Positiaalinen kloonaustutkimus skitsofreniasta

1. Erityiset tavoitteet Tällä skitsofrenian paikannuskloonaustutkimuksen (POCOS) osaprojektilla on kaksi erityistä tavoitetta: (1) paikantaa ja tunnistaa fenomenologisen fenotyypin haavoittuvuusgeenit sekä skitsofrenian (SCH) endofenotyypit tietyillä kromosomialueilla; (2) Löytää skitsofrenian endofenotyyppeihin ja/tai fenomenologisiin fenotyyppeihin liittyvien ehdokasgeenien spesifinen polymorfismi. Nämä tulokset johtavat POCOS-tiimiin: (1) kehittämään uuden kliinisen diagnostisen menetelmän ja uuden ehkäisyohjelman, mukaan lukien farmakologiset aineet SCH:n varhaisessa interventiossa kansanterveystarkoituksiin; (2) tehdä funktionaalinen genomitutkimus SCH:lla; (3) tutkia epänormaalien geenien patogeneettistä prosessia SCH:n epänormaaleissa neuropsykologisissa ja neurobiologisissa toiminnoissa; (4) hahmotella geeni-ympäristövuorovaikutuksen luonne ja vaikutus SCH:n etiologiassa.

   Tähän mennessä kaikki genomin laajuiset haavoittuvuusgeenien paikallistamista koskevat skannaukset eivät paljastaneet johdonmukaisia ​​tuloksia. Skitsofrenian molekyyligeneettisen tutkimuksen vaikeus ei ole molekyyligeneettisen tutkimuksen tekniikka; Se on riittävien näytteiden kliinisen rekrytoinnin vaikeus. Pieni otoskoko, diagnostinen epävarmuus ja tutkimusnäytteiden useat etniset ryhmät olivat tärkeimpiä syitä tähän nykyiseen hedelmättömään tilaan. Tämä POCOS on suunniteltu huomattavan vahvoilla näyteominaisuuksilla: (1) Käyttämällä riittävän suurta näytekokoa noin 700 perheen DNA-näytteellä, joissa on vähintään kaksi skitsofreenistä sisarusta. Tämä perhenäyte takaa riittävän tehon kytkentäanalyysiin ja paikannuskloonausstrategiaan. (2) Standardisoidun diagnostisen arviointimenetelmän käyttäminen diagnoosin arvioinnissa, mukaan lukien geneettisen tutkimuksen diagnostinen haastattelu (DIGS) ja Medical Chart Records, (3) heikentyneen tarkkaavaisuuden tietojen käyttäminen ja toimeenpanotoiminto SCH:n endofenotyypin määrittämiseksi 300 perheessä, joissa on vähintään kaksi skitsofreniaa sairastavaa sisarusta. Nämä olosuhteet tekevät tämän POCOSin suunnittelusta läpimurron nykyisessä SCH:n molekyyligeneettisessä tutkimuksessa.

   Testattavat hypoteesit ovat: (1) Fenomenologisesta skitsofreniasta on vastuussa 3–5 haavoittuvuusgeeniä, jotka määritellään DSM-IV-kriteereillä ja jotka sijaitsevat kromosomissa 1q42, 6p22, 8p14, 15q14, D22q12 lähellä markkereita DIS8S621, D6S251, D6S251, D27251. , D22S278, vastaavasti; (2) Yksi haavoittuvuusgeeni on vastuussa skitsofrenian endofenotyypistä, joka määritellään jatkuvalla suorituskykytestillä (CPT) arvioituna heikentyneenä jatkuvana tarkkaavaisuutena. Tämä vastuullinen haavoittuvuusgeeni saattaa sijaita kromosomissa 15q14 lähellä D15S976:ta; (3) Skitsofrenian eri fenomenologisilla alatyypeillä, mukaan lukien negatiivinen alatyyppi ja ei-negatiivinen alatyyppi, voi olla erilaiset lod-pisteet kytkentäanalyysissä tässä tutkimuksessa ehdotettujen spesifisten geneettisten markkerien kanssa; (4) Ehdokasgeenien introneissa ja/tai eksoneissa on mutaatioita ja/tai polymorfismeja, jotka liittyvät SCH:n esiintymiseen ja/tai spesifisiin alatyyppeihin.

