Effekt af Atorvastatin på knogle-vaskulær akse

Baggrund: Et betydeligt antal kliniske undersøgelser har vist, at osteoporose medfører en signifikant stigning i kardiovaskulær risiko. Selvom det patofysiologiske substrat for den såkaldte knogle-vaskulære akse stadig er uhåndgribeligt, tilskrives OPG/RANK/RANKL-triaden en vigtig rolle, en mesterregulator inden for knogleombygning. Derudover er cirkulerende osteoprogenitorer for nylig blevet beskrevet som en ny undergruppe af umodne celler, der rummer pro-calcfisk potentiale i vaskulaturen og hjerteklapperne. Ikke desto mindre indikerede en række undersøgelser, at akkumulering af lipidoxidationsprodukter i skelettet kan bidrage til patologisk knogleresorption, hovedsageligt gennem hæmning af osteoblastdifferentiering og induktion af osteoklastmodning/-aktivering. Med udgangspunkt i disse forestillinger søgte vi at undersøge, om behandling med Atorvastatin kan påvirke cirkulerende niveauer af osteo-progenitorceller og OPG/RANK/RANKL-ekspression i T-celler og monocytter hos hyperkolesterolæmiske postmenopausale osteoporotiske kvinder.

Metoder: Vi vil indskrive 20 konsekutive hyperkolesterolæmiske (LDL-C ≥130 mg/dL) kvinder med nydiagnosticeret osteoporose, som henvender sig til osteoporose- og knoglemetabolismeenheden på Cà Foncello Hospitalet i Treviso. Diagnose af osteoporose var baseret på T-score ≤2,5 SD ved enten lændehvirvelsøjlen eller lårbenshalsen. Alle patienter vil modtage Atorvastatin 40 mg/dag i 3 måneder. Blodprøver vil blive udført på tidspunktet for indskrivning og ved afslutningen af ​​behandlingsperioden. Under undersøgelsen vil patienterne ikke blive behandlet med calcium, D-vitamin og bisfosfonater. Vi vil udelukke kvinder med klinisk vurdering af høj risiko for knoglebrud. Ved begyndelsen af ​​undersøgelsen og efter 3 måneder vil serumprøver blive indsamlet for at vurdere lipidprofilen (total kolesterol [TC], LDL-C, HDL-C, triglycerider [TG]), niveau af hs-CRP, osteocalcin ( OCN), knoglealkalisk fosfatase (BAP), tværbundet carboxyterminalt telopeptid af type I kollagen (CTX-I) og OPG. Blodprøver ved indskrivning og efter tre måneder vil også blive taget for at kvantificere cirkulerende osteoprogenitorceller (flowcytometri) og genekspression af OPG/RANK/RANKL i mononukleære celler (RT-PCR).

Flowcytometrianalyse (FACS): identifikation og kvantificering af cirkulerende osteoprogenitorceller vil blive udført ved hjælp af polykromatisk flowcytometri. Kort fortalt, efter lysis af røde blodlegemer, vil perifere blodprogenitorceller blive analyseret for overfladeekspression af CD34, OCN og BAP ved hjælp af Fitc-konjugeret anti-humant CD34, PE-konjugeret anti-humant OCN og APC-konjugeret anti-humant BAP .

Genekspressionsanalyse: rene og levedygtige monocytter og T-celler vil blive opnået fra blodprøver ved negativ isolering ved hjælp af henholdsvis Dynabeads Untouched Human Monocytes og Dynabeads Untouched Human T-celler. Total RNA fra begge celletyper vil blive opsamlet under anvendelse af og opbevaret ved -80°Cuntil analyse. Niveauerne af RANK-, RANKL- og OPG-transskriptioner vil derefter blive kvantificeret ved realtids-PCR.