Um estudo de clonagem posicional na esquizofrenia

1. Objetivos Específicos Este projeto componente de estudo de clonagem posicional da esquizofrenia (POCOS) tem dois objetivos específicos: (1) Localizar e identificar os genes de vulnerabilidade do fenótipo fenomenológico, bem como os endofenótipos da esquizofrenia (SCH) em regiões cromossômicas específicas; (2) Encontrar polimorfismo específico de genes candidatos associados a endofenótipos e/ou fenótipos fenomenológicos da esquizofrenia. Esses resultados levarão a equipe do POCOS a: (1) desenvolver um novo método de diagnóstico clínico e um novo programa de prevenção, incluindo agentes farmacológicos no tratamento de intervenção precoce do HSC para fins de saúde pública; (2) realizar estudo genômico funcional do HSC; (3) estudar o processo patogenético de genes anormais nas funções neuropsicológicas e neurobiológicas anormais do HSC; (4) delinear a natureza e o efeito da interação gene-ambiente na etiologia do HSC.

   Até o momento, todas as varreduras do genoma para localização de genes de vulnerabilidade não revelaram resultados consistentes. A dificuldade do estudo da genética molecular na esquizofrenia não é a tecnologia do estudo da genética molecular; É a dificuldade no recrutamento clínico de amostras adequadas. O pequeno tamanho da amostra, a incerteza diagnóstica e as múltiplas etnias das amostras do estudo foram as principais razões para esta condição atual infrutífera. Este POCOS é projetado com uma força notável de características de amostra: (1) Usando tamanho de amostra suficientemente grande com amostra de DNA de cerca de 700 famílias com pelo menos dois irmãos esquizofrênicos. Esta amostra familiar garante poder adequado para análise de ligação e estratégia de clonagem posicional adicional, (2) Usando o método de avaliação de diagnóstico padronizado para avaliação de diagnóstico, incluindo a entrevista diagnóstica para estudo genético (DIGS) e registros de prontuários médicos, (3) usando dados de atenção prejudicada e função executiva para definir endofenótipo de SCH em 300 famílias com pelo menos dois irmãos afetados com esquizofrenia. Essas condições tornam o projeto deste POCOS um avanço no estudo genético molecular atual do SCH atualmente.

   As hipóteses a serem testadas são: (1) Existem de 3 a 5 genes de vulnerabilidade responsáveis ​​pela esquizofrenia fenomenológica, definidos pelos critérios do DSM-IV, localizados nos cromossomos 1q42, 6p22, 8p14, 15q14, 22q12 próximos aos marcadores DIS251, D6S296, D8S1222, D15S976 , D22S278, respectivamente; (2) Um gene de vulnerabilidade é responsável pelo endofenótipo da esquizofrenia, definido por atenção sustentada prejudicada avaliada pelo teste de desempenho contínuo (CPT); Este gene de vulnerabilidade responsável pode estar localizado no cromossomo 15q14 próximo a D15S976; (3) Diferentes subtipos fenomenológicos de esquizofrenia, incluindo o subtipo negativo e o subtipo não negativo, podem ter diferentes escores de lod na análise de ligação com marcadores genéticos específicos propostos neste estudo; (4) Existem mutações e/ou polimorfismos nos íntrons e/ou éxons dos genes candidatos associados à ocorrência e/ou subtipos específicos de HSC.

2. Antecedentes e Significado. A esquizofrenia (SCH) é um transtorno psiquiátrico devastador e estigmatizado com patologia cerebral e alta carga genética. Os pacientes geralmente tornam-se dependentes da família com grande custo social. Localizar e identificar os genes de vulnerabilidade, resolver o estigma social, planejar o aconselhamento genético pode trazer um desenvolvimento revolucionário na psiquiatria.

Este estudo genômico sobre esquizofrenia (GEMS) compreende dois projetos de componentes complementares para fazer o estudo de clonagem posicional no SCH (POCOS) e fazer o estudo de aconselhamento psicológico e genético (POGES) no mesmo grupo de famílias recrutadas para o estudo. Este projeto de componente (NO.1), o POCOS é projetado usando uma abordagem inovadora para localizar e identificar genes de vulnerabilidade. O projeto POGES (NO.2) é um estudo da humanidade complementar ao estudo da genética molecular e visa explorar questões psicológicas relacionadas com o estigma e aconselhamento genético desta doença devastadora do Ser Humano.