2. Tausta ja merkitys. Skitsofrenia (SCH) on yhtä tuhoisa ja leimautunut psykiatrinen häiriö, jolla on aivopatologia ja korkea geneettinen kuormitus. Potilaat ovat yleensä riippuvaisia ​​perheestä ja aiheuttavat suuria sosiaalisia kustannuksia. Haavoittuvuusgeenien paikantaminen ja tunnistaminen, sosiaalisen leiman ratkaiseminen, geneettisen neuvonnan suunnittelu voi tuoda vallankumouksellisen kehityksen psykiatriaan.

Tämä skitsofreniaa koskeva genominen tutkimus (GEMS) koostuu kahdesta toisiaan täydentävästä komponenttiprojektista, joissa tehdään SCH:n (POCOS) sijaintikloonaustutkimus ja psykologinen ja geneettinen neuvontatutkimus (POGES) samassa tutkimukseen värvättyjen perheiden ryhmässä. Tämä komponenttiprojekti (NO.1), POCOS on suunniteltu käyttämällä läpimurtolähestymistapaa haavoittuvuusgeenien paikallistamiseen ja tunnistamiseen. POGES-projekti (NO.2) on ihmiskuntatutkimus, joka täydentää molekyyligeneettistä tutkimusta, ja se on suunniteltu tutkimaan psykologisia kysymyksiä, jotka liittyvät tämän tuhoisan ihmisen sairauden leimaamiseen ja geneettiseen neuvontaan.

1. Skitsofrenian geneettinen perusta Geneettiset epidemiologiset tutkimukset paljastivat, että SCH on perheellinen ja riski ensimmäisen asteen sukulaisille on noin kymmenen kertaa suurempi kuin kontrollien omaisille (Tsuang et al., 1980, 1995; Guze et ai., 1983; Kendler 1988) . Monotsygoottisten kaksoisparien yhteensopivuusaste oli 46 % - 53 % ja 14 % - 15 % ditsygoottisten kaksoisparien kohdalla (Kendler KS 1983; Gottesman II 1993; Prescott ja Gottesman II, 1993). Periytyvyys oli noin 0,7. MZ-kaksosten yhteensopivuusaste on kuitenkin kaukana 100 %:sta, myös ympäristötekijät tulee ottaa huomioon. Todisteita geneettisestä vaikutuksesta SCH:n etiologiaan tuki edelleen adoptiotutkimus (Heston 1966; Kety et ai., 1968, 1994; Kendler et ai., 1994).

   Segregaatioanalyysit osoittavat, että useiden geenien malli sopii paremmin perhetutkimuksissa havaittuihin skitsofrenian malleihin kuin yksittäisen suuren lokusmallin malli (Faraone ja Tsuang, 1985; Risch ja Baron, 1984; Vogler et ai., 1990). Esitettiin, että useat epistaasissa olevat geenit (lukumäärä 3-5) saattavat olla vastuussa skitsofrenian geneettisestä etiologiasta (Risch, 1990).

2. Skitsofrenian molekyyligeneettiset tutkimukset Kytkentäanalyysiä varten sukupuolikromosomeja lukuun ottamatta (Delisi ja Crow, 1989) ei ole olemassa a priori hypoteesia keskittyä mihinkään tiettyyn kromosomialueeseen. Koko genomi on seulottava systeemisesti. Muutamat SCH:n genominlaajuiset skannaukset vuosikymmenen ajalta havaitsivat, että monilla kromosomialueilla oli viitteitä yhteyksistä, mukaan lukien kromosomi 1q21-q22, 1q31-q42, 2p22-q21, 4q24-q32, 6p24-p22, 6q16-q24. p21, 10p14-p13, 13q14-q32, 15q13-q14, 22q11-q13 (Coon et ai., 1994; Shaw et ai., 1998; Levinson ym. 1998; Blouin et ai., 1998; 1 Kau98 et al. Faraone et ai., 1998; Rees et ai., 1999; Williams et ai., 1999; Hovatta et ai., 1999; Brzustowicz et ai., 2000). Kuitenkin vain muutamilla kromosomialueilla on koskaan raportoitu olevan genominlaajuisia merkittäviä kytkentätodisteita, mukaan lukien kromosomi 1q21-q22 (Brzustowicz et al., 2000), 6p24-p22 (Wang et al., 1995), 8p21 (Blouin et al. ai., 1998) ja 13q32 (Blouin et ai., 1998).

