Спиртовой экстракт Sapindus Mukorrossi в качестве окончательного эндодонтического ирриганта.

Приготовление спиртового экстракта S.mukorossi:

Высушенные плоды Sapindus mukorossi будут использоваться для приготовления экспериментального ирриганта для корневых каналов. Сухие околоплодники s. mukorossi (≈ 1,0 кг), присутствующая вокруг семенного ореха, отделяется острым лезвием. Эти околоплодники будут смешиваться для получения мелких частиц в стерилизованном домашнем блендере (блендер-соковыжималка Enviro 3 в 1 ENJ301). Полученный 10-граммовый порошок замачивают в 100 мл абсолютного этанола (99%) на 24 часа при нормальной комнатной температуре. Этот растворитель будет отфильтрован и удален с помощью роторного испарителя, а экстракт будет храниться в очищенных флаконах с завинчивающейся крышкой (Premium Vials B4702-12 Glass with Screw Cap) при -20ºC до использования. Для формирования рабочей концентрации 5 мг/мл экстракт повторно растворяют в дистиллированной воде.

Все образцы были подготовлены одним оператором с использованием следующего протокола. После удаления зуб хранили в 0,1% тимоле. До дальнейшего использования. Образцы были случайным образом разделены на 3 группы с помощью компьютерного программного обеспечения. В каждой группе будет по 30 зубов.

Вскрытие камеры выполняли круглым алмазным бором № 4, в каждый корневой канал вводили К-файл № 10 (Maillefer/Dentsply) до тех пор, пока он не стал виден за пределами апикального отверстия. Рабочая длина определяется путем уменьшения этой длины на 1 мм. Был выполнен один оператор с использованием файлов типа K (Maillefer/Dentsply), а не с помощью универсальной системы ProTaper (Dentsply-Maillefer) до F2. Промывание проводилось при каждой смене файла 2,5 мл 3% NaOCl (канасол). После обработки группу образцов 1 промывали 3 мл 17% ЭДТА и оставляли в канале на 1 минуту. Группа 2 будет промыта раствором Sapindus mukorossi, и, наконец, все группы будут промыты 5 мл 0,9% физиологического раствора. Окончательное промывание контрольной группы проводили 0,9% физиологическим раствором.

После этого образец высушивали стерильными абсорбирующими бумажными штифтами F2, и в качестве эталонного конуса выбирали гуттаперчевый конус F2. Силер Sealapex (Sybron-Endo, Глендора, Калифорния, США) был замешан в соответствии с инструкциями производителя и помещен в канал с помощью файла 25# k.

• Мастерконе вставляли до рабочей длины и оценивали обратное усилие.
• Нанесение герметика выполняли способом, описанным выше.
• GP был введен на рабочую длину после того, как апикальные 2 мм мастер-штифта были равномерно покрыты силером.
• Расширители пальцев № 25 и № 20 (MANI, Япония) были помещены в канал, чтобы освободить место для аксессуара GP.
• Процесс повторялся до тех пор, пока расширитель №20 не смог войти в коронковую треть канала.
• Избыток GP был сожжен с помощью горячего конденсатора, а коронарный GP был вертикально уплотнен для получения хорошего коронкового уплотнения.
• Полость доступа была закрыта пломбировочным материалом GIC (3M, ESPE). Все образцы хранились в инкубаторе (binder GmbH, Германия) при 37°C и 100% влажности в течение 1 недели, чтобы герметик полностью затвердел.

3.10.1 Подготовка образца для стереомикроскопического анализа проникновения красителя. После извлечения образцов из инкубатора им давали высохнуть на воздухе в течение 10 минут. Все образцы экспериментальной группы были покрыты двумя слоями цветного лака для ногтей, кроме апикальных 2 мм верхушки корня.

После полного высыхания лака для ногтей корни вертикально помещали в 1% краситель метиленового синего (WellcoSol, TM) на 72 часа.

Через 3 дня образцы промывали в течение 5 минут под проточной водопроводной водой и оставляли для полного высыхания на воздухе. Чтобы избежать попадания красителя на внутреннюю поверхность корня во время срезов, лак для ногтей и краску соскабливали с образцов скальпелем и хирургическим лезвием № 15 (Bisturi Ucu, Турция). Зуб разрезали пополам продольно, параллельно его длинной оси. Для обеспечения того, чтобы срез был выполнен через центр корня и для предотвращения повреждения пространства обтурированного канала, в центре щечной и язычной поверхности корня были сделаны продольные бороздки глубиной 2 мм с помощью алмазного диска в низкоскоростном наконечнике ( Nakanishi Inc (NSK), Япония), с осторожностью, чтобы не проникнуть в пространство канала. Затем зубы были сломаны в продольном направлении с помощью двухконусного долота и киянки, сохраняя все пространство для обтурации.

Затем образцы просматривали под стереомикроскопом (Olympus VM-ILA-2) в лаборатории биоинформатики и молекулярной медицины (DRIBBS, DUHS) при 30-кратном увеличении. Изображения были захвачены и загружены в программное обеспечение IMAGE J (Национальный институт здравоохранения, США). Образцы исследовали два слепых наблюдателя (эндодонтиста). Исследователь определил апикальное микроподтекание путем измерения линейной глубины проникновения красителя, которая определяется как максимальное расстояние проникновения красителя от верхушки корня до коронковой части. В перформансе все размеры измерялись в миллиметрах (мм).

Для пенетрантности дентинных канальцев:

Другую половину зуба оставляли сушиться на 24 часа в 40-100% этиловом спирте. Затем образец устанавливается на металлические штифты и покрывается золотым напылением. Под электронным микроскопом будет сделана микрофотография. Образцы исследовались на проникновение силеров в дентинные канальцы на двух уровнях - 2 и 5 мм от верхушки корня двумя независимыми наблюдателями. Были сделаны микрофотографии, показывающие максимальное проникновение на каждом уровне. Расстояние между точками измеряли от границы между силером и дентином и рассчитывали глубину проникновения.

При взаимодействии с гипохлоритом натрия:

Для оценки образования осадка будут использоваться растворы 17 % ЭДТА, S. mukorossi и 3 % NaOCl. Каждая полистироловая пробирка с круглым дном (Falcon; Thermo Fischer Scientific, Waltham, MA) заполняется 2 мл экстракта S. mukorossi и 17% ЭДТА соответственно. Пробирку 3 заполняют смесью 1 мл S.mukorossi и 1 мл 3% NaOCl. Трубка 4 была заполнена 17% ЭДТА с NaoCl. Оставили при влажности 95% при 37ºC на 1 неделю. Беспристрастный наблюдатель осматривал каждую пробирку на предмет образования осадка через каждые 15 минут в течение первых 2 часов и с 24-часовыми интервалами в течение 1 недели. Чтобы избежать ошибок, эта процедура повторяется 3 раза.