1. Base genética da esquizofrenia Estudos epidemiológicos genéticos revelaram que o SCH é familiar e o risco para parentes de primeiro grau é aproximadamente dez vezes o risco para parentes de controles (Tsuang et al., 1980, 1995; Guze et al., 1983; Kendler 1988) . Pares de gêmeos monozigóticos tiveram taxas de concordância de 46%~53% e 14%~15% para pares de gêmeos dizigóticos (Kendler KS 1983; Gottesman II 1993; Prescott e Gottesman II, 1993). A herdabilidade foi em torno de 0,7. No entanto, a taxa de concordância em gêmeos MZ está longe de 100%, os fatores ambientais também devem ser considerados. A evidência da contribuição genética para a etiologia do SCH foi ainda apoiada pelo estudo de adoção (Heston 1966; Kety et al., 1968,1994; Kendler et al., 1994).

   As análises de segregação indicam que o modelo de genes múltiplos se ajusta melhor aos padrões observados de esquizofrenia em estudos familiares do que o modelo de locus principal único (Faraone e Tsuang, 1985; Risch e Baron, 1984; Vogler et al., 1990). Foi sugerido que vários genes (3 a 5 em número) na epistasia podem ser responsáveis ​​pela etiologia genética da esquizofrenia (Risch, 1990).

2. Estudos genéticos moleculares da esquizofrenia Para análise de ligação, exceto os cromossomos sexuais (Delisi e Crow, 1989), não há hipótese a priori para focar em qualquer região cromossômica dada. Todo o genoma precisa ser rastreado sistemicamente. Algumas varreduras de SCH em todo o genoma durante a década descobriram que muitas regiões cromossômicas tinham evidências sugestivas de ligação, incluindo os cromossomos 1q21-q22, 1q31-q42, 2p22-q21, 4q24-q32, 6p24-p22, 6q16-q23, 8p24- p21, 10p14-p13, 13q14-q32, 15q13-q14, 22q11-q13 (Coon et al., 1994; Shaw et al., 1998; Levinson et al.1998; Blouin et al., 1998; Kaufmann et al.1998 ; Faraone et al., 1998; Rees et al., 1999; Williams et al., 1999; Hovatta et al., 1999; Brzustowicz et al., 2000). No entanto, apenas algumas regiões cromossômicas foram relatadas como tendo evidências de ligação significativas em todo o genoma, incluindo o cromossomo 1q21-q22 (Brzustowicz et al., 2000), 6p24-p22 (Wang et al., 1995), 8p21 (Blouin et al., 2000). al., 1998) e 13q32 (Blouin et al., 1998).

   Outra região cromossômica promissora é o cromossomo 1q 42. Uma translocação de equilíbrio (1; 11)(q42.1; q14.3) foi associado a doença mental grave, incluindo esquizofrenia, em uma linhagem de grande família escocesa (St Clair et al., 1990). Dois novos genes denominados DISC1 (Interrompido na Esquizofrenia 1) e DISC2 (Interrompido na Esquizofrenia 2) no cromossomo 1q42.1 foram interrompidos no ponto de interrupção (Millar et al., 2000; 2001). Isso foi confirmado em uma amostra familiar finlandesa (Hovatta et al., 1999) e em outro estudo (Ekelund et al., 2001; Hwu et al., 2001).

   Todos esses estudos mostraram um padrão de replicação e não replicação (Riley 2000). Para a detecção de genes de efeito modesto em distúrbios complexos, tamanho de amostra inadequado e etnia mista foram os principais problemas metodológicos. Argumenta-se que pelo menos 600 pares de irmãos afetados podem ser necessários para uma alimentação adequada (Hauser et al., 1996).

   Estudos de genes candidatos revelaram resultados inconsistentes na última década. Genes relacionados a neurotransmissores, como dopamina (D1, D2, D3, D4, D5), serotonina, ácido r-aminobutírico e genes do receptor de glutamato foram estudados usando estudos de associação e ligação e nenhum resultado consistente obtido (Asherson et al., 1995 , Breyler e outros, 1995; Hranilovic e outros 2000; Catalano e outros, 1993, Serretti e outros, 1999; Chen ACH, 1996,1997). Genes relacionados ao crescimento de neurônios (Margolis et al., 1994), genes de fosfolipase (Peet, 1998, Wei 1998) e um gene de canal de potássio (hKCa3/KCNN3) (Dror et al., 1999) foram relatados como associados à esquizofrenia. No projeto de caso-controle, muitos genes e fenótipos sendo avaliados e a mistura de etnia na amostra podem aumentar os erros do tipo I.