   Toinen lupaava kromosomialue on kromosomi 1q 42. Tasapainon translokaatio (1; 11) (q42.1; q14.3) liittyi vakavaan mielenterveysongelmiin, mukaan lukien skitsofrenia Skotlannin suurperheen sukutaulussa (St Clair et ai., 1990). Kaksi uutta geeniä, nimeltään DISC1 (Disrupted in Schizophrenia 1) ja DISC2 (Disrupted in Skitsofrenia 2) kromosomissa 1q42.1, katkesivat katkeamispisteessä (Millar et ai., 2000; 2001). Tämä vahvistettiin suomalaisessa perhenäytteessä (Hovatta et al., 1999) ja toisessa tutkimuksessa (Ekelund ym., 2001; Hwu et al., 2001).

   Kaikki nämä tutkimukset ovat osoittaneet replikaatio- ja ei-replikaatiomallin (Riley 2000). Vähävaikutteisten geenien havaitsemiseksi monimutkaisissa sairauksissa riittämätön otoskoko ja sekalainen etnisyys olivat suuria metodologisia ongelmia. Väitetään, että vähintään 600 sataa sairastunutta sisarparia voidaan tarvita riittävän tehon saamiseksi (Hauser et ai., 1996).

   Ehdokasgeenitutkimukset paljastivat epäjohdonmukaisia ​​tuloksia viimeisen vuosikymmenen aikana. Välittäjäaineisiin liittyviä geenejä, kuten dopamiini- (D1, D2, D3, D4, D5), serotoniini-, r-aminovoihappo- ja glutamaattireseptorigeenejä, oli tutkittu käyttämällä sekä assosiaatio- että kytkentätutkimuksia, eikä johdonmukaisia ​​tuloksia saatu (Asherson et al., 1995). , Breyler et ai., 1995; Hranilovic et ai., 2000; Catalano et ai., 1993, Serretti et ai., 1999; Chen ACH, 1996, 1997). Neuronien kasvuun liittyvien geenien (Margolis et ai., 1994), fosfolipaasigeenien (Peet, 1998, Wei 1998) ja kaliumkanavageenin (hKCa3/KCNN3) (Dror et ai., 1999) on raportoitu liittyvän skitsofreniaan. Tapauskontrollisuunnittelussa monet arvioitavat geenit ja fenotyypit sekä näytteen etnisen alkuperän sekoitukset voivat lisätä tyypin I virheitä.

   Positiivinen ehdokasgeenin lähestymistapa, jossa käytetään sidoshäiriötasapainostrategiaa, voi ratkaista edellä mainitut kaksi ongelmaa, jotka on nostettu esiin ehdokasgeeniassosiaatiotutkimuksen lähestymistavasta, joka perustuu aikaisempaan kytkentätulokseen aiemman todennäköisyyden lisäämiseksi ja vanhempien ja jälkeläisten trioiden sisäisenä kontrollina. Tämä lähestymistapa on tehokkaampi kuin linkitystutkimus monimutkaisen häiriön, kuten skitsofrenian, herkkyysgeenien paikallistamiseksi (Risch ja Merikangas, 1996). Tämä lähestymistapa on tehokkaampi skitsofrenian herkkyysgeenien paikantamisessa, koska on olemassa hienoja kartoituslinkkejä, koko genomisekvenssi ja yhden nukleotidin polymorfismi (SNP) kartta sekä edistyvä mikrosirutekniikka (Owen et al., 2000; Baron 2001). ). Äskettäin tutkimuksessa, jossa käytettiin yllä olevaa strategiaa, on raportoitu merkittävän skitsofrenian kytkentähäiriön todisteeksi mikrosatelliitin polymorfismiin ja geenin SNP:hen, NOTCH4-geeniin, kromosomissa 6p21 (Wei ja Hemmings, 2000).

