Lactobreath: un estudio para diagnosticar la intolerancia a la lactosa mediante marcadores de aliento (Lactobreath)

Detección genética y de tolerancia a la lactosa Para todos los participantes elegibles, se realizará una prueba casera de detección. El kit de prueba de detección casera contendrá lactosa en polvo e información adjunta para que los sujetos realicen una prueba de tolerancia a la lactosa (de acuerdo con el protocolo LHBT) en casa. La prueba será una adaptación de directrices recientes (https://www.esnm.eu/guidelines.html) que proponen el uso de 25 g de lactosa para las pruebas de tolerancia a la lactosa, incluido un cuestionario para evaluar cuantitativamente los síntomas. El kit de prueba de detección casera también proporcionará material para recolectar una muestra de saliva para determinar los polimorfismos genéticos que comúnmente modulan la LP.

Se seleccionarán un total de 120 participantes y se distribuirán en tres grupos en función de sus perfiles genéticos de LP y su respuesta a la ingesta de 25 g de lactosa (solución de lactosa):

• 24 sujetos genéticamente LP sin síntomas gastrointestinales en respuesta a la ingestión de lactosa (grupo 1)
• 24 sujetos genéticamente no persistentes en lactasa (LNP) sin síntomas gastrointestinales en respuesta a la ingestión de lactosa (grupo 2)
• 72 sujetos genéticamente LNP con algún síntoma gastrointestinal en respuesta a la ingestión de lactosa (grupo 3).

Procedimientos del estudio Medidas iniciales: para cada sujeto, la medición inicial de la microbiota y la dieta se realizará dentro de las cuatro semanas posteriores al día de la intervención. La evaluación de la dieta y la caracterización genómica de la microbiota fecal se realizarán en paralelo a medidas repetidas.

• Se completarán cuatro retiros dietéticos de 24 h utilizando una versión adaptada de la plataforma online myfood24 en cuatro días consecutivos, durante los días -30 a -7, antes del día de intervención.
• Los participantes recolectarán tres muestras fecales en casa, idealmente en tres días consecutivos, en los días +1, +2 y +3 en relación con el primer recordatorio dietético de 24 h.

Día de intervención: la dieta de todos los participantes seleccionados se restringirá durante los tres días anteriores al día de la prueba de provocación con carbohidratos para garantizar que se eviten todos los FODMAP con una dieta estandarizada proporcionada a los participantes durante los tres días anteriores a la prueba.

En la mañana del día de la prueba, se pedirá a los participantes que recolecten su primera muestra de prueba, la orina de la mañana y consuman 300 ml de agua en casa. A su llegada al laboratorio de pruebas, los participantes entregarán una muestra de orina adicional y muestras de aliento de referencia para el metaboloma del aliento y la prueba de hidrógeno en el aliento. Las muestras de orina se utilizarán para análisis metabolómicos y, en el caso de las participantes femeninas, para una prueba de embarazo. Se excluirán los participantes con una prueba de embarazo positiva.

Los participantes también completarán el cuestionario sobre LI (como se utiliza para la encuesta de detección) para describir los síntomas de LI antes de la prueba (síntomas iniciales).

Los 120 participantes serán asignados a uno de los dos desafíos de carbohidratos mediante aleatorización estratificada basada en los tres grupos definidos por las pruebas de preselección. Se asignarán 100 participantes a la intervención experimental (lactosa). Los 20 participantes restantes (4 participantes de cada grupo 1 y 2 y 12 participantes del grupo 3) serán asignados a la intervención de control (glucosa). Los participantes e investigadores estarán cegados durante las pruebas al tipo de solución de carbohidratos asignada.

Para cada participante, la solución de carbohidratos deberá consumirse en un lapso de tiempo de 5 min. Después de la ingesta de la solución, se pedirá a los participantes que se enjuaguen la boca con una cantidad estándar de agua (500 ml) para evitar la detección de moléculas residuales relevantes para la solución en la cavidad bucal. Los participantes tragarán una cápsula sensora de gases disponible comercialmente dentro de los 5 minutos posteriores a la ingesta de solución de lactosa o glucosa para controlar los gases intestinales y el tiempo de tránsito gastrointestinal.

Luego, se recolectarán muestras de aliento posprandial, condensado de aliento exhalado (EBC) y orina en momentos predefinidos durante las 6 h siguientes al consumo del producto de prueba asignado. El muestreo de aliento se realizará utilizando una fuente secundaria de ionización por electropulverización acoplada a un sistema de espectrometría de masas de alta resolución (SESI-HR-MS) para la detección directa y en tiempo real de compuestos orgánicos volátiles (COV) y utilizando un sensor de aliento de H2 (p. ej. Microlizador digital Quintron BreathTracker) para la detección de hidrógeno exhalado. Las muestras de EBC se recolectarán utilizando un filtro de espirometría conectado a una trampa fría de vidrio enfriada a -78 °C. Además, los participantes completarán el cuestionario de síntomas de LI para describir los síntomas durante la evaluación posprandial de 6 h.

Para normalizar la hidratación de los participantes, en particular para facilitar la recolección de orina, a los participantes se les ofrecerá una cantidad estandarizada de agua según su peso corporal para consumir en porciones regulares durante el período posterior a la ingestión. No se permitirán otros alimentos o líquidos durante las pruebas de laboratorio.

La excreción intestinal de la cápsula sensora de gases marcará el final de la intervención. Una visita de seguimiento para confirmar la excreción de la cápsula sensora de gas concluirá el estudio.

Se reclutarán sujetos adicionales si el número de participantes que completan las pruebas de lactosa y glucosa cae por debajo de las cifras previstas.