Проект JOIN: воздух в диагностике и профилактике астмы и аллергии (JOIN)

Цели:

Проект JOIN объединяет области исследований здоровья и окружающей среды в помещении, чтобы внести свой вклад в разработку и проверку нового метода диагностики астмы с помощью анализа выдыхаемых летучих органических соединений. Этот метод является более чувствительным, более специфичным и полностью неинвазивным. Кроме того, в рамках проекта JOIN будет проведена оценка влияния воздействия внутренней среды, а именно эндокринных разрушителей, на развитие астмы и аллергии у детей. Конкретными целями проекта являются:

1. Классифицировать детей с астмой и здоровых детей, используя профили выдыхаемых летучих органических соединений;
2. Классифицировать фенотипы астмы, используя профили выдыхаемых летучих органических соединений;
3. Оценить влияние длительного воздействия экзогенных ЛОС на образцы выдыхаемого воздуха;
4. Охарактеризовать воздействие внутри помещений путем измерения концентраций ряда химических веществ, идентифицированных как EDC, в воздухе помещений и пыли в домах;
5. Оценить взаимосвязь между воздействием ЭДХ в помещении и последствиями для здоровья детей с акцентом на астму/аллергию, а также с обострением аллергии и респираторными симптомами у тех, кто уже сенсибилизирован;
6. Изучить, какие строительные материалы и потребительские товары могут в наибольшей степени способствовать воздействию на детей;
7. Оценить связь между воздействием EDC в помещении и функцией легких, воспалением дыхательных путей и реактивностью, а также биомаркерами заболевания в выдыхаемом воздухе и моче.

Завершение этого проекта может способствовать валидации нового метода диагностики астмы, который скоро будет внедрен в реальный клинический контекст.

Аудит качества воздуха в помещении позволит лучше понять процесс воздействия эндокринных разрушителей и последствия для здоровья, в основном у детей. В рамках проекта также будут оцениваться и сравниваться EDC в воздухе помещений и у детей в результате воздействия.

План работы:

1. Отбор и набор исследуемой популяции

   Ожидается, что в рамках этого проекта 75 детей в возрасте от 6 до 18 лет будут привлечены (с согласия их законных опекунов) во время клинических посещений в отделении иммуноаллергологии больницы Сан-Жуан. Все участники будут проинформированы о целях и процедурах проекта, и им будет предложено подписать форму информированного согласия. Собранные данные будут конфиденциальными, и участники будут иметь право удалить свои данные из исследования в любое время.

   По согласованию с законными опекунами будут запланированы посещения участников на дому. Во время посещений будут собираться образцы КЭВ и мочи, а также выдыхаемый воздух (неконденсированный).

2. Анкетный опрос Будет проведена стандартизированная анкета для самостоятельного заполнения, основанная на Международном исследовании астмы и аллергии у детей (ISAAC), заполняемая родителями/законными опекунами дома. Будет собираться социально-демографическая и экономическая информация, привычки к курению и употреблению алкоголя, использование средств личной гигиены, семейный анамнез заболеваний и диетические привычки. Также будет включен набор вопросов о респираторном/аллергическом здоровье ребенка, текущих симптомах/диагнозе (за последние 3 месяца). Одновременно будут выявлены особенности факторов внутренней среды, таких как тип жилья, возраст здания, тип напольного покрытия, вентиляция.

3. Клиническая оценка и сбор биологических образцов Дети, посещающие больничный центр S. João для клинической оценки иммуноаллергологии, будут приглашены для участия в этом исследовании. После принятия данные спирометрии, фракционного выдыхаемого оксида азота (FeNO) и кожных прик-тестов будут извлечены из истории болезни участников. Сразу после клинической оценки конденсат выдыхаемого воздуха (КВВ) будет собираться у детей путем дыхания в течение 10–15 минут в систему конденсации выдыхаемого воздуха (портативную TurboDECCS). Образцы EBC будут храниться при температуре -80ºC до лабораторного анализа.

   При проведении аудита качества воздуха внутри помещений в детских домах будут браться дополнительные пробы ЭВС (чтобы понять, есть ли существенные отличия по сравнению с пробами, полученными в больнице), а также выдыхаемый воздух (неконденсированный). Выдыхаемый воздух будет собираться с помощью пакетов Tedlar® емкостью 1 л (SKC Inc. США), предварительно очищенных 3 промывками азотом в соответствии с инструкциями производителя. Дыхательные мешки служат исключительно для хранения и транспортировки воздуха и являются уже разработанным и одобренным продуктом. Участников попросят не принимать пищу или ароматизированные напитки за 2 часа до забора дыхания. Детям будет предложено очистить рот водой, вдохнуть, задержать дыхание на 5 секунд и затем глубоко выдохнуть в мешок Тедлара.

