Traitement avec l'érythropoïétine et la cognition pendant l'hypoglycémie

Protocole expérimental 6 jours avant que les sujets du clamp hypoglycémique ne se présentent à la clinique, et des informations sur la démographie, le mode de vie et les caractéristiques cliniques ont été recueillies. Un examen physique axé sur une éventuelle maladie thromboembolique a été effectué. La pression artérielle a été mesurée deux fois après 10 min de repos en position assise. Les mesures de la neuropathie périphérique et autonome ont été évaluées et un électrocardiogramme (ECG) à 12 dérivations a été évalué visuellement. L'état de conscience de l'hypoglycémie a été classé selon Pedersen-Bjergaard et al [22]. Les fréquences des épisodes d'hypoglycémie légère et sévère au cours de la semaine précédente ont été enregistrées dans un questionnaire. Un capteur pour la surveillance continue du glucose (CGM) a été monté (Guardian® REAL-time, Medtronic Minimed, Northridge, USA). Par la suite, le sujet a été réintroduit dans le protocole expérimental et les tests cognitifs ont été entraînés deux fois pour éviter un effet d'apprentissage au cours des expériences. Enfin, le médicament à l'étude a été injecté par voie intraveineuse pendant quatre minutes. Les sujets ont reçu pour instruction de vivre et de manger comme ils avaient l'habitude de le faire, d'éviter tout exercice rigoureux, consommation d'alcool et de drogues psychoactives, pendant la semaine suivante. L'étalonnage du CGM a été effectué par le patient avec le lecteur de glycémie CONTOUR® LINK (Bayer Health Care, Leverkusen, Allemagne).

3 jours avant l'expérience Un nouveau capteur CGM a été inséré et une alarme d'hypoglycémie a été activée. Étant donné que la valeur de glucose CGM est retardée d'environ 10 min par rapport au glucose plasmatique, le point d'alarme a été réglé sur 4,5 mmol/l. Les profils de glucose CGM pour les trois derniers jours ont été téléchargés pour vérifier si des changements de dosage d'insuline doivent être faits pour diminuer le risque d'hypoglycémie jusqu'à l'expérience 3 jours plus tard. Enfin, les sujets se sont à nouveau entraînés aux tests des fonctions cognitives.

Jour de l'expérience Les sujets sont arrivés à 8 heures du matin au laboratoire après une nuit de jeûne. Les données du CGM ont été téléchargées. Si une hypoglycémie, définie par au moins deux valeurs CGM consécutives inférieures à 3,5 mmol/l ou une valeur de glycémie autosurveillée inférieure à 3,5 mmol/l, s'était produite au cours de la nuit précédente, l'expérience était reportée d'au moins 14 jours. Ce fut le cas à une occasion. CGM a averti les participants de la diminution de la glycémie au cours de la nuit précédant l'expérience à trois reprises avant qu'elle ne se produise réellement. Dans ces cas, les participants devaient manger un repas standardisé de 10 grammes de glucose et 35 g de pain noir. Aucun participant n'avait une glycémie CGM > 20 mmol/l pendant la nuit précédant les expériences.

Le sujet a été introduit dans le cadre expérimental et était équipé comme suit : 1) Une ligne intraveineuse antécubitale pour la perfusion d'insuline et de glucose et une ligne aussi distale que possible pour le prélèvement sanguin. Par la suite, la main et le bras ont été placés sur et sous des coussinets chauffants pour artérialiser le sang veineux ; 2) Bouchon EEG (électroencéphalographie), deux références de lobe de l'oreille et deux dérivations ECG précordiales connectées à un enregistreur EEG numérique (Cadwell, Kennewick, Washington, USA) ; 3) un tensiomètre automatique (UA787, A&D Medical, Abingdon, Royaume-Uni). Par la suite, les sujets se sont entraînés aux tests cognitifs.

L'expérience a été réalisée de manière cyclique avec un total de trois cycles identiques : un cycle de base (euglycémie), un cycle hypoglycémique et un cycle de récupération (euglycémie). Au début de chaque cycle, du sang veineux artérialisé a été prélevé. Par la suite, les symptômes hypoglycémiques ont été évalués, suivis d'une mesure de la pression artérielle et du pouls. Par la suite, l'évaluation de la fonction cognitive a été effectuée avec le California Cognitive Assessment Package (CALCAP), un test de création de sentiers et le test de Stroop. Tous les tests cognitifs ont été effectués dans le même ordre par la même personne (PLK). A la fin de chaque cycle, 5 minutes d'enregistrement EEG ont été réalisées les yeux fermés. Enfin, du sang veineux artérialisé a été prélevé à nouveau.

