Le projet JOIN : L'air dans le diagnostic et la prévention de l'asthme et des allergies (JOIN)

Objectifs:

Le projet JOIN combine les domaines de recherche sur la santé et l'environnement intérieur pour contribuer au développement et à la validation d'une nouvelle méthode de diagnostic de l'asthme par l'analyse des COV expirés. Cette méthode est plus sensible, plus spécifique et totalement non invasive. De plus, le projet JOIN évaluera l'impact de l'exposition à l'environnement intérieur, à savoir les perturbateurs endocriniens, sur le développement de l'asthme et des allergies chez les enfants. Les objectifs spécifiques du projet sont :

1. Classer les enfants asthmatiques et les témoins sains à l'aide des profils de COV expirés ;
2. Classer les phénotypes d'asthme à l'aide des profils de COV expirés ;
3. Évaluer l'influence d'une exposition prolongée à des COV exogènes sur les échantillons d'haleine expirée ;
4. Caractériser l'exposition intérieure en mesurant les concentrations d'un ensemble de produits chimiques identifiés comme perturbateurs endocriniens dans l'air intérieur et la poussière des habitations ;
5. Évaluer l'association entre l'exposition aux perturbateurs endocriniens à l'intérieur et les résultats pour la santé des enfants axés sur l'asthme/les allergies, ainsi qu'avec l'exacerbation des allergies et des symptômes respiratoires chez ceux qui sont déjà sensibilisés ;
6. Enquêter sur les matériaux de construction et les produits de consommation susceptibles de contribuer le plus à l'exposition des enfants ;
7. Évaluer l'association entre l'exposition intérieure aux perturbateurs endocriniens et la fonction pulmonaire, l'inflammation et la réactivité des voies respiratoires, et les biomarqueurs expirés et urinaires de la maladie.

La réalisation de ce projet pourrait contribuer à la validation d'une nouvelle méthode de diagnostic de l'asthme en passe d'être introduite dans un contexte clinique réel.

L'audit de la qualité de l'air intérieur permettra de mieux comprendre le processus d'exposition aux perturbateurs endocriniens et les effets sur la santé, principalement chez les enfants. Le projet évaluera et comparera également les perturbateurs endocriniens dans l'air intérieur et chez les enfants, résultant de l'exposition.

Plan de travail:

1. Sélection et recrutement de la population étudiée

   Dans ce projet, 75 enfants âgés de 6 à 18 ans devraient être recrutés (avec le consentement de leur tuteur légal) lors de visites cliniques au service d'immunoallergologie de l'hôpital S. João. Tous les participants seront informés des objectifs et des procédures du projet et seront invités à signer un formulaire de consentement éclairé. Les données recueillies seront confidentielles et les participants auront le droit de faire retirer leurs données de l'étude à tout moment.

   En accord avec les tuteurs légaux, les visites au domicile des participants seront programmées. Lors des visites, des échantillons d'EBC et d'urine seront prélevés, ainsi que l'air expiré (non condensé).

2. Enquête par questionnaire Un questionnaire standardisé auto-administré, basé sur l'étude internationale sur l'asthme et les allergies de l'enfant (ISAAC), complété par les parents/tuteurs légaux à domicile, sera réalisé. Des informations socio-démographiques et économiques, les habitudes de consommation de tabac et d'alcool, l'utilisation de produits de soins personnels, les antécédents familiaux de maladies et les habitudes alimentaires seront collectées. Une série de questions sur la santé respiratoire/allergique de l'enfant, les symptômes/diagnostics actuels (au cours des 3 derniers mois) seront également incluses. Simultanément, les caractéristiques des facteurs d'environnement intérieur, tels que le type d'habitation, l'âge du bâtiment, le type de revêtement de sol, la ventilation, seront identifiées.

3. Évaluation clinique et collecte d'échantillons biologiques Les enfants fréquentant le centre hospitalier S. João pour une évaluation clinique en immunoallergologie seront invités à participer à cette étude. Après acceptation, les données de la spirométrie, de l'oxyde nitrique expiré fractionné (FeNO) et des tests cutanés seront extraites du dossier clinique des participants. Immédiatement après l'évaluation clinique, le condensat expiré (EBC) sera recueilli auprès des enfants en respirant 10 à 15 minutes dans un système de condensation d'air expiré (TurboDECCS portable). Les échantillons EBC seront stockés à -80°C jusqu'à l'analyse en laboratoire.

   Lors de l'audit de la qualité de l'air intérieur dans les foyers pour enfants, des échantillons EBC supplémentaires seront collectés (pour comprendre s'il y avait des différences significatives par rapport aux échantillons obtenus à l'hôpital), ainsi que l'air expiré (non condensé). L'air expiré sera recueilli à l'aide de sacs Tedlar® de 1 L (SKC Inc. USA) préalablement nettoyé avec 3 rinçages à l'azote selon les instructions du fabricant. Les sacs respiratoires servent uniquement à stocker et à transporter l'air et sont un produit déjà développé et approuvé. Il sera demandé aux participants de ne pas ingérer de nourriture ou de boissons aromatisées dans les 2h précédant le prélèvement d'haleine. On demandera aux enfants de se nettoyer la bouche avec de l'eau, d'inspirer, de retenir leur respiration pendant 5 secondes et ensuite d'expirer profondément dans le sac Tedlar.

