Mutaatioiden esiintyvyys ja merkitys geeneissä, jotka koodaavat NaPi-yhteiskuljettajia CAVD:n kehityksessä

Mutaatiot SLC34A2-geenissä, joka koodaa natriumfosfaattiapukuljettajaa (NaPi-IIb), aiheuttavat fosfaatin soluunoton häiriöitä, mikä johtaa kalsiumfosfaattikonkrementtien muodostumiseen keuhkoissa, kuten keuhkorakkuloiden mikrolitaasissa (PAM) ilmenee. PAM-potilailla on aiemmin raportoitu ylimääräisiä keuhkojen kalkkeutumia, mukaan lukien sydänläppäkalkkiutuminen.

Calcific Valve Disease (CAVD) on yleinen iäkkäiden ihmisten sairaus, ja sille on ominaista aorttaläpän lehtisten paksuuntuminen ja kalkkeutuminen ilman reumaattista sydänsairautta. CAVD:tä esiintyy yli 25 %:lla yli 65-vuotiaista potilaista, ja se liittyy lisääntyneeseen kardiovaskulaaristen tapahtumien riskiin. Tällä hetkellä taudille ei ole olemassa muuta tehokasta hoitoa kuin kirurginen aorttaläpän korvaus. Sekä kalsium että fosfaatti ovat PAM:n ja CAVD:n kalkkikerrostumien pääkomponentteja. Näiden alustavien löydösten perusteella tutkijat olettavat, että natriumfosfaattiapukuljettajien mutaatioilla voi olla merkitystä sekä keuhkojen että ekstrakeuhkojen kalkkeutumissa.

Tehdään kaksi tutkimusta: 1. Tehdään retrospektiivinen poikkileikkaustutkimus, johon osallistuu ≤ 65-vuotiaita CAVD-potilaita Tanskasta ja Örebrosta. Geneettisen assosiaatioanalyysin avulla tutkitaan yleisten varianttien esiintyvyyttä viidessä natriumfosfaattiapukuljettajia edustavassa geenissä (SLC34A1, SLC34A2, SLC34A3, SLC20A1, SLC20A2) verrattuna terveisiin kontrolleihin. Liittyvät geenit sekvensoidaan myöhemmin mahdollisten syymutaatioiden tunnistamiseksi. 2. Prospektiivisessa tutkimuksessa aorttaläppäkudosta kerätään potilailta, joilla on AS ja joille tehdään kirurginen läppäkorvaus. Kuljettajien molekyylikarakterisointi suoritetaan määrittämällä spesifisen mRNA:n ja proteiinin taso RT-PCR/qPCR:llä ja vastaavasti Western blot -menetelmällä. Lokalisointia ja visualisointia tutkitaan immunovärjäyksellä ja konfokaalilasermikroskopialla. Fibroblastit ja endoteelisolut eristetään ja kasvatetaan viljelmissä seuraavien fosfaatin oton toiminnallisten tutkimusten kanssa.