   A abordagem de gene candidato posicional usando estratégia de desequilíbrio de ligação pode resolver os dois problemas acima levantados pela abordagem de estudo de associação de gene candidato com base nos resultados de ligação anteriores para aumentar a probabilidade anterior e usando trios pais-descendentes como controle interno. Essa abordagem é mais poderosa do que o estudo de ligação para localizar os genes de suscetibilidade de transtornos complexos como a esquizofrenia (Risch e Merikangas, 1996). Com as evidências de ligação de mapeamento fino, toda a sequência do genoma e mapa de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) e a técnica avançada de microarray disponível, essa abordagem é mais eficiente para localizar os genes de suscetibilidade da esquizofrenia (Owen et al., 2000; Baron 2001 ). Recentemente, um estudo usando a estratégia acima relatou evidências significativas de desequilíbrio de ligação da esquizofrenia para um polimorfismo microssatélite e um SNP de um gene, o gene NOTCH4, no cromossomo 6p21 (Wei e Hemmings, 2000).

   Considerando a importância do poder adequado para análise de ligação e os potenciais da abordagem de genes candidatos posicionais usando estratégias de desequilíbrio de ligação, propomos este projeto para fazer a clonagem posicional de genes de vulnerabilidade da esquizofrenia. Nesta etapa, coletamos a amostra de DNA de cerca de 700 famílias com pelo menos dois irmãos esquizofrênicos por nossos próprios esforços, bem como através da colaboração com a Universidade de Harvard nestes quatro anos, e esta amostra familiar garante poder adequado para análise de ligação e posterior análise posicional estratégia de clonagem.

3. Déficit neuropsicológico na esquizofrenia O SCH costumava ter comprometimento nas funções neuropsicológicas da função executiva, atenção sustentada e memória de trabalho (Goldberg e Gold, 1995) e era devido à disfunção frontostriatal (Elliot et al., 1995). A deficiência múltipla pode ser melhor demonstrada por baterias de testes, em vez de testes únicos e isolados (Kremen et al., 1994) e as deficiências sugerem fortemente disfunção do circuito fronto-temporal-límbico (Gold e Harvey, 1993).

   A atenção visual sustentada pelo Continuous Performance Test (CPT) e a função executiva pelo Wisconsin Card Sorting Test (WCST) foram estudadas mais detalhadamente. Os mais difíceis são indicadores de vulnerabilidade estáveis, enquanto os mais simples podem ser indicadores mediadores de vulnerabilidade na esquizofrenia (Chen e Faraone, 2000). Déficits de CPT foram associados a sintomas negativos (Nuechterlein et al., 1986; Hain et al., 1993; Johnstone e Frith, 1996; Liu et al., 1997) e com transtorno do pensamento (Nuechterlein et al., 1986; Strauss et al. ., 1993; Nelson et al., 1998) ou sintomas desorganizados (Liu et al., 1997).

   Déficits no desempenho do WCST foram duradouros e previram incapacidade de longo prazo, independente de outros déficits cognitivos (Weinberger et al., 1986; Goldberg et al., 1988). Verificou-se que os déficits do WCST estão relacionados ao córtex pré-frontal dorsolateral (Weinberger et al., 1986; Berman et al., 1995) e que as drogas dopamiméticas melhoram seu desempenho (Daniel et al., 1991; Mattay et al., 1996).

   Esses déficits, sendo específicos do HSC e com risco genético de HSC, podem, portanto, servir como endofenótipos na análise genética do HSC.

4. Abordagem do Endofenótipo em Estudos Genéticos Moleculares da Esquizofrenia Para resolver o poder insuficiente das análises e a heterogeneidade genética do HSC, uma estratégia alternativa foi o uso de uma característica neurobiológica específica da doença como um endofenótipo refletindo o efeito de uma única alteração genética (Lander, 1988 ).

