Oocytcryopreservation: Indvirkningen af ​​cryopreservation på den meiotiske spindel og mitokondrier af humane oocytter. (WCFC)

Kryokonservering af oocytter (OC) har brede anvendelser inden for reproduktiv endokrinologi til håndtering af kliniske problemer hos både fertile og infertile patienter. For eksempel kan unge fertile kvinder, der er diagnosticeret med maligniteter, fryse deres oocytter, før de påbegynder potentielt toksisk stråling eller kemisk kræftbehandling, som kan gøre dem sterile.

Ved hjælp af OC-teknologien har vi etableret en frossen oocytbank med sunde, kompenserede ægdonorer, som er blevet forhåndsscreenet efter FDA-kriterier. Efter en passende karantænetid kan oocytter optøs og tilbydes til kvinder diagnosticeret med for tidlig ovariesvigt eller nedsat ovariereserve. Denne anvendelse af OC har allerede vist sig lovende ved at eliminere de logistiske og kliniske komplikationer forbundet med traditionel oocytdonation ved brug af friske oocytter fra donorer.

Fra et samfundsmæssigt perspektiv kan kryokonservering af overskydende oocytter i en IVF-cyklus fjerne nogle af de sociale og moralske indvendinger omkring embryokryokonservering. I øjeblikket svarer vores graviditetsrate for frosne oocytter (56%) til vores graviditetsrate for frosne embryoner (45%). Patienter, der har afsluttet deres familier, har lettere ved at kassere oocytter i forhold til embryoner.

Endelig kan kvinder, der træffer et personligt valg om at udskyde barsel, blive tilbudt muligheden for at bevare deres oocytter med mulighed for senere brug.

De to distinkte teknikker, der i øjeblikket anvendes til oocytkryokonservering, er: 1) frysning med kontrolleret hastighed og 2) forglasning. Indfrysning med kontrolleret hastighed deler nogle ligheder med den grundlæggende teknologi, der anvendes til embryokryokonservering i næsten alle IVF-programmer. Teknikken involverer langsom nedfrysning af embryoner i kryobeskyttende opløsninger, ofte kombineret med en computerstyret fryser for at regulere temperaturændringer. Forsøg på at forbedre vores forståelse af oocytkryobiologi har for det meste været empiriske ved at prøve og fejle. Der er kun opnået begrænset erfaring ved at anvende videnskabelige modeller, der er i stand til at forudsige effekten af ​​"cryo"-stress påført oocytter ved hjælp af forskellige frysemetoder (Fuller og Paynter, 2004; Paynter, 2005). I mangel af korrekt designede undersøgelser har fremskridt i klinisk erfaring med frysning af oocytter været meget begrænset. En af de største hindringer for implementeringen af ​​oocytfrysning havde været manglende evne til at opnå reproducerbare høje overlevelsesrater på grund af en vigtig effekt på de intracellulære organeller. For eksempel er metafase II-spindelen på grund af dens følsomhed ved lav temperatur altid blevet anset for at være modtagelig for strukturelle ændringer, som potentielt kan interferere med normal kromosomadskillelse ved meiose II. Derudover er mitokondriers væsentlige rolle i normal cellefunktion, befrugtning og tidlig embryoudvikling tidligere blevet beskrevet (Jones et al., 2004).

Vores nyligt udviklede modificerede fryse-tø-protokol har konsekvent vist høje genvindingsrater, hvilket har ført til optimisme om, at oocytopbevaring endelig kan blive tilgængelig i klinisk praksis. Men det mangler at blive påvist, at fremragende overlevelse efter optøning falder sammen med cellulær integritet og uændret udviklingskompetence. Derfor, før vi anbefaler vedtagelsen af ​​oocytkryokonservering, er et af vores mål at dokumentere den mulige effekt af kryokonservering på meiotisk spindel og mitokondrieniveau. Et vigtigt formål med vores undersøgelse er at vurdere oocytternes levedygtighed efter optøning og organelintegritet ved hjælp af: 1) en konservativ teknik [PolScope-analyse af meiotisk spindel] og 2) en ikke-konservativ teknik [fluorescensmikroskopianalyse af den meiotiske spindel og mitokondrier] ved hjælp af vores oocyt-kryokonserveringsprotokol.

Den fortsatte udvikling inden for fryseteknologi sker hurtigt. Det kan forventes, at ægfrysning i den nærmeste fremtid vil blive lige så vellykket som embryokryokonservering. Endelig, efterhånden som mere klinisk erfaring med ægfrysning akkumuleres, vil acceptable udfaldsdata bestemme fremtiden for ægfrysning. Indtil da bør oocytkryokonservering anvendes i nøje udvalgte kliniske tilfælde med fuld oplysning til patienten om risici og begrænsede succesrater.