a las mujeres que toman la decisión personal de retrasar la maternidad se les puede ofrecer la opción de preservar sus ovocitos con el potencial para su uso posterior.

Las dos técnicas distintas que se utilizan actualmente para la crioconservación de ovocitos son: 1) congelación a velocidad controlada y 2) vitrificación. La congelación a velocidad controlada comparte algunas similitudes con la tecnología básica empleada para la criopreservación de embriones en casi todos los programas de FIV. La técnica implica la congelación lenta de embriones en soluciones crioprotectoras, a menudo combinadas con un congelador controlado por computadora para regular los cambios de temperatura. Los intentos de mejorar nuestra comprensión de la criobiología de los ovocitos han sido en su mayoría empíricos utilizando prueba y error. Solo se ha obtenido una experiencia limitada mediante la adopción de modelos científicos capaces de predecir el efecto del estrés "crio" impuesto a los ovocitos utilizando varios métodos de congelación (Fuller y Paynter, 2004; Paynter, 2005). En ausencia de estudios diseñados adecuadamente, los avances en la experiencia clínica con la congelación de ovocitos han sido muy limitados. Uno de los principales obstáculos para la implementación de la congelación de ovocitos había sido la incapacidad de lograr altas tasas de supervivencia reproducibles debido a un efecto importante en los orgánulos intracelulares. Por ejemplo, debido a su sensibilidad a bajas temperaturas, el huso de la metafase II siempre se ha considerado susceptible a alteraciones estructurales que potencialmente podrían interferir con la segregación cromosómica normal en la meiosis II. Además, el papel esencial de las mitocondrias en la función celular normal, la fertilización y el desarrollo embrionario temprano se ha descrito previamente (Jones et al., 2004).

Nuestro protocolo de congelación y descongelación modificado recientemente desarrollado ha mostrado constantemente altas tasas de recuperación, lo que lleva al optimismo de que el almacenamiento de ovocitos finalmente podría estar disponible en la práctica clínica. Pero queda por demostrar que la excelente supervivencia posterior a la descongelación coincide con la integridad celular y la competencia de desarrollo inalterada. Por lo tanto, antes de recomendar la adopción de la criopreservación de ovocitos, uno de nuestros objetivos es documentar el posible efecto de la criopreservación a nivel del huso meiótico y mitocondrial. Un objetivo importante de nuestro estudio es evaluar la viabilidad posterior a la descongelación y la integridad de los orgánulos de los ovocitos utilizando: 1) una técnica conservadora [análisis PolScope del huso meiótico] y 2) una técnica no conservativa [análisis de microscopía de fluorescencia del huso meiótico y mitocondrias] utilizando nuestro protocolo de criopreservación de ovocitos.

El desarrollo continuo en la tecnología de congelación está ocurriendo rápidamente. Se puede anticipar que en un futuro cercano, la congelación de óvulos tendrá tanto éxito como la criopreservación de embriones. Finalmente, a medida que se acumule más experiencia clínica con la congelación de óvulos, los datos de resultados aceptables determinarán el futuro de la congelación de óvulos. Hasta entonces, la criopreservación de ovocitos se debe utilizar en casos clínicos cuidadosamente seleccionados con información completa a la paciente sobre los riesgos y tasas de éxito limitadas.