Atorvastatiinin vaikutus luu-verisuoniakseliin

Tausta: Huomattava määrä kliinisiä tutkimuksia on osoittanut, että osteoporoosi lisää merkittävästi kardiovaskulaarista riskiä. Vaikka ns. luu-verisuoniakselin patofysiologinen substraatti on edelleen vaikeaselkoinen, tärkeä rooli katsotaan OPG/RANK/RANKL-triadille, luun uudelleenmuotoilun pääsäätelijälle. Lisäksi verenkierrossa olevat osteoprogenitorit on äskettäin kuvattu uudeksi epäkypsien solujen alajoukoksi, joilla on pro-kalsifikaatiopotentiaalia verisuonistoon ja sydänläppäihin. Siitä huolimatta useat tutkimukset osoittivat, että lipidien hapettumistuotteiden kerääntyminen luustoon voi edistää patologista luun resorptiota pääasiassa estämällä osteoblastien erilaistumista ja indusoimalla osteoklastien kypsymistä/aktivaatiota. Näistä käsityksistä lähtien pyrimme tutkimaan, voiko atorvastatiinihoito vaikuttaa verenkierrossa olevien osteoprogenitorisolujen tasoihin ja OPG/RANK/RANKL-ilmentymiseen T-soluissa ja monosyyteissä hyperkolesteroleemisilla postmenopausaalisilla osteoporoottisilla naisilla.

Menetelmät: Otamme mukaan 20 peräkkäistä hyperkolesteroleemista (LDL-C ≥130 mg/dl) naista, joilla on äskettäin diagnosoitu osteoporoosi ja jotka viittaavat Trevison Cà Foncello -sairaalan osteoporoosi- ja luuaineenvaihduntayksikköön. Osteoporoosin diagnoosi perustui joko lannerangan tai reisiluun kaulan T-pisteeseen ≤2,5 SD. Kaikki potilaat saavat atorvastatiinia 40 mg/vrk 3 kuukauden ajan. Verinäytteet otetaan ilmoittautumisen yhteydessä ja hoitojakson lopussa. Tutkimuksen aikana potilaita ei hoideta kalsiumilla, D-vitamiinilla ja bisfosfonaateilla. Suljemme pois naiset, joiden kliininen arvio on korkea luunmurtuman riski. Tutkimuksen alussa ja 3 kuukauden kuluttua kerätään seeruminäytteitä lipidiprofiilin (kokonaiskolesteroli [TC], LDL-C, HDL-C, triglyseridit [TG]), hs-CRP-taso, osteokalsiini ( OCN), luun alkalinen fosfataasi (BAP), tyypin I kollageenin silloitettu karboksiterminaalinen telopeptidi (CTX-I) ja OPG. Verinäytteet otetaan myös rekisteröinnin yhteydessä ja kolmen kuukauden kuluttua verenkierrossa olevien osteoprogenitorisolujen (virtaussytometria) ja OPG/RANK/RANKL-geenin ilmentymisen määrittämiseksi mononukleaarisissa soluissa (RT-PCR).

Virtaussytometria-analyysi (FACS): kiertävien osteoprogenitorisolujen tunnistus ja kvantifiointi suoritetaan käyttämällä polykromaattista virtaussytometriaa. Lyhyesti sanottuna, punasolujen hajoamisen jälkeen perifeerisen veren kantasoluista analysoidaan CD34:n, OCN:n ja BAP:n pintaekspressio käyttämällä Fitc-konjugoitua anti-ihmis-CD34:ää, PE-konjugoitua anti-ihmisen OCN:ää ja APC-konjugoitua anti-ihmis-BAP:tä. .

Geeniekspressioanalyysi: puhtaat ja elinkykyiset monosyytit ja T-solut saadaan verinäytteistä negatiivisella eristyksellä käyttämällä Dynabeads Untouched Human Monocytes- ja Dynabeads Untouched Human T-soluja, vastaavasti. Kokonais-RNA molemmista solutyypeistä kerätään käyttämällä ja säilytetään -80 °C:ssa analyysiin asti. RANK-, RANKL- ja OPG-transkriptien tasot kvantifioidaan sitten reaaliaikaisella PCR:llä.