O déficit de CPT era um endofenótipo potencial da suscetibilidade genética ao SCH (Chen e Faraone, 2000). Estava presente não apenas em pacientes com HSC, mas também em seus parentes não psicóticos (Grove et al., 1991; Mirsky et al., 1995; Chen et al., 1998). Usando dados de 148 parentes não psicóticos e 345 adultos da comunidade, Chen et al. (1998) descobriram que a taxa de risco de recorrência λ era maior que 15 para o CPT não degradado e maior que 30 para o CPT degradado.

Assim, usar déficits de CPT como endofenótipos de SCH forneceria uma medida valiosa de risco genético, melhoraria o poder das análises genéticas e poderia ajudar a identificar genes de suscetibilidade para esquizofrenia. Em nossa amostra, cerca de 220 famílias receberam avaliação CPT e WCST. Pretendemos adicionar 80 famílias com dados de CPT e WCST, e fazer 300 famílias com dados disponíveis para estudo de endofenótipo. É possível usar esses endofenótipos para análises genéticas adicionais.

Esta estratégia de endofenótipo tem sido bem sucedida no mapeamento de um déficit neurofisiológico da esquizofrenia, diminuição da inibição de P50, para loci no cromossomo 15q13-14, recentemente. A análise de ligação do genoma do déficit de inibição de P50 em nove famílias de SCH multiplex encontrou um lod score significativo (Z = 5,30,  = 0) em um cromossomo 15q14. Quando o diagnóstico clínico de SCH foi usado como o fenótipo afetado, o escore lod máximo no mesmo marcador não foi estatisticamente significativo (Freedman et al., 1997). O outro déficit neurobiológico, disfunção de rastreamento ocular da esquizofrenia, foi mapeado no cromossomo 6p23-21 com o escore lod multiponto máximo de 4,02. Novamente, embora o diagnóstico clínico de esquizofrenia tenha sido usado como o fenótipo afetado, o resultado da ligação não foi significativo (Arolt et al., 1996). Em resumo, com a abordagem do endofenótipo usando déficits de atenção sustentados e o poder adequado que nossa amostra fornece, temos confiança no avanço da busca por genes de vulnerabilidade do HSC.

Estudos Preliminares.

1. Coleção de Família de Irmãos Co-afetados por Esquizofrenia O P.I. tem se empenhado em coletar a família de pares de irmãos co-afetados por esquizofrenia desde 1990. Com a consciência da importância e necessidade crítica da avaliação diagnóstica, esses probandos, irmãos co-afetados e irmãos não afetados disponíveis, bem como os pais, foram avaliados com uma entrevista diagnóstica psiquiátrica semiestruturada (Hwu 1991a) usando critérios diagnósticos do DSM -III-R e/ou DSM-IV. Além disso, sob o modelo teórico evolutivo da psicopatologia (Hwu 1985, 1992), também foram coletados dados sobre o desenvolvimento. Todos esses dados clínicos e dados da árvore genealógica foram estabelecidos no banco de dados do laboratório de genética molecular (DBMGL) no Departamento de Psiquiatria, Faculdade de Medicina, Universidade Nacional de Taiwan, sob os auspícios do P.I. No total, existem cerca de 120 famílias de pares de irmãos co-afetados por esquizofrenia disponíveis para análise de ligação no DBMGL. Via de regra, as amostras de DNA foram obtidas das células brancas periféricas de todos os indivíduos disponíveis da família, especialmente os irmãos coafetados, pelo menos um irmão não afetado e os pais. No total, cerca de 1000 amostras de DNA estavam no DBMGL. Linhas celulares de células linfoblásticas transformadas com EBV-958 também foram estabelecidas. Todos esses sujeitos do estudo foram bem informados para este estudo e o consentimento informado foi obtido. Todas as famílias que participaram deste estudo foram convidadas a participar de um "New-Hope Family Club" para reuniões e discussões periódicas. Cerca de 150 casos de esquizofrenia que receberam avaliação clínica detalhada e acompanhamento regular e avaliação neuropsicológica abrangente, incluindo CPT, WCST, WAIS-R e WMS, foram recrutados para a obtenção de amostras de DNA. Cerca de 200 controles normais também foram recrutados para a obtenção de amostras de DNA.

Foi concluído um trabalho colaborativo de 4 anos em todo o país com a Universidade de Harvard em Taiwan (Taiwan Schizophrenia Linkage Study, TSLS), patrocinado pelo NIMH, EUA, para coletar famílias com pares de irmãos coafetados com esquizofrenia. 560 famílias foram recrutadas. Um total de 600 famílias serão recrutadas neste ano. Amostras de DNA, linhas celulares e dados clínicos de DIGS, FIGS foram coletados. Cerca de 220 famílias receberam avaliação neuropsicológica. (CPT e WCST).

