Cryoconservation des ovocytes : l'impact de la cryoconservation sur le fuseau méiotique et les mitochondries des ovocytes humains. (WCFC)

La cryoconservation des ovocytes (OC) a de larges applications dans le domaine de l'endocrinologie de la reproduction pour la gestion des problèmes cliniques chez les patients fertiles et infertiles. Par exemple, les jeunes femmes fertiles qui reçoivent un diagnostic de malignité peuvent congeler leurs ovocytes avant de commencer une radiothérapie potentiellement toxique ou une thérapie anticancéreuse chimique qui peut les rendre stériles.

En utilisant la technologie OC, nous avons établi une banque d'ovocytes congelés en utilisant des donneurs d'ovules sains et rémunérés qui ont été présélectionnés selon les critères de la FDA. Après un temps de quarantaine approprié, les ovocytes peuvent être décongelés et offerts aux femmes diagnostiquées avec une insuffisance ovarienne prématurée ou une réserve ovarienne diminuée. Cette application de CO s'est déjà révélée prometteuse en éliminant les complications logistiques et cliniques associées au don traditionnel d'ovocytes à l'aide d'ovocytes frais provenant de donneuses.

Du point de vue sociétal, la cryoconservation des ovocytes excédentaires dans un cycle de FIV peut éliminer certaines des objections sociales et morales entourant la cryoconservation des embryons. Actuellement, notre taux de grossesse d'ovocytes congelés (56 %) est équivalent à notre taux de grossesse d'embryons congelés (45 %). Les patients, qui ont complété leurs familles, ont plus de facilité à jeter les ovocytes que les embryons.

Enfin, les femmes qui font le choix personnel de retarder la procréation peuvent se voir offrir la possibilité de conserver leurs ovocytes avec la possibilité d'une utilisation ultérieure.

Les deux techniques distinctes actuellement utilisées pour la cryoconservation des ovocytes sont : 1) la congélation à vitesse contrôlée et 2) la vitrification. La congélation à vitesse contrôlée partage certaines similitudes avec la technologie de base utilisée pour la cryoconservation des embryons dans presque tous les programmes de FIV. La technique implique la congélation lente des embryons dans des solutions cryoprotectrices, souvent combinées à un congélateur contrôlé par ordinateur pour réguler les changements de température. Les tentatives pour améliorer notre compréhension de la cryobiologie des ovocytes ont été principalement empiriques en utilisant des essais et des erreurs. Seule une expérience limitée a été acquise en adoptant des modèles scientifiques capables de prédire l'effet du stress « cryo » imposé aux ovocytes en utilisant diverses méthodes de congélation (Fuller et Paynter, 2004 ; Paynter, 2005). En l'absence d'études correctement conçues, les progrès de l'expérience clinique avec la congélation des ovocytes ont été très limités. L'un des principaux obstacles à la mise en œuvre de la congélation des ovocytes était l'incapacité d'atteindre des taux de survie élevés reproductibles en raison d'un effet important sur les organites intracellulaires. Par exemple, en raison de sa sensibilité à basse température, le fuseau en métaphase II a toujours été considéré comme sensible aux altérations structurelles susceptibles d'interférer avec la ségrégation normale des chromosomes lors de la méiose II. De plus, le rôle essentiel des mitochondries dans la fonction cellulaire normale, la fécondation et le développement précoce de l'embryon a déjà été décrit (Jones et al., 2004).

Notre protocole de congélation-décongélation modifié récemment développé a constamment montré des taux de récupération élevés, ce qui laisse espérer que le stockage des ovocytes pourrait enfin devenir disponible dans la pratique clinique. Mais il reste à démontrer qu'une excellente survie après décongélation coïncide avec une intégrité cellulaire et une compétence développementale inchangée. Par conséquent, avant de recommander l'adoption de la cryoconservation des ovocytes, l'un de nos objectifs est de documenter l'effet possible de la cryoconservation au niveau du fuseau méiotique et des mitochondries. Un objectif important de notre étude est d'évaluer la viabilité post-décongélation et l'intégrité des organites des ovocytes en utilisant : 1) une technique conservatrice [analyse PolScope du fuseau méiotique] et 2) une technique non conservatrice [analyse par microscopie à fluorescence du fuseau méiotique et mitochondries] en utilisant notre protocole de cryoconservation des ovocytes.

Le développement continu de la technologie de congélation se produit rapidement. On peut s'attendre à ce que dans un proche avenir, la congélation des ovules devienne aussi efficace que la cryoconservation des embryons. Enfin, à mesure que l'expérience clinique de la congélation des ovules s'accumule, des données de résultats acceptables détermineront l'avenir de la congélation des ovules. Jusque-là, la cryoconservation des ovocytes doit être utilisée dans des cas cliniques soigneusement sélectionnés avec une divulgation complète au patient concernant les risques et les taux de réussite limités.