   Ottaen huomioon riittävän tehon tärkeyden kytkentäanalyysille ja potentiaalisten kandidaattigeenien lähestymistavan kytkentähäiriöstrategioita käyttäen, ehdotamme tätä projektia skitsofrenian haavoittuvuusgeenien sijainnin kloonaamiseksi. Tässä vaiheessa olemme keränneet DNA-näytteen noin 700 perheestä, joissa on vähintään kaksi skitsofreenistä sisarusta, sekä omalla toiminnallamme että yhteistyössä Harvardin yliopiston kanssa näiden neljän vuoden aikana, ja tämä perhenäyte takaa riittävän voiman sidosanalyysiin ja muihin paikannustutkimuksiin. kloonausstrategia.

3. Skitsofrenian neuropsykologinen vajaus SCH:lla oli mielellään toiminnan, jatkuvan huomion ja työmuistin neuropsykologisten toimintojen heikkeneminen (Goldberg ja Gold, 1995) ja se johtui frontostriataalisesta toimintahäiriöstä (Elliot et ai., 1995). Usein heikkeneminen voidaan parhaiten osoittaa testiakuilla, eikä yksittäisellä, erillisellä testillä (Kremen et al., 1994), ja heikkeneminen viittasi vahvasti frontaali-temporaali-limbisen piirin toimintahäiriöön (Gold ja Harvey, 1993).

   Visuaalista jatkuvaa huomiota jatkuvan suorituskyvyn testin (CPT) avulla ja toimeenpanotoimintoa Wisconsin Card Sorting Testin (WCST) avulla tutkittiin perusteellisemmin. Vaikeimmat niistä ovat vakaita haavoittuvuusindikaattoreita, kun taas yksinkertaisemmat saattavat olla välittäviä haavoittuvuusindikaattoreita skitsofreniassa (Chen ja Faraone, 2000). CPT-vaje liittyi negatiivisiin oireisiin (Nuechterlein et ai., 1986; Hain et ai., 1993; Johnstone ja Frith, 1996; Liu et ai., 1997) ja ajatteluhäiriöön (Nuechterlein et al., 1986; Strauss et al. ., 1993; Nelson et ai., 1998) tai epäjärjestyneitä oireita (Liu et ai., 1997).

   WCST-suorituskyvyn puutteet olivat kestäviä ja ennustettuja pitkäaikaiseksi vammaiseksi, riippumatta muista kognitiivisista puutteista (Weinberger et ai., 1986; Goldberg et ai., 1988). WCST-puutteiden havaittiin liittyvän dorsolateraaliseen prefrontaaliseen aivokuoreen (Weinberger et ai., 1986; Berman et ai., 1995) ja että dopamimeettiset lääkkeet parantavat sen suorituskykyä (Daniel et ai., 1991; Mattay et ai., 1996).

   Nämä puutteet, joiden havaitaan olevan spesifisiä SCH:lle ja sisältävät SCH:n geneettisen riskin, voivat siten toimia endofenotyyppeinä SCH:n geneettisessä analyysissä.

4. Endofenotyyppilähestymistapa skitsofrenian molekyyligeneettisissä tutkimuksissa SCH:n analyysien riittämättömyyden ja geneettisen heterogeenisyyden ratkaisemiseksi vaihtoehtoisena strategiana oli käyttää sairauden erityistä neurobiologista ominaisuutta endofenotyyppinä, joka heijastaa yhden geneettisen muutoksen vaikutusta (Lander, 1988). ).

