Hoito erytropoietiinilla ja kognitio hypoglykemian aikana

Kokeellinen protokolla 6 päivää ennen kuin hypoglykeemiset puristinpotilaat tulivat klinikalle, ja tietoja väestöstä, elämäntavoista ja kliinisistä ominaisuuksista kerättiin. Suoritettiin fyysinen tutkimus, jossa keskityttiin mahdolliseen tromboemboliseen sairauteen. Verenpaine mitattiin kahdesti 10 minuutin levon jälkeen istuma-asennossa. Perifeerisen ja autonomisen neuropatian mittaukset arvioitiin ja 12-kytkentäinen elektrokardiogrammi (EKG) arvioitiin visuaalisesti. Hypoglykemiatietoisuuden tila luokiteltiin Pedersen-Bjergaardin et al [22] mukaan. Edellisen viikon lievän ja vaikean hypoglykemian esiintymistiheydet kirjattiin kyselyyn. Jatkuvaan glukoosivalvontaan (CGM) asennettiin anturi (Guardian® REAL-time, Medtronic Minimed, Northridge, USA). Tämän jälkeen koehenkilö esiteltiin uudelleen kokeelliseen protokollaan ja kognitiivisia testejä koulutettiin kahdesti oppimisvaikutuksen välttämiseksi kokeiden aikana. Lopuksi tutkimuslääkettä ruiskutettiin suonensisäisesti neljän minuutin aikana. Koehenkilöitä ohjeistettiin elämään ja syömään kuten ennenkin, välttämään tiukkaa liikuntaa, alkoholin ja psykoaktiivisten huumeiden käyttöä seuraavan viikon ajan. Potilas kalibroi CGM:n verensokerimittarilla CONTOUR® LINK (Bayer Health Care, Leverkusen, Saksa).

3 päivää ennen koetta Uusi CGM-anturi asetettiin ja hypoglykemiahälytys aktivoitiin. Koska CGM-glukoosiarvo viivästyy noin 10 minuuttia plasman glukoosiin verrattuna, hälytyspisteeksi asetettiin 4,5 mmol/l. CGM-glukoosiprofiilit kolmelta viimeiseltä päivältä ladattiin sen tarkistamiseksi, pitäisikö insuliiniannostusta muuttaa hypoglykemiariskin vähentämiseksi 3 päivää myöhemmin suoritettavaan kokeeseen asti. Lopuksi koehenkilöt harjoittelivat kognitiivisten toimintojen testejä uudelleen.

Koepäivä Koehenkilöt saapuivat klo 8.00 laboratorioon yön yli paaston jälkeen. CGM:n tiedot ladattiin. Jos hypoglykemia, joka määriteltiin vähintään kahdella peräkkäisellä alle 3,5 mmol/l CGM-arvolla tai yhdellä itsevalvotulla verensokeriarvolla alle 3,5 mmol/l, oli esiintynyt edellisenä yönä, koe lykättiin vähintään 14 päiväksi. Näin oli kerrankin. CGM varoitti osallistujia verensokerin alentamisesta koetta edeltävänä yönä kolme kertaa ennen kuin se todella tapahtui. Näissä tapauksissa osallistujia kehotettiin syömään standardoitu ateria, joka sisälsi 10 grammaa glukoosia ja 35 grammaa tummaa leipää. Yhdelläkään osallistujalla CGM-glukoosi ei ollut > 20 mmol/l kokeita edeltävänä yönä.

Kohde vietiin kokeelliseen ympäristöön ja varustettiin seuraavasti: 1) Yksi antecubitaalinen suonensisäinen linja insuliinin ja glukoosin infuusiota varten ja yksi linja mahdollisimman distaalisesti verinäytteitä varten. Sen jälkeen käsi ja käsivarsi asetettiin lämmitettyjen pehmusteiden päälle ja niiden alle laskimoveren valtimoimiseksi; 2) EEG (elektroenkefalografia) -suojus, kaksi korvalehtiviittausta ja kaksi sydänaluste EKG-johtoa yhdistettynä digitaaliseen EEG-tallentimeen (Cadwell, Kennewick, Washington, USA); 3) automaattinen verenpaineyksikkö (UA787, A&D Medical, Abingdon, UK). Myöhemmin koehenkilöt harjoittelivat kognitiivisia testejä.

Koe suoritettiin syklisesti, yhteensä kolme identtistä sykliä: perussykli (euglykemia), hypoglykeeminen sykli ja palautumissykli (euglykemia). Jokaisen syklin alussa otettiin valtimoverta. Myöhemmin hypoglykeemiset oireet arvioitiin, minkä jälkeen mitattiin verenpaine ja pulssi. Tämän jälkeen kognitiivisten toimintojen arviointi tehtiin Kalifornian kognitiivisen arviointipaketin (CALCAP) avulla, jäljentekotestillä ja Stroop-testillä. Sama henkilö (PLK) suoritti kaikki kognitiiviset testit samassa järjestyksessä. Jokaisen syklin lopussa tehtiin 5 minuutin EEG-tallennus silmät kiinni. Lopuksi otettiin jälleen valtimoverta.

