Sapindus Mukorrossin etanoliuute lopullisena endodonttisen kasteluaineena.

S.mukorossin etanoliuutteen valmistus:

Sapindus mukorossin kuivuneita hedelmiä käytetään kokeellisen juurikanavan huuhteluaineen formulointiin. S:n kuivat perikarpit. siemenmutterin ympärillä oleva mukorossi (≈ 1,0 kg) erotetaan terävällä terällä. Nämä siemenkalvot sekoitetaan hienoiksi hiukkasiksi steriloidussa kotisekoittimessa (Enviro 3 in 1 juicer sekoitin ENJ301). Saatua 10 gramman jauhetta liotetaan 100 ml:ssa absoluuttista etanolia (99 %) 24 tunnin ajan normaalissa huoneenlämpötilassa. Tämä liuotin suodatetaan ja poistetaan pyöröhaihduttimen avulla, ja uute säilytetään puhdistetuissa kierrekorkisissa injektiopulloissa (Premium Vials B4702-12 Glass with Kierrekorkki) -20 ºC:ssa käyttöön asti. Uute liuotetaan uudelleen tislattuun veteen 5 mg/ml:n käyttöpitoisuuden muodostamiseksi.

Kaikki näytteet valmisti yksi käyttäjä käyttäen seuraavaa protokollaa. Poiston jälkeen hammas säilytettiin 0,1 % tymolissa. Jatkuvaan käyttöön asti. Näytteet jaettiin satunnaisesti kolmeen ryhmään tietokoneella tuotetulla ohjelmistolla. Jokaisessa ryhmässä on 30 hammasta.

Kammion avaaminen tehtiin timanttileikkausporalla # 4, #10 K-tyyppinen viila (Maillefer/Dentsply) laitettiin jokaiseen juurikanavaan, kunnes se näkyi apikaalisen aukon ulkopuolella. Työpituus päätetään pienentämällä tätä pituutta 1 mm. Suoritettiin yksi operaattori, joka käytti aluksi K-tyyppisiä tiedostoja (Maillefer/Dentsply) kuin ProTaper Universal Systemillä (Dentsply-Maillefer) F2:een asti. Kastelu suoritettiin jokaisen viilanvaihdon yhteydessä 2,5 ml:lla 3-prosenttista NaOCl:a (kanasolia). Instrumentoinnin jälkeen näyteryhmä 1 kastellaan 3 ml:lla 17 % EDTA:ta ja jätettiin kanavaan 1 minuutiksi. Ryhmä 2 kastellaan Sapindus mukorossilla, lopuksi kaikki ryhmät huuhdellaan 5 ml:lla 0,9 % normaalia suolaliuosta. Kontrolliryhmän lopullinen kastelu tehtiin 0,9 % suolaliuoksella.

Sen jälkeen näyte kuivattiin F2 steriileillä imukykyisillä paperikärjeillä ja pääkartioksi valittiin F2 guttaperkkakartio. Sealapex (Sybron-Endo, Glendora, CA, USA) tiiviste sekoitettiin valmistajan ohjeiden mukaan ja asetettiin kanavaan 25# k:n viilan avulla.

• Mastercone työnnettiin työpituuteen asti ja hinaaja arvioitiin.
• Tiivisteen levitys suoritettiin edellä kuvatulla tavalla.
• GP työnnettiin työpituuteen asti sen jälkeen, kun pääkartion apikaalinen 2 mm oli päällystetty tasaisesti tiivisteaineella.
• Sormilevittimet nro 25 ja nro 20 (MANI, Japani) asetettiin kanavaan tekemään tilaa GP:lle.
• Prosessi toistettiin, kunnes #20 levitin ei kyennyt menemään kanavan koronaaliseen kolmasosaan.
• Ylimääräinen GP leikattiin pois kuumalla lauhduttimella, ja coronal GP tiivistettiin pystysuunnassa hyvän koronatiivisteen tuottamiseksi.
• Pääsyontelo suljettiin GIC-restoratiivisella tyypillä (3M, ESPE). Kaikki näytteet säilytettiin inkubaattorissa (binder GmbH, Saksa) 37 °C:ssa 100 % kosteudessa 1 viikko, jotta tiiviste ehti kovettua kokonaan.