CPT-vaje oli mahdollinen endofenotyyppi geneettisestä herkkyydestä SCH:lle (Chen ja Faraone, 2000). Sitä ei esiintynyt vain SCH-potilailla, vaan myös heidän ei-psykoottisilla sukulaisilla (Grove et ai., 1991; Mirsky et ai., 1995; Chen et ai., 1998). Chen et al. käyttää 148 ei-psykoottisen sukulaisen ja 345 yhteisön aikuisen tietoja. (1998) havaitsivat, että uusiutumisriskisuhde λ oli suurempi kuin 15 huonontumattomalle CPT:lle ja suurempi kuin 30 huonontuneelle CPT:lle.

Siten CPT-vajeiden käyttäminen SCH:n endofenotyyppeinä antaisi arvokkaan geneettisen riskin mittauksen, parantaisi geneettisten analyysien tehoa ja voisi auttaa tunnistamaan skitsofrenialle alttiusgeenejä. Otoksessamme noin 220 perhettä on saanut CPT- ja WCST-arvioinnin. Aiomme lisätä 80 perhettä, joilla on CPT- ja WCST-tiedot, ja muodostaa 300 perhettä, joilla on saatavilla dataa endofenotyyppitutkimukseen. Näitä endofenotyyppejä on mahdollista käyttää geneettiseen jatkoanalyysiin.

Tämä endofenotyyppistrategia on viime aikoina onnistunut kartoittamaan skitsofrenian neurofysiologista puutetta, P50:n eston vähenemistä lokuksiin kromosomissa 15q13-14. Genominlaajuinen kytkentäanalyysi P50-inhibitiovajeesta yhdeksässä multipleksissä SCH-perheessä havaitsi merkitsevän lod-pisteen (Z = 5,30,  = 0) lokuksen kromosomissa 15q14. Kun SCH:n kliinistä diagnoosia käytettiin sairastuneena fenotyyppinä, maksimaalinen lod-pistemäärä samalla markkerilla ei ollut tilastollisesti merkitsevä (Freedman et ai., 1997). Toinen skitsofrenian neurobiologinen puute, silmänseurantahäiriö, on kartoitettu kromosomiin 6p23-21, jonka enimmäispistemäärä on 4,02. Jälleen, vaikka skitsofrenian kliinistä diagnoosia käytettiin sairastuneena fenotyyppinä, kytkentätulos ei ollut merkitsevä (Arolt et ai., 1996). Yhteenvetona voidaan todeta, että endofenotyyppisen lähestymistavan avulla, jossa käytetään jatkuvaa tarkkaavaisuusvajetta ja näytteemme tarjoamaa riittävää tehoa, meillä on luottamusta SCH:n haavoittuvuusgeenien etsimisen läpimurtoon.

Alustavat tutkimukset.

1. Skitsofreniaa sairastavien Sibpairs-perheen kokoelma P.I. on sitoutunut keräämään skitsofreniaa sairastavien sisarusparien perhettä vuodesta 1990 lähtien. Tietäen diagnostisen arvioinnin tärkeyden ja kriittisen välttämättömyyden, näitä koettimia, sairastuneita sisaruksia ja saatavilla olevia ei-sairaita sisaruksia sekä vanhempia arvioitiin puolistrukturoidulla psykiatrin diagnostisella haastattelulla (Hwu 1991a) käyttämällä DSM:n diagnostisia kriteerejä. -III-R ja/tai DSM-IV. Lisäksi psykopatologian evoluutioteoreettisen mallin (Hwu 1985, 1992) mukaisesti kerättiin myös kehitystietoa. Kaikki nämä kliiniset tiedot ja sukupuutiedot luotiin molekyyligeneettisen laboratorion (DBMGL) tietopankissa Taiwanin kansallisen yliopiston lääketieteellisen korkeakoulun psykiatrian laitoksessa P.I.:n suojeluksessa. Yhteensä noin 120 skitsofreniaa sairastavaa sisarusparia on käytettävissä kytkentäanalyysiin DBMGL:ssä. DNA-näytteet otettiin pääsääntöisesti kaikkien saatavilla olevien perheen koehenkilöiden perifeerisistä valkosoluista, erityisesti yhteistautia sairastavilta sisaruksilta, vähintään yhdeltä ei-sairaalta sisarukselta ja vanhemmilta. Yhteensä noin 1000 DNA-näytettä oli DBMGL:ssä. Myös EBV-958-transformoitujen lymfoblastisolujen solulinjat perustettiin. Kaikki nämä tutkimushenkilöt olivat hyvin perillä tästä tutkimuksesta ja he saivat tietoisen suostumuksen. Kaikki tähän tutkimukseen osallistuneet perheet kutsuttiin liittymään "New-Hope Family Clubiin" säännöllistä tapaamista ja keskustelua varten. Noin 150 skitsofreniatapausta, jotka saivat yksityiskohtaisen kliinisen arvioinnin ja säännöllisen seurannan ja kattavan neuropsykologisen arvioinnin, mukaan lukien CPT, WCST, WAIS-R ja WMS, rekrytoitiin DNA-näytteiden saamiseksi. Noin 200 normaalia kontrollihenkilöä rekrytoitiin myös DNA-näytteiden ottamiseksi.