   Des échantillons d'urine seront prélevés sur les enfants en deux temps. Le 1er moment sera le jour suivant l'évaluation clinique au centre hospitalier S. João et le 2ème moment sera le jour de l'audit de la qualité de l'air intérieur. Il sera préalablement remis à chaque participant un conteneur de prélèvement d'échantillons en polypropylène commercial pour obtenir 6 -10 ml d'urine. Des échantillons d'urine seront prélevés à domicile tôt le matin après une période de jeûne d'au moins 8 heures pour mesurer les métabolites urinaires des perturbateurs endocriniens, tels que MBzP, MEP, MEHP. Après le prélèvement, les échantillons d'urine doivent être conservés à -20 °C et livrés le jour de l'audit de la qualité de l'air intérieur. Par la suite, les échantillons seront congelés à -20ºC jusqu'à l'analyse.

   Le diagnostic clinique de l'asthme (standard de référence) sera réalisé par 7 allergologues différents attribués au hasard à chaque patient.

4. Inspection et caractérisation du bâtiment Une liste de contrôle sera utilisée pour obtenir des informations concernant les sources intérieures possibles (produits de consommation et de nettoyage, mobilier, type de revêtement de sol), d'autres caractéristiques du bâtiment (par ex. l'âge, la ventilation, etc.), les rénovations récentes et les sources extérieures, les comportements des occupants et les informations sur la présence de matériaux spécifiques et l'utilisation des consommateurs seront également collectées.

5. Les perturbateurs endocriniens de l'audit de l'air intérieur seront mesurés dans l'air intérieur et la poussière, car l'air intérieur a été identifié comme une source importante d'exposition aux produits chimiques, tandis que la poussière domestique s'est avérée être une voie d'exposition importante. La poussière fournit également un enregistrement des produits chimiques qui ont été utilisés dans la maison historiquement puisque les processus de dégradation à l'intérieur sont généralement lents. Les produits chimiques ciblés pour l'analyse comprenaient les phtalates, le bisphénol A, les éthanolamines et les éthers de glycol. Ces composés ont été sélectionnés sur la base des preuves de perturbation endocrinienne, d'exacerbation de l'asthme, de présence attendue à l'intérieur et dans les produits de consommation, et de compatibilité avec les méthodes analytiques développées dans les études d'exposition domestique.

   Les échantillons d'air intérieur des perturbateurs endocriniens seront prélevés à l'aide de cartouches d'échantillonnage de pesticides personnelles URG (University Research Glassware ; chapel Hill, Nc), qui seront placées dans la chambre des enfants à environ la hauteur de respiration. A la fin de la période d'échantillonnage, les échantillonneurs URG seront stockés à -4°c avant expédition au laboratoire. Pour mesurer les EDC dans la poussière, des sacs d'aspirateurs domestiques seront utilisés. Des échantillons de poussière seront prélevés sur toutes les surfaces du sol de la chambre ainsi que sur la surface des objets, tels que les étagères, les placards, les cadres de porte, les cadres de fenêtre, les téléviseurs et les appareils audio et les ordinateurs personnels. La poussière de chaque sac sera tamisée avec un tamis métallique de 100 µm et stockée dans des bocaux en verre (pré-nettoyés avec de l'hexane) à -20°C jusqu'à ce qu'une analyse chimique soit effectuée.

   Les COV de l'air intérieur des chambres d'enfants seront recueillis par prélèvement actif, selon des procédures normalisées, en même temps que l'évaluation clinique afin d'évaluer l'influence des COV ambiants pertinents dans le test clinique. L'échantillonnage sera effectué à l'aide d'une pompe de contrôle de débit de 5 L (SKC Inc. USA) relié à un tube de sorption en acier inoxydable rempli de 200 mg de Tenax TA 60/80 (Supelco). Le prélèvement commencera en même temps que l'évaluation clinique et sera programmé pour se terminer au bout d'une heure, donnant un échantillon représentatif des COV de l'air intérieur au moment du prélèvement de l'air expiré. A la fin du prélèvement, les tubes seront scellés avec des bouchons hermétiques et transportés au laboratoire, où ils seront conservés à température ambiante jusqu'à l'analyse.

6. Analyses en laboratoire Les composés organiques volatils et les perturbateurs endocriniens seront analysés par nez électronique (Cyranose 320). Une analyse multivariée sera effectuée pour observer si les profils de COV des participants asthmatiques sont différents de ceux sans asthme. Les taux de classification, l'aire sous la courbe ROC, la sensibilité et la spécificité seront estimés pour les différents modèles.