Hypoglykeeminen puristusmenetelmä Lyhytvaikutteista ihmisinsuliinia (Actrapid®, Novo Nordisk, Bagsværd, Tanska) sekoitettuna potilaan heparinisoituun plasmaan ja isotoniseen suolaliuokseen infusoitiin nopeudella 1,0 mU x ruumiinpaino-1 x min-1. Kapillaariveren glukoosi mitattiin sängyn vieressä 5 minuutin välein ja säädettiin vaihtelevalla 20 % glukoosi-infuusiolla. Hypoglykeeminen tavoite oli 2,0 - 2,2 mmol/l. Euglykeemisten syklien aikana tavoite oli 5,0 mmol/l.

Hypoglykemiaoireiden pisteytys Hypoglykemiaoireet arvioitiin The Edinburgh Hypoglycemia Scale -asteikolla, joka on kokeellisesti aiheutettua hypoglykemiaa varten kehitetty kyselylomake, jossa koehenkilöiden on ilmoitettava 13 ennalta määritellyn hypoglykeemisen oireen vakavuus asteikolla yhdestä seitsemään [23].

Kognitiiviset toimintotestit California Cognitive Assessment Package (CALCAP) Mini CALCAP -testin tanskankielinen versio (E.N Miller, California Cognitive Assessment Package, Norland Software, Los Angeles, 1990) toimii tietokoneen näytöllä ja koostuu kahdesta eri reaktioaikatehtävästä, joissa on erilainen reaktioaikatehtävä. monimutkaisuus: 1) valintareaktiotehtävä (RT1), jossa on reaktio tiettyyn numeroon (seitsemän) ja 2) valintareaktiotehtävä (RT2), jossa reagoidaan kahteen identtiseen numeroon sarjassa (siirtyvät numerot). Jälkimmäinen testi on 1-back-tehtävä ja sisältää jatkuvan huomion/työmuistin käytön.

Jäljentekotesti Jäljentekotesti on huomion ja toimeenpanon testitoiminto [24]. Käytimme Comprehensive Trail-Making Test -testin polkua 5 (Pro-ed, Austin, Texas, USA), joka on järjestetty kuten alkuperäinen poluntekotesti, osa B, joka kehitettiin vuonna 1949, ja lisäsimme häiriöpiirejä [24]. Tässä kokeessa koehenkilön tulee yhdistää ympyröityjä numeroita ja kirjaimia vuorotellen (esim. 1-A-2-B-3-C…). Testin päättymisaika mitattiin sekunneissa.

Stroop Color and Word Test Tämä testi mittaa valikoivaa huomiota ja kognitiivista joustavuutta [25]. Testikäsikirjan mukaan käytettiin tanskalaista versiota Goldenin [26] standardoidusta versiosta. Testi koostuu kolmesta sivusta, joista jokaisella on 100 kohdetta 5 sarakkeessa. Ensimmäisellä sivulla sanat "punainen", "vihreä" ja "sininen" on painettu mustalla ja satunnaisesti järjestettyinä. Toiselle sivulle "XXXX" on painettu punaisella, vihreällä tai sinisellä ja järjestetty satunnaisesti. Viimeiselle sivulle sanasivun sanat on painettu värisivulta yhteensopimattomilla väreillä. Ensimmäisellä ja toisella sivulla kohteen oletetaan lukevan ääneen esineiden väriä. Sana-väri-sivulta kohteen tulee lukea kunkin kohteen musteen väri. Kohteiden lukumäärä 45 sekunnin jakson aikana kirjataan. Raakapisteet esitetään.

Neurofysiologiset testit Elektroenkefalografia (EEG) Kliiniseen EEG-lukemiseen (TWK) erikoistunut neurofysiologi analysoi EEG-tiedot. Jatkuva 20-kanavainen EEG tallennettiin. Tiedot suodatettiin ensimmäisen kertaluvun 0,53 Hz:n alasuotimella ja ensimmäisen kertaluvun 70 Hz:n high cut -suodattimella. Kaikki tiedot tarkastettiin visuaalisesti linkitetyssä korvalehteen vertailumontaasissa. Jokaiselle koehenkilölle valittiin elektrodi, joka antaa parhaan edun hallitsevasta aktiivisuudesta, tehospektrianalyysiin, joka suoritettiin käyttämällä nopeaa Fourier-muunnosta (FFT) 2,5 sekunnin jaksoissa (jolla saatiin 0,4 Hz:n resoluutio FFT-tehospektrissä). Jos tehospektrin huippu voitiin tunnistaa alueella 4-13 Hz, se erotettiin edustavana hallitsevaa taajuutta.