4-vuotinen valtakunnallinen yhteistyö Harvardin yliopiston kanssa Taiwanissa (Taiwan Skitsofrenia Linkage Study, TSLS), jota sponsoroi NIMH, U.S.A., kerätäkseen perheitä, joilla on skitsofreniaa sairastavia sisarpareja. 560 perhettä on värvätty. Tänä vuonna rekrytoidaan yhteensä 600 perhettä. DNA-näytteet, solulinjat ja DIGS:n, FIGS:n kliiniset tiedot kerättiin. Noin 220 perhettä sai neuropsykologisen arvioinnin. (CPT ja WCST).

1. Skitsofrenian molekyyligeneettiset tutkimukset Skitsofrenian molekyyligeneettisiä tutkimuksiamme tukivat kolme peräkkäistä projektia: Kansallisen tiedeneuvoston rahoittama molekyyligeneettinen projekti (1989-1992), MPGRP:n molekyyligeneettinen projekti (1993-1998) ja molekyyligeneettinen projekti. NHRI:n sponsoroima MPSS (1998-2001). Tämän molekyyligeneettisen projektin alkuvaiheessa (1989-1992) keskityttiin laboratoriotilojen perustamiseen ja yhteisvaikutuksiin sairastuneiden skitsofreenisten sisarparien keräämiseen. Tämän molekyyligeneettisen projektin 2. vaihe (1993-1998) jatkoi perheiden keräämistä, ja kokoelmaa laajennettiin keräämään yhteisvaikutteisia kaksisuuntaisia ​​sisaruspareja, skitsofreniatapauksia ja normaaleja kontrolleja. Havaitsimme (CAG)n:n androgeenireseptorigeenin polymorfialla olevan todennäköinen yhteys skitsofreniaan (Hwu et ai., 1995). Tämä havainto tuki DeLisi et al (1994) havaintoa. Molekyyligeneettisiä kytkentäanalyysin ja ehdokasgeeniassosiaatiomenetelmiä edistettiin, tämä P.I.:n laboratorio. (DR. Hwu) siirtyi korostamaan myös tällä alueella. Tämän laboratorion tulokset olivat: (1) DRD4-reseptorigeenin (48 bp) toistojen polymorfismi ei liittynyt merkitsevästi skitsofreniaan (Hong et ai., 1998); (2) Yhden mutaation DRD2:ssa ei havaittu liittyneen skitsofreniaan (Chen et al., 1996) (3) Tämän projektin tietopankin näytteet olivat liittyneet kolmeen kansainväliseen paikannuskloonausmenetelmää käyttävään yhteistyötutkimukseen, jotka vaativat suhteellisen suuren näyte. Ensimmäisen ovat järjestäneet Gill et al (1996), jonka otsikkona on "Schizophrenia Collaborative Linkage Group", toista johti tohtori Moises (1995) Kielin yliopistossa, Saksassa ja kolmannen tohtori Powellin kanssa Lontoossa (Lin et al. ., 1995). Kaikki nämä tulokset paljastivat mahdolliset markkerit kromosomeissa 6p, 11q, 13q, 19q ja 22q. Tämä viittaa siihen, että taiwanilaisilla potilailla saattaa olla mahdollisia herkkyysgeenejä näillä alueilla kromosomi 13q lukuun ottamatta (Lin et ai., 1995), jotka sopivat oligogeneettiseen malliin. (4) Kromosomissa 13q sijaitsevan 5-HT2-reseptorigeenin assosiaatiotutkimuksen havaittiin olevan negatiivinen; (5) Kliininen epidemiologinen analyysi, jossa käytettiin samanaikaisesti sairastuneita sisarpareja, osoitti kolmen riippumattoman oireyhtymän taipumuksen: todellisuuden hajaantuminen, epäjärjestyminen ja negatiivinen tila (Hwu et al., 1997); (6) Heikko sidos todisteita lokuksiin kromosomissa 6p24-22 (Hwu et ai., 2000).