3.10.1 Näytteen valmistelu värin tunkeutumisen stereomikroskooppiseen analyysiin: Kun näytteet oli otettu inkubaattorista, niiden annettiin kuivua ilmassa 10 minuuttia. Kaikki koeryhmän näytteet päällystettiin kahdella kerroksella värillistä kynsilakkaa, paitsi apikaalinen 2 mm juuren kärjestä.

Kynsilakan täydellisen kuivumisen jälkeen juuret asetettiin sitten pystysuoraan 1-prosenttiseen metyleenisiniseen väriaineeseen (WellcoSol, TM) 72 tunniksi.

3 päivän kuluttua näytteet pestiin 5 minuuttia juoksevan vesijohtoveden alla ja jätettiin kuivumaan täysin ilmassa. Väriaineen pääsyn välttämiseksi juuren sisäpinnalle leikkaamisen aikana kynsilakka ja väriaine kaavittiin pois näytteistä skalpellilla ja kirurgisella terällä #15 (Bisturi Ucu, Turkki). Hammas leikattiin puoliksi pituussuunnassa, yhdensuuntaisesti sen pitkän akselin kanssa. Varmistaakseen, että leikkaus tehtiin juuren keskeltä ja estämään tukkeutuneen kanavatilan vaurioituminen, posken ja linguaalisen juuren pinnan keskelle asetettiin 2 mm syvät pitkittäiset urat käyttämällä timanttikiekkoa hitaassa käsikappaleessa ( Nakanishi Inc (NSK), Japani), varoen tunkeutumasta kanavan tilaan. Hampaat murrettiin sitten pituussuunnassa kaksinkertaisella kartiomaisella taltalla ja vasaralla, jolloin koko sulkutila säilyi.

Näytteitä tarkasteltiin sitten stereomikroskoopilla (Olympus VM-ILA-2) bioinformatiikan ja molekyylilääketieteen laboratoriossa (DRIBBS, DUHS) 30-kertaisella suurennuksella. Kuvat otettiin ja ladattiin IMAGE J -ohjelmistoon (National Institute of Health, USA). Näytteet tutki kaksi sokeaa tarkkailijaa (endodonttilääkäri). Tutkija määritti apikaalisen mikrovuodon mittaamalla värin tunkeutumisen lineaarisen syvyyden, joka määritellään suurimmaksi värin tunkeutumisetäisyydeksi juuren kärjestä koronaaliseen ulottuvuuteen. Esityksessä kaikki mitat mitattiin millimetreinä (mm).

Hammastubulusten tunkeutumiseen:

Toinen puolet hampaasta jätettiin kuivumaan 24 tunniksi 40-100 % etyylialkoholissa. Sen jälkeen näyte asennetaan metallituille ja ruiskutetaan kullalla. Elektronimikroskoopilla otetaan mikrovalokuva. Kaksi riippumatonta tarkkailijaa tutki näytteiden tiivisteiden tunkeutumisen dentiinitubuluksiin kahdella tasolla - 2 ja 5 mm:n päässä juuren kärjestä. Luotettavuus tarkistetaan. Otettiin mikrovalokuvat, jotka osoittavat suurimman tunkeutumisen kullakin tasolla. Pisteiden etäisyys mitattiin sealer-dentiini-rajapinnasta ja tunkeutumissyvyys laskettiin.

Yhteisvaikutukset natriumhypokloriitin kanssa:

Saostuman muodostumisen arvioimiseksi käytetään liuoksia, joissa on 17 % EDTA, S.mukorossi ja 3 % NaOCl. Jokainen pyöreäpohjainen polystyreeniputki (Falcon; Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA) täytetään 2 ml:lla S. mukorossi -uutetta ja 17 % EDTA:ta. Putki 3 täytetään seoksella, jossa on 1 ml S. mukorossia ja 1 ml 3 % NaOCl. Putki 4 täytettiin 17 % EDTA:lla NaoCl:lla. Jätetty 95 % kosteuteen 37 ºC:een 1 viikon ajan. Puolueeton tarkkailija tarkkaili jokaista putkea sakan muodostumisen varalta 15 minuutin välein ensimmäisen 2 tunnin ajan ja 24 tunnin välein 1 viikon ajan. Virheiden välttämiseksi tämä toimenpide toistetaan 3 kertaa