   Образцы мочи будут собраны у детей в два момента. 1-й момент будет на следующий день после клинической оценки в больничном центре Сан-Жуан, а 2-й момент будет на день проверки качества воздуха в помещении. Каждому участнику предварительно будут предоставлены коммерческие полипропиленовые контейнеры для сбора образцов для получения 6 -10 мл мочи. Образцы мочи будут собираться дома рано утром после периода голодания не менее 8 часов для измерения метаболитов EDC в моче, таких как MBzP, MEP, MEHP. После сбора образцы мочи должны храниться при температуре -20°C и доставляться в день проверки качества воздуха в помещении. Впоследствии образцы будут заморожены при температуре -20ºC до проведения анализа.

   Клинический диагноз астмы (эталонный стандарт) будет проводиться 7 разными аллергологами, случайным образом назначенными каждому пациенту.

4. Осмотр и характеристика здания Контрольный список будет использоваться для получения информации о возможных внутренних источниках (потребительские и чистящие средства, мебель, тип напольного покрытия), других характеристиках здания (например, возраст, вентиляция и т. д.), недавний ремонт и наружные источники, поведение жильцов и информация о наличии конкретных материалов и использовании потребителями также будут собираться.

5. Аудит воздуха в помещении Концентрации EDC будут измеряться в воздухе и пыли в помещении, поскольку воздух в помещении был определен как важный источник химического воздействия, а домашняя пыль оказалась важным путем воздействия. Пыль также представляет собой список химических веществ, которые исторически использовались в быту, поскольку процессы разложения в помещении, как правило, медленные. Химические вещества, предназначенные для анализа, включали фталаты, бисфенол А, этаноламины и гликолевые эфиры. Эти соединения были выбраны на основании данных о нарушении работы эндокринной системы, обострении астмы, ожидаемом присутствии в помещении и в потребительских товарах, а также на совместимости с аналитическими методами, разработанными в исследованиях воздействия на домохозяйства.

   Пробы воздуха в помещении EDC будут собираться с использованием индивидуальных картриджей для отбора проб пестицидов URG (университетская исследовательская посуда; часовня, Хилл, Северная Каролина), которые будут размещены в детской спальне примерно на высоте дыхания. В конце периода отбора проб пробоотборники URG будут храниться при температуре -4°C до отправки в лабораторию. Для измерения содержания ЭДХ в пыли будут использоваться мешки для бытовых пылесосов. Образцы пыли будут собираться со всех поверхностей пола спальни, а также с поверхности предметов, таких как полки, шкафы, дверные рамы, оконные рамы, телевизоры, аудиосистемы и персональные компьютеры. Пыль из каждого мешка будет просеиваться через металлическое сито с размером ячеек 100 мкм и храниться в стеклянных банках (предварительно очищенных гексаном) при температуре -20°C до проведения химического анализа.

   ЛОС внутреннего воздуха в детских спальнях будут собираться путем активного отбора проб в соответствии со стандартными процедурами одновременно с клинической оценкой, чтобы оценить влияние соответствующих ЛОС окружающей среды на клиническое испытание. Отбор проб будет производиться с помощью 5-литрового насоса для регулирования расхода (SKC Inc. США), соединенный с сорбционной трубкой из нержавеющей стали, заполненной 200 мг Tenax TA 60/80 (Supelco). Отбор проб начнется одновременно с клинической оценкой и будет запрограммирован на завершение через один час, что даст репрезентативную пробу ЛОС в воздухе помещения во время сбора выдыхаемого воздуха. По окончании отбора проб пробирки закрывают воздухонепроницаемыми крышками и транспортируют в лабораторию, где они будут храниться при комнатной температуре до проведения анализа.

6. Лабораторный анализ Летучие органические соединения и EDC будут проанализированы с помощью электронного носа (Cyranose 320). Будет проведен многофакторный анализ, чтобы выяснить, отличаются ли профили ЛОС участников с астмой от участников без астмы. Для различных моделей будут оцениваться показатели классификации, площадь под ROC-кривой, чувствительность и специфичность.