   Molekyyligeneettisen tutkimuksen 3. vaihe (1998-2001) keskittyi edelleen yhteisvaikutusten saaneiden skitsofreenisten sisarparien keräämiseen ja linkitysanalyysiin raportoituihin viittaaviin todisteisiin kromosomialueista, mukaan lukien kromosomit 1q21-q22, 1q31-q42, 8p24. p21, 15q13-q14, 22q11-q14. Kytkentätulokset olivat (1) viittaavia todisteita skitsofrenian yhteydestä kromosomien 6p24 ja 22q12 negatiivisten oireiden kanssa ja ilman niitä (Lin et al., 1999a) (2) ei näyttöä GABAA-reseptorin α1 (GABRA1), β1 (GABRB1) kytkemisestä andβ3 (GABAB3) -alayksikkögeeni skitsofrenian kanssa (Lin et ai., 1999b) (3) ei näyttöä glutamaatti GluR5- ja GluR6-reseptorigeenin yhteydestä skitsofreniaan (Lin et al., 1999c) (4) ei näyttöä SCA1-geenistä skitsofreniasta (Liu et al., 2001a) (5) viittaavat yhteydet skitsofreniaa sairastavan 8p kromosomin markkeriin (D8s1222) (NPL Z -piste = 2,58, p = 0,005) (Hwu et al., 2001a) (6) viittaavia yhteyksiä kromosomin 1q31-42 markkeri (D1s251), jolla on skitsofrenia (NPL Z -piste = 2,18, p = 0,01) (Hwu et ai., 2001b), Markkeri sijaitsee lähellä DISC1-kandidaattigeeniä. (7) viittaavat sidokset merkkiaineeseen (D15s976) 15q13-14 skitsofreniaan (NPL Z -pisteet = 3,33, p = 0,0003) (Liu et ai., 2001b). (8) ei ole näyttöä skitsofrenian yhteyksistä kromosomin 1q21-22 lokuksiin (Liu et ai., 2001c). (9) Viittaava kytkentä NOTCH4-geenilokukseen kromosomissa 6p21.3 (NPL Z -pisteet = 2,79, p = 0,002) (Hwu et ai. 2001c). Ehdokasgeenilähestymistapa on paljastanut seuraavat tulokset: (1) mahdollinen yhteys dopamiini D4 -reseptorin (DRD4) geenipolymorfismin ja nopean skitsofrenian hoitovasteen välillä (Liu et al., 2001d). (2) ei yhteyttä sytosolisen fosfolipaasi A2 (c-PLA2) -geenin polymorfismin ja skitsofrenian välillä (Liu et ai., 2000).

