Efectos del consumo de probióticos en niños con trastorno del espectro autista (TEA)

El trastorno del espectro autista (TEA) es un grupo de anomalías del desarrollo neurológico que comienzan en la primera infancia y se caracterizan frecuentemente por problemas en la comunicación y el comportamiento social. Los metabolitos producidos por el microbioma intestinal pueden afectar las funciones del tracto gastrointestinal (Gl) y del sistema nervioso central (SNC) que respaldan la presencia del eje intestino-cerebro. Estudios anteriores han demostrado cambios en el microbioma intestinal en niños con TEA en comparación con controles neurotípicos. Es posible que las modificaciones dietéticas, incluido el uso de probióticos, en niños con TEA puedan modificar positivamente las funciones GI y SNC. Se han realizado pocos estudios clínicos para evaluar los efectos del consumo de probióticos por parte de niños con TEA sobre la composición de su microbiota, su función intestinal y su comportamiento en los países en desarrollo. En consecuencia, el objetivo general del estudio es determinar los efectos de la suplementación con probióticos en la composición de la microbiota intestinal, el estado nutricional y el estado inmunológico en niños con TEA.

Se realizará un estudio cruzado aleatorio que incluya a niños diagnosticados con TEA, que vivan en el Distrito Metropolitano de Quito. Luego de verificar los criterios de inclusión y exclusión, se seleccionarán 66 participantes. Inicialmente, los niños diagnosticados con TEA se organizarán aleatoriamente en 2 grupos. El grupo A (n = 33) recibirá suplementos de Sb en una dosis de 250 mg 3 veces al día durante un período de 4 meses. Mientras que el Grupo B (n=33) no recibirá suplementación durante 4 meses. A esto le seguirá un período de "lavado" de 30 días, tiempo durante el cual ninguno de los grupos consume probióticos. Pasado este tiempo, los grupos de niños cambiarán de tratamiento durante otros cuatro meses. Los investigadores analizarán el comportamiento, el microbioma intestinal, el metaboloma, el estado nutricional y los síntomas gastrointestinales para determinar los cambios provocados por el consumo de Sb. Se realizará un seguimiento de los participantes en los meses 1, 4, 5, 9 y 10 del estudio. En cada seguimiento se recogerán muestras de heces, sangre y orina para los diferentes análisis.

Se aplicará una encuesta sociodemográfica para determinar los parámetros epidemiológicos de los participantes. Los parámetros conductuales de cada niño serán evaluados mediante valoraciones psicológicas. Las pruebas que se aplicarán son: Calendario de Observación Diagnóstica de Autismo, Segunda Edición (ADOS- 2); Entrevista de diagnóstico de autismo revisada (ADI-R); Escala de Inteligencia Wechsler para Niños (WISC); Sistema de Evaluación de la Conducta Adaptativa (ABAS); Escala de Inteligencia de Preescolar y Primaria Wechsler (WPPSI); Inventario de Desarrollo de Battelle (BATELLE). Para la evaluación del estado nutricional se tomarán medidas antropométricas (peso, talla, IMC) y se calcularán percentiles y puntajes Z. Además, se aplicará un cuestionario de recordatorio de 24 horas. Se aplicará la prueba Roma IV para evaluar los síntomas gastrointestinales. Para determinar el estado inmunológico, los investigadores medirán las interleucinas y los factores de crecimiento en sangre.

En cuanto al análisis de la microbiota intestinal, los investigadores comenzarán con la extracción de ADN de muestras de heces. Todas las secuencias sin procesar obtenidas del secuenciador Illumina se analizarán para determinar: composición taxonómica, diversidad alfa y beta, anotación funcional y abundancia relativa microbiana diferencial entre los dos grupos. La anotación funcional se realizará utilizando el software Human Microbiome Project Unified Metabolic Analysis Network (HumanN). La asignación taxonómica se realizará utilizando el software de análisis filogenético metagenómico (Metaphlan). Las métricas de diversidad se calcularán utilizando el paquete Vegan Diversity R. Para comparar el análisis de diversidad alfa, se calculará el índice de Chao 1, Shannon y Simpson. Para la comparación de diversidad Beta, se utilizará la función Análisis de datos ecológicos (ade4) en el paquete R para generar análisis de componentes principales utilizando métricas de distancia de Bray-Curtis, Jaccard, Unifrac no ponderado y Unifrac ponderado. El análisis discriminante lineal se utilizará junto con la prueba de medición del efecto del tamaño de la muestra (LEfSe) para realizar análisis diferencial de abundancia relativa microbiana entre los dos grupos.

Los investigadores realizarán análisis de metabolomas en sangre, muestras fecales y orina. La asignación de metabolomas se realizará mediante experimentos 2D basados ​​en la señal en resonancia magnética nuclear de protones (H-NMR), utilizando la base de datos de metabolomas humanos y la base de datos de metabolomas de resonancia magnética biológica.