1. Estudos de Genética Molecular da Esquizofrenia Nossos estudos de genética molecular da esquizofrenia foram apoiados por três projetos consecutivos: o projeto de genética molecular patrocinado pelo National Science Council (1989-1992), o projeto de genética molecular do MPGRP (1993-1998) e o projeto de genética molecular de MPSS (1998-2001) patrocinado por NHRI. A fase inicial (1989-1992) desse projeto de genética molecular concentrou-se no estabelecimento de instalações laboratoriais e na coleta de famílias de pares de irmãos esquizofrênicos coafetados. A 2ª fase deste projecto de genética molecular (1993-1998) deu continuidade à recolha de famílias, tendo a recolha sido alargada à recolha de pares de irmãos bipolares co-afectados, casos esquizofrênicos e controlos normais. Descobrimos que o polimorfismo do gene do receptor de androgênio (CAG)n tinha uma provável associação com a esquizofrenia (Hwu et al., 1995). Esta descoberta apoiou a descoberta de DeLisi et al (1994). Foram promovidos os métodos de genética molecular de análise de ligação e associação de genes candidatos, este laboratório do P.I. (Dra. Hwu) mudou-se para enfatizar nesta área também. Os resultados deste laboratório foram: (1) O polimorfismo de repetições (48bp) no gene do receptor DRD4 não foi significativamente relacionado com a esquizofrenia (Hong et al., 1998); (2) Verificou-se que uma única mutação em DRD2 não estava associada à esquizofrenia (Chen et al., 1996) (3) As amostras do banco de dados deste projeto juntaram-se a três estudos de colaboração internacional usando abordagem de clonagem posicional que precisam de relativamente grandes amostra. O primeiro é organizado por Gill et al (1996) intitulado como "Schizophrenia Collaborative Linkage Group", outro foi liderado pelo Dr. Moises (1995) na Universidade de Kiel, Alemanha e o terceiro é com o Dr. Powell em Londres (Lin et al ., 1995). Todos esses resultados revelaram os possíveis marcadores nos cromossomos 6p, 11q, 13q, 19q e 22q. Isso sugere que pacientes taiwaneses podem ter possíveis genes de suscetibilidade nessas regiões, exceto o cromossomo 13q (Lin et al., 1995), ajustando-se a um modelo oligogenético. (4) O estudo de associação do gene do receptor 5-HT2 localizado no cromossomo 13q foi negativo; (5) A análise epidemiológica clínica usando pares de irmãos co-afetados demonstrou a tendência de 3 grupos de sintomas independentes de desorganização da realidade, desorganização e estado negativo (Hwu et al., 1997); (6) Evidência de ligação fraca com loci no cromossomo 6p24-22 (Hwu et al., 2000).

   A 3ª fase do estudo de genética molecular (1998-2001) continuou com foco na coleta de famílias de pares de irmãos esquizofrênicos coafetados e análise de ligação em evidências sugestivas relatadas de regiões cromossômicas, incluindo cromossomo 1q21-q22, 1q31-q42, 6p21, 8p24- p21, 15q13-q14, 22q11-q14. Os resultados da ligação foram (1) evidência sugestiva de ligação para esquizofrenia com e sem os sintomas negativos no cromossomo 6p24 e 22q12 (Lin et al., 1999a) (2) nenhuma evidência de ligação do receptor GABAA α1 (GABRA1), β1 (GABRB1) eβ3 (GABAB3) gene da subunidade com esquizofrenia (Lin et al., 1999b) (3) nenhuma evidência de ligação do gene do receptor Glutamato GluR5 e GluR6 com esquizofrenia (Lin et al., 1999c) (4) nenhuma evidência de ligação do gene SCA1 com esquizofrenia (Liu et al., 2001a) (5) evidência de ligação sugestiva no marcador (D8s1222) do cromossomo 8p com esquizofrenia (NPL Z score = 2,58, p=0,005) (Hwu et al., 2001a) (6) evidência de ligação sugestiva de marcador (D1s251) do cromossomo 1q31-42 com esquizofrenia (NPL Z score = 2,18, p=0,01) (Hwu et al., 2001b). O marcador está localizado próximo ao gene candidato DISC1. (7) evidência sugestiva de ligação do marcador (D15s976) em 15q13-14 com esquizofrenia (NPL Z score = 3,33, p=0,0003) (Liu et al., 2001b). (8) nenhuma evidência de ligação de esquizofrenia a loci no cromossomo 1q21-22 (Liu et al., 2001c). (9) Ligação sugestiva ao locus do gene NOTCH4 no cromossomo 6p21.3 (NPL Z score = 2,79, p=0,002) (Hwu et al. 2001c). A abordagem do gene candidato revelou os seguintes resultados: (1) possível associação entre o polimorfismo do gene do receptor de dopamina D4 (DRD4) com a resposta rápida ao tratamento da esquizofrenia (Liu et al., 2001d). (2) nenhuma associação entre o polimorfismo do gene da fosfolipase A2 citosólica (c-PLA2) e a esquizofrenia (Liu et al., 2000).