2. Skitsofrenian neuropsykologisia puutteita koskevat tutkimukset Havaitsimme jatkuvan suorituskyvyn testin (CPT) skitsofrenian ominaisuusmerkkinä heikentyneen jatkuvan tarkkaavaisuuden. Perhetutkimukset ovat osoittaneet, että jatkuva tarkkaavaisuus CPT:n mittaamana ovat skitsofrenian haavoittuvuusmarkkereita (Chen ja Faraone, 2000). Tulokset ovat: (1) huomattavalla osalla skitsofreniapotilaiden ei-psykoottisista sukulaisista (19-34 %) on CPT-vajauksia, jotka voidaan ennustaa heidän koettimiensa CPT-suorituskyvyn perusteella (Chen et al., 1998a); (2) henkilöillä, joilla on skitsotyyppisiä persoonallisuuden piirteitä, on myös CPT-vajeita, jotka liittyvät erityisesti skitsotyyppisen negatiivisiin tekijöihin. (Chen et ai., 1998b); (3) Skitsofreniapotilailla esiintyy CPT-puutteita, ja ne liittyvät erityisesti negatiivisiin ja epäjärjestyneisiin oireisiin, ja ne, joilla on vaikeampi CPT-versio, eivät sovellu neuroleptiseen hoitoon (Liu et al., 2000).

   CPT:n spesifisyyttä tutkittiin (Liu et al., 2000) skitsofreniapotilaiden ryhmässä (n=41) toisin kuin kaksisuuntaisen mielialahäiriön potilaiden ryhmässä, joilla oli psykoottisia oireita (n=46) ja ryhmässä kaksisuuntaisia ​​mielialapotilaita, joilla ei ollut psykoottisia oireita. (n=22) ja ryhmä potilaita, joilla on ei-psykoottinen vakava masennushäiriö (n=22). Havaittiin, että CPT-vajeet ovat vakaita haavoittuvia indikaattoreita skitsofreniasta, välittävät kaksisuuntaisen mielialahäiriön haavoittuvuusindikaattoreita ja tilasta riippuvaisia ​​vakavan masennuksen indikaattoreita. Nämä tulokset osoittavat, että CPT-vajeet ovat päteviä skitsofrenian piirteitä.

3. Skitsofrenian kliinisen heterogeenisyyden tutkimukset Psykiatrian alalla kliininen psykopatologinen tausta on ratkaisevan tärkeä molekyyligeneettisissä tutkimuksissa. Päätutkija (HGH) oli kehittänyt evoluution psykopatologisen teoreettisen mallin kuvaavia ja neurobiologisia tutkimuksia varten. Skitsofreniaa koskevan kuvailevan psykopatologisen tutkimuksen täydellinen työ julkaistiin [Schizophrenia: a desscriptive psychopathology, 1999 ISBN 957-9201-21-8, Taipei, Chu-ching Publishing Company]. Kliinistä heterogeenisyyttä on lähestytty uudella tilastollisella menetelmällä, jossa käytetään PANSS-luokitusasteikkoon perustuvaa graafista piirtotekniikkaa (Chen, 1999). Kaksi (Hwu et al, 2001) tai kolme (Hwu et al, 2001) skitsofrenian alatyyppiä rajattiin ja validoitiin seuranta- ja neuropsykologisilla tiedoilla, kuten huomiokyvyn heikkenemisellä (CPT). Kahden vuoden seurannan aikana skitsofreenisten potilaiden oireet olivat vakaat (Hwu et al, 2001). Tämä vahvistaa skitsofrenian alatyypitysyritykset käyttämällä fenomenologisia oirekuvioita. Nämä tiedot viittaavat skitsofrenian geneettisen kytkentätutkimuksen mahdolliseen hedelmällisyyteen ottaen huomioon fenomenologiset alatyypit sekä endofenotyypit kytkennöissä sekä assosiaatiotutkimuksissa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että kaikki nämä alustavat tiedot osoittavat, että DNA-näyte, kliiniset tiedot ja endofenotyyppitiedot on valmistettu hyvin tässä POCOS-ohjelmassa. PI:llä ja hänen tiimillään on kokemusta tämän projektin laboratoriotyön ja geneettisen jatkoanalyysin suorittamisesta.