低血糖時のエリスロポエチンと認知による治療

低血糖クランプ被験者が診療所に出席する6日前の実験プロトコル、および人口統計学、ライフスタイルおよび臨床的特徴に関する情報が収集されました。 可能性のある血栓塞栓症に焦点を当てた身​​体検査が行われました。 血圧は、座位で 10 分間安静にした後、2 回測定しました。 末梢および自律神経障害の測定値を評価し、12 誘導心電図 (ECG) を視覚的に評価しました。 低血糖意識の状態は、Pedersen-Bjergaard ら [22] に従って分類されました。 前の週の軽度および重度の低血糖のエピソードの頻度をアンケートに記録しました。 連続グルコースモニタリング（CGM）用のセンサーが取り付けられました（Guardian® REAL-time、Medtronic Minimed、Northridge、USA）。 その後、被験者は実験プロトコルに再導入され、認知テストは実験中の学習効果を避けるために2回訓練されました。 最後に、治験薬を 4 分間かけて静脈内注射しました。 被験者は、激しい運動、アルコール、向精神薬の使用を避けるために、次の 1 週間は以前と同じように生活し、食事をするように指示されました。 CGM のキャリブレーションは、患者が血糖測定器 CONTOUR® LINK (Bayer Health Care, Leverkusen, Germany) を使用して行いました。

実験3日前 新しいCGMセンサーを挿入し、低血糖アラームを作動させた。 CGM グルコース値は血漿グルコースと比較して約 10 分遅れるため、アラームポイントは 4.5 mmol/l に設定されました。 過去 3 日間の CGM グルコース プロファイルをダウンロードして、3 日後の実験まで低血糖のリスクを減らすためにインスリン投与量を変更する必要があるかどうかを確認しました。 最後に、被験者は認知機能テストを再度トレーニングしました。

実験当日 被験者は、一晩絶食した後、午前 8 時に実験室に到着しました。 CGM からのデータがダウンロードされました。 少なくとも 2 回連続して 3.5 mmol/l を下回る CGM 値、または 3.5 mmol/l を下回る 1 つの自己測定血糖値によって定義される低血糖が前夜に発生した場合、実験は少なくとも 14 日間延期されました。 これは、ある時、そうでした。 CGM は、実験の前夜に血糖値が実際に低下する前に、3 回にわたって血糖値の低下について参加者に警告しました。 これらの場合、参加者は、10グラムのブドウ糖と35グラムの黒パンの標準化された食事を食べるように指示されました. 実験前の夜に CGM グルコースが 20 mmol/l を超える参加者はいなかった。

被験者は実験設定に導入され、次のように装備されました。 その後、手と腕を加熱パッドの上と下に置き、静脈血を動脈化しました。 2) EEG (脳波記録) キャップ、2 つの耳たぶリファレンス、およびデジタル EEG レコーダー (Cadwell、ケネウィック、ワシントン、米国) に接続された 2 つの胸部 ECG リード。 ３）自動血圧計（ＵＡ７８７、Ａ＆Ｄ Ｍｅｄｉｃａｌ、アビンドン、英国）。 その後、被験者は認知テストを訓練しました。

実験は、ベースラインサイクル（正常血糖）、低血糖サイクル、および回復サイクル（正常血糖）の合計3つの同一サイクルで周期的に実施されました。 各サイクルの開始時に、動脈化された静脈血が採取されました。 続いて、低血糖症状を評価した後、血圧と脈拍数を測定しました。 その後、認知機能の評価は、California Cognitive Assessment Package (CALCAP)、トレイル メイキング テスト、およびストループ テストで行われました。 すべての認知テストは、同じ人物 (PLK) によって同じ順序で実施されました。 各サイクルの終わりに、目を閉じて 5 分間の脳波記録を行いました。 最後に、動脈化された静脈血が再び採取されました。

低血糖クランプ手順 短時間作用型ヒトインスリン (Actrapid®、Novo Nordisk、デンマーク、バグスヴァル) を患者からのヘパリン添加血漿および等張生理食塩水と混合し、1.0 mU x kg 体重 -1 x 分 -1 の速度で注入しました。 毛細血管血糖をベッドサイドで 5 分ごとに測定し、20% ブドウ糖の可変注入で調整しました。 血糖降下の目標は 2.0 ～ 2.2 mmol/l でした。 正常血糖サイクル中の目標値は 5.0 mmol/l でした。

低血糖症状のスコアリング 低血糖症状は、実験的に誘発された低血糖のために開発されたアンケートであるエジンバラ低血糖スケールによって評価され、被験者は 13 の事前定義された低血糖症状の重症度を 1 から 7 までのスケールで示す必要があります [23]。

認知機能テスト California Cognitive Assessment Package (CALCAP) デンマーク語版の Mini CALCAP テスト (E.N Miller、California Cognitive Assessment Package、Norland Software、ロサンゼルス、1990 年) は、コンピューター画面で実行され、異なる反応時間の 2 つのタスクで構成されます。複雑さ: 1) 特定の数字 (7) への反応を伴う選択反応タスク (RT1)、および 2) シーケンス内の 2 つの同一の数字への反応を伴う選択反応タスク (RT2) (数字のシフト)。 後者のテストは 1 バック タスクであり、持続的注意/作業記憶の使用が含まれます。

トレイル メイキング テスト トレイル メイキング テストは、テストの注意と実行機能です [24]。 1949 年に開発されたオリジナルのトレイル メイキング テスト、パート B のように編成された Comprehensive Trail-Making Test (Pro-ed、テキサス州オースティン) のトレイル 5 を使用し、ディストラクター サークルを追加しました [24]。 このテストでは、被験者は丸で囲まれた数字と文字を交互につなげる必要があります (例: 1-A-2-B-3-C…)。 テストを終了するまでの時間は秒単位で測定されました。

Stroop Color and Word Test このテストは、選択的注意と認知の柔軟性を測定します [25]。 テストマニュアルに従って、Golden [26] による標準化されたバージョンのデンマーク語バージョンが使用されました。 テストは 3 ページで構成され、各ページには 5 列に 100 項目が表示されます。 最初のページには、「赤」「緑」「青」の文字が黒でランダムに配置されています。 2ページ目には「XXXX」が赤、緑、青の3色でランダムに配置されています。 最後のページでは、単語ページの単語がカラー ページとは異なる色で印刷されます。 1 ページ目と 2 ページ目で、被験者はアイテムの色を大声で読むことになっています。 word-color-page では、被験者は各項目のインクの色を読み取らなければなりません。 45 秒間のアイテム数が記録されます。 生のスコアが表示されます。

神経生理学的検査 脳波検査 (EEG) 臨床 EEG リーディング (TWK) を専門とする神経生理学者が EEG データを分析しました。 連続 20 チャンネル脳波が記録されました。 データは、一次の 0.53 Hz ロー カット フィルターと一次の 70 Hz ハイ カット フィルターによってフィルター処理されました。 すべてのデータは、リンクされた耳たぶ参照モンタージュで視覚的に検査されました。 各被験者について、支配的な活動を最もよく表す電極がパワースペクトル分析のために選択されました。これは、2.5秒エポックで高速フーリエ変換（FFT）を使用して実行されました（FFTパワースペクトルで0.4 Hzの解像度を与えます）。 パワー スペクトルのピークが 4 ～ 13 Hz の範囲で識別できた場合、それは支配的な周波数の代表として抽出されました。