Biomarqueurs dans le diagnostic des allergies alimentaires (APSIS)

Arrière-plan. Les allergies alimentaires sont un fardeau mondial provoquant des réactions cliniques graves, notamment une anaphylaxie mortelle. Les cacahuètes comptent parmi les éliciteurs les plus puissants impliqués dans les allergies alimentaires à médiation IgE. L'allergie à l'arachide est un modèle de maladie pertinent en raison de sa prévalence en constante augmentation et de son mauvais pronostic d'excroissance. Les phénotypes cliniques des patients allergiques aux arachides sont très variables. Les patients peuvent présenter des symptômes médicaux variables (organes, gravité, retard), les seuils et les niveaux de réactivité croisée le suggèrent. Il manque un biomarqueur in vitro fiable permettant de prédire la réactivité clinique et de classer les patients en endotypes de réaction.

Les allergènes d'arachide les plus importants ont été étudiés quant à leurs propriétés biomoléculaires, leurs activités biologiques et leur pouvoir allergène. On pense que la stabilité prononcée des protéines des allergènes puissants de l'arachide contribue à l'allergénicité des molécules. Lors de l'ingestion, les protéines alimentaires sont décomposées et pénètrent dans le corps humain via les surfaces épithéliales. L'identité et le sort des peptides allergènes immunologiquement actifs après absorption épithéliale restent insaisissables. Au-delà, des cascades immunitaires complexes se produisent lors d'épisodes allergiques aigus. La manière dont les cellules immunitaires, telles que les lymphocytes, s'orchestrent chez les patients présentant différents résultats cliniques (par exemple, sensibilité, gravité) reste à résoudre. Plusieurs études ont montré que la composition et la diversité du microbiote intestinal sont pertinentes pour façonner la réponse immunitaire aux protéines alimentaires. L'interaction fonctionnelle entre l'hôte et le microbiome intestinal, dans le contexte du développement des symptômes et des variations phénotypiques, est inexplorée jusqu'à aujourd'hui.

Objectifs. Ce projet vise à explorer des biomarqueurs putatifs à différents niveaux, au niveau des profils IgE, au niveau de l'absorption des allergènes, au niveau de la réactivité basophile notée, au niveau des phénotypes immunitaires et au niveau des interactions microbiome intestinal-hôte. , en appliquant plusieurs technologies omiques.

Les partenaires. Le Luxembourg Institute of Health (LIH), Department of Infection and Immunity (DII; chef Prof. M. Ollert) a le chef de projet scientifique (Principal Investigator Dr. A. Kuehn). Les principaux partenaires cliniques sont le Dr F. Codreanu-Morel de l'Unité nationale d'immunologie-allergologie, Centre Hospitalier (CHL), Luxembourg, ainsi que le Pr C. Bindslev-Jensen du Centre de recherche sur l'anaphylaxie d'Odense (ORCA), Danemark. Le partenaire pour l'exécution de la partie clinique sera le Centre d'investigation clinique et épidémiologique (CIEC, LIH) dirigé par le Dr M. Gantenbein. La Biobanque Intégrée du Luxembourg (IBBL) préparera et conservera les échantillons cliniques jusqu'à leur utilisation. Des échantillons cliniques (sang, sérums, plasma) seront analysés au DII, LIH. Des échantillons de selles seront étudiés avec l'aide du Prof. P. Wilmes du groupe de recherche sur l'écologie des systèmes, Luxembourg Centre for Systems Biomedicine (LCSB).

La mise en œuvre du projet. Les défis alimentaires (OFC) à l'arachide seront effectués conformément aux directives officielles (Académie européenne d'allergie et d'immunologie clinique, EAACI). Les témoins sains (N = 10) seront divisés, la moitié recevra une dose alimentaire unique allant jusqu'à 100 g d'arachides grillées (OFC ouvert) et l'autre moitié sera testée avec jusqu'à 5 doses incrémentielles (contrôle par placebo en double aveugle OFC) en utilisant les mêmes doses que pour les patients allergiques. Pour l'OFC à dose unique, des échantillons de sang des témoins seront prélevés avant l'OFC et à 30 minutes, à 60 minutes et à 120 minutes. Les témoins recevant 5 doses incrémentielles d'allergènes seront soumis à un prélèvement sanguin avant le début de l'OFC et 1 h après la fin du challenge. En tant que bras de contrôle supplémentaire dans l'étude, des aliments allergènes d'origine animale seront utilisés dans l'OFC. D'autres témoins sains (N = 10) recevront soit une dose alimentaire unique allant jusqu'à 200 g de poisson cuit (OFC ouvert) et l'autre moitié sera testée avec jusqu'à 5 doses incrémentielles (OFC en double aveugle contrôlé par placebo). Des doses comprises entre 10 mg et 100 g de poisson seront sélectionnées pour l'OFC en aveugle avec témoins.

Les participants allergiques (N = 30) ingéreront des doses supplémentaires d'arachides. Les doses d'OFC seront comprises entre 5 mg, 15 mg, 60 mg, 120 mg, 200 mg, 390 mg, 790 mg, 1 580 mg, 3 160 mg et 5 530 mg d'arachide grillée. Un maximum de cinq doses sera sélectionné parmi les gammes de doses d'arachides mentionnées ci-dessus. Dès l'observation de symptômes allergiques, l'OFC sera arrêté. Si aucun symptôme allergique n'est apparu lors d'un challenge alimentaire avec cinq doses incrémentielles, le patient sera invité à participer à une deuxième provocation orale (min. 14 jours plus tard) afin de subir un test avec des doses d'allergènes plus élevées. Des échantillons de sang de participants allergiques à l'étude seront prélevés avant, pendant et après l'OFC (0, 60, 150, 180 minutes).

Des échantillons de selles de participants allergiques aux arachides (n = 30) et de témoins sains (n ​​= 20) seront prélevés au plus tôt 2 mois après le défi alimentaire. Avant l'échantillonnage, les participants ne doivent pas avoir utilisé d'antibiotiques au cours du dernier mois, ou avoir des symptômes gastro-intestinaux récents/en cours (= diarrhée ; échelle de Bristol 5-7) au moment de la collecte des selles. Les participants recevront un kit de prélèvement à domicile, contenant des tubes de prélèvement spéciaux, des gants et des instructions. De plus, les patients sont invités à enregistrer leur prise alimentaire au cours des dernières 24 heures avant le prélèvement.

Les échantillons cliniques collectés seront pseudonymisés dans les centres cliniques. Une liste de synonymes, faisant partie du dossier de l'investigateur, contenant les informations sur l'identité des participants et le pseudonyme correspondant, sera disponible au centre clinique uniquement (médecins investigateurs) et au CIEC. Les données personnelles sont protégées au titre du règlement (UE) 2016/679 du 27 avril 2016 relatif à la protection des personnes physiques à l'égard du traitement des données à caractère personnel (RGPD) et de la loi du 1er août 2018 portant organisation de la Commission Nationale de la Protection des Données et la loi générale sur la protection des données.