2. Estudos sobre déficits neuropsicológicos na esquizofrenia Encontramos atenção sustentada prejudicada pelo teste de desempenho contínuo (CPT) como o marcador de traço da esquizofrenia. Estudos familiares indicaram que os déficits de atenção sustentados medidos pelo CPT são marcadores de vulnerabilidade da esquizofrenia (Chen e Faraone, 2000). Os resultados são: (1) uma proporção substancial de parentes não psicóticos de probandos com esquizofrenia (19-34%) tem déficits CPT, que podem ser previstos a partir do desempenho CPT de seus probandos (Chen et al., 1998a); (2) indivíduos com características de personalidade esquizotípica também exibem déficits de CPT, que estão especificamente associados a fatores negativos da esquizotipia. (Chen et al., 1998b); (3) Déficits de CPT estão presentes em pacientes esquizofrênicos, estão particularmente associados a sintomas negativos e desorganizados, e aqueles com versões de CPT mais difíceis não são passíveis de tratamento neuroléptico (Liu et al., 2000).

   A especificidade do CPT foi estudada (Liu et al., 2000) em um grupo de pacientes com esquizofrenia (n=41) em contraste com o grupo de pacientes bipolares com sintomas psicóticos (n=46) e o grupo de pacientes bipolares sem sintomas psicóticos (n=22) e um grupo de pacientes com transtorno depressivo maior não psicótico (n=22). Verificou-se que os déficits de CPT são indicadores estáveis ​​e vulneráveis ​​de esquizofrenia, mediando indicadores de vulnerabilidade para transtorno bipolar e indicadores dependentes do estado para depressão maior. Esses resultados demonstram que os déficits de CPT são marcadores de traço válidos da esquizofrenia.

3. Estudos sobre a Heterogeneidade Clínica da Esquizofrenia No campo da psiquiatria, o background psicopatológico clínico é crucial para os estudos de genética molecular. O investigador principal (HGH) desenvolveu um modelo teórico psicopatológico evolutivo para estudos descritivos e neurobiológicos. O trabalho completo do estudo psicopatológico descritivo sobre a esquizofrenia foi publicado [Esquizofrenia: uma psicopatologia descritiva, 1999 ISBN 957-9201-21-8, Taipei, Chu-ching Publishing Company]. A questão da heterogeneidade clínica foi abordada por um novo método estatístico usando tecnologia de plotagem gráfica (Chen, 1999) com base na escala de classificação PANSS. Dois (Hwu et al, 2001) ou três (Hwu et al, 2001) subtipos de esquizofrenia foram delineados e validados por acompanhamento e dados neuropsicológicos, como déficit de atenção (CPT). Durante o acompanhamento de dois anos, os padrões de sintomas dos pacientes esquizofrênicos permaneceram estáveis ​​(Hwu et al, 2001). Isso confirma os esforços de subtipagem na esquizofrenia usando padrões de sintomas fenomenológicos. Esses dados sugerem a possível fecundidade do estudo de ligação genética na esquizofrenia, considerando os subtipos fenomenológicos, bem como os endofenótipos em estudos de ligação e associação.

Em conclusão, todos esses dados preliminares revelam que a amostra de DNA, os dados clínicos e de endofenótipo foram bem preparados neste programa POCOS. O PI e sua equipe têm experiência na realização de trabalhos de laboratório e análises genéticas adicionais neste projeto.