Procédure de clamp hypoglycémique De l'insuline humaine à courte durée d'action (Actrapid®, Novo Nordisk, Bagsværd, Danemark) mélangée à du plasma hépariné du patient et à une solution saline isotonique a été perfusée à un débit de 1,0 mU x kg de poids corporel-1 x min-1. La glycémie capillaire a été mesurée au chevet du patient toutes les 5 minutes et ajustée avec une perfusion variable de glucose à 20 %. La cible hypoglycémique était de 2,0 à 2,2 mmol/l. Pendant les cycles euglycémiques, la cible était de 5,0 mmol/l.

Notation des symptômes d'hypoglycémie Les symptômes d'hypoglycémie ont été évalués par l'échelle d'hypoglycémie d'Édimbourg, qui est un questionnaire développé pour l'hypoglycémie induite expérimentalement dans lequel les sujets doivent indiquer la gravité de 13 symptômes d'hypoglycémie prédéfinis sur une échelle de un à sept [23].

Tests des fonctions cognitives California Cognitive Assessment Package (CALCAP) La version danoise du test Mini CALCAP (E.N Miller, California Cognitive Assessment Package, Norland Software, Los Angeles, 1990) s'exécute sur un écran d'ordinateur et se compose de deux tâches de temps de réaction différentes avec des complexité : 1) une tâche de réaction au choix (RT1) avec réaction à un nombre spécifique (sept) et 2) une tâche de réaction au choix (RT2) avec réaction à deux nombres identiques dans une séquence (numéros décalés). Ce dernier test est une tâche à 1 dos et comprend l'utilisation de l'attention soutenue/mémoire de travail.

Trail making test Le trail making test est un test d'attention et de fonction exécutive [24]. Nous avons utilisé le trail 5 du Comprehensive Trail-Making Test (Pro-ed, Austin, Texas, USA), qui est organisé comme le trail making test original, partie B, développé en 1949, et ajouté des cercles distracteurs [24]. Dans ce test, le sujet doit connecter des chiffres et des lettres encerclés en séquence alternée (par ex. 1-A-2-B-3-C…). Le temps nécessaire pour terminer le test a été mesuré en secondes.

Test de couleurs et de mots de Stroop Ce test mesure l'attention sélective et la flexibilité cognitive [25]. Une version danoise de la version standardisée de Golden [26] a été utilisée conformément au manuel de test. Le test se compose de trois pages, chacune ayant 100 items présentés en 5 colonnes. Sur la première page, les mots "rouge", "vert" et "bleu" sont imprimés en noir et disposés de manière aléatoire. Sur la deuxième page "XXXX" est imprimé en rouge, vert ou bleu et disposé de manière aléatoire. Sur la dernière page, les mots de la page de mots sont imprimés dans des couleurs qui ne correspondent pas à celles de la page couleur. Sur la première et la deuxième page, le sujet est censé lire à haute voix la couleur des éléments. Sur la page-mot-couleur, le sujet doit lire la couleur de l'encre pour chaque élément. Le nombre d'éléments pendant une période de 45 secondes est enregistré. Les scores bruts sont présentés.

Tests neurophysiologiques Electroencéphalographie (EEG) Un neurophysiologiste spécialisé dans la lecture EEG clinique (TWK) a analysé les données EEG. Un EEG continu à 20 canaux a été enregistré. Les données ont été filtrées par un filtre coupe-bas de premier ordre à 0,53 Hz et un filtre coupe-haut de premier ordre à 70 Hz. Toutes les données ont été inspectées visuellement dans un montage de référence de lobe d'oreille lié. Pour chaque sujet, l'électrode donnant la meilleure représentation de l'activité dominante a été choisie pour l'analyse spectrale de puissance, qui a été réalisée en utilisant une transformation de Fourier rapide (FFT) sur des époques de 2,5 secondes (donnant une résolution de 0,4 Hz dans le spectre de puissance FFT). Si un pic dans le spectre de puissance pouvait être identifié dans la plage 4-13 Hz, il était extrait comme représentatif de la fréquence dominante.