Biomarkers bij de diagnose van voedselallergieën (APSIS)

Achtergrond. Voedselallergieën zijn een wereldwijde last die ernstige klinische reacties veroorzaakt, waaronder fatale anafylaxie. Pinda's worden gerekend tot de krachtigste veroorzakers van IgE-gemedieerde voedselallergieën. Pinda-allergie is een relevant ziektemodel vanwege de gestaag toenemende prevalentie en slechte prognose van uitgroei. Klinische fenotypes van pinda-allergische patiënten zijn zeer variabel. Patiënten kunnen variabele medische symptomen ervaren (organen, ernst, vertraging), drempel- en kruisreactiviteitsniveaus suggereren. Betrouwbare in-vitro biomarker die het mogelijk maakt klinische reactiviteit te voorspellen en de patiënten te scoren in reactie-endotypes ontbreken.

De belangrijkste pinda-allergenen zijn onderzocht op hun biomoleculaire eigenschappen, biologische activiteiten en allergene potentie. Aangenomen wordt dat de uitgesproken eiwitstabiliteit van krachtige pinda-allergenen bijdraagt ​​aan de allergeniciteit van de moleculen. Bij inname worden voedseleiwitten afgebroken en komen via epitheeloppervlakken het menselijk lichaam binnen. De identiteit en het lot van immunologisch actieve allergeenpeptiden na epitheliale absorptie blijft ongrijpbaar. Daarnaast vinden complexe immuuncascades plaats tijdens acute allergische episodes. Hoe immuuncellen, zoals lymfocyten, orkestreren bij patiënten met verschillende klinische uitkomsten (bijv. Gevoeligheid, ernst) moet nog worden opgelost. Verschillende onderzoeken hebben aangetoond dat de samenstelling en de diversiteit van de darmmicrobiota relevant is voor het vormgeven van de immuunrespons op voedingseiwitten. De functionele interactie tussen gastheer- en darmmicrobioom, in de context van symptoomontwikkeling en fenotypische variaties, is tot op heden onontgonnen.

Doelstellingen. Dit project heeft tot doel vermeende biomarkers op verschillende niveaus te onderzoeken, op het niveau van IgE-profielen, op het niveau van allergeenabsorptie, op het niveau van gescoorde basofiele reactiviteit, op het niveau van immuunfenotypes en op het niveau van darmmicrobioom-gastheer-interacties. , door meerdere omics-technologieën toe te passen.

Partners. Het Luxembourg Institute of Health (LIH), Department of Infection and Immunity (DII; hoofd Prof. M. Ollert) heeft de wetenschappelijke projectleider (Principal Investigator Dr. A. Kuehn). De belangrijkste klinische partners zijn Dr. F. Codreanu-Morel van de National Unit of Immunology-Allergology, Centre Hospitalier (CHL), Luxemburg, evenals Prof. C. Bindslev-Jensen van Odense Research Centre for Anaphylaxis (ORCA), Denemarken. Partner voor de uitvoering van het klinische deel wordt het Clinical and Epidemiological Investigation Centre (CIEC, LIH) onder leiding van Dr. M. Gantenbein. De Integrated Biobank of Luxembourg (IBBL) bereidt klinische monsters voor en bewaart deze tot gebruik. Klinische monsters (bloed, sera, plasma) zullen worden geanalyseerd bij DII, LIH. Ontlastingsmonsters zullen worden onderzocht met de hulp van prof. P. Wilmes van de onderzoeksgroep Systems Ecology, Luxembourg Centre for Systems Biomedicine (LCSB).

Projectuitvoering. Voedseluitdagingen (OFC) voor pinda's worden uitgevoerd volgens de officiële richtlijnen (European Academy of Allergy and Clinical Immunology, EAACI). Gezonde controles (N=10) worden gesplitst, de helft krijgt een enkele voedseldosis van maximaal 100 g geroosterde pinda's (open OFC) en de andere helft wordt getest met maximaal 5 oplopende doses (dubbelblinde, placebogecontroleerde OFC) met dezelfde doses als voor allergische patiënten. Voor OFC met een enkele dosis worden bloedmonsters van controles genomen vóór de OFC en na 30 minuten, na 60 minuten en na 120 minuten. Controles die 5 oplopende allergeendoses krijgen, zullen worden onderworpen aan bloedafname vóór het begin van de OFC en 1 uur na het einde van de provocatie. Als verdere controlearm in het onderzoek zal allergeen voedsel van dierlijke oorsprong worden gebruikt in OFC. Verdere gezonde controles (N=10) krijgen een enkelvoudige voedseldosis van maximaal 200 g gekookte vis (open OFC) en de andere helft wordt getest met maximaal 5 oplopende doses (dubbelblinde, placebogecontroleerde OFC). Doses in een bereik van 10 mg tot 100 g vis zullen worden geselecteerd voor de geblindeerde OFC met controles.

Allergische deelnemers (N=30) zullen incrementele doses pinda's binnenkrijgen. De OFC-doses liggen in het bereik van 5 mg, 15 mg, 60 mg, 120 mg, 200 mg, 390 mg, 790 mg, 1.580 mg, 3.160 mg en 5.530 mg geroosterde pinda. Er zullen maximaal vijf doses worden gekozen uit de bovengenoemde bereiken van pinda-doses. Bij observatie van allergische symptomen wordt de OFC stopgezet. Als er geen allergische symptomen optreden tijdens een voedselprovocatie met vijf oplopende doses, wordt de patiënt gevraagd deel te nemen aan een tweede orale provocatie (min. 14 dagen later) om een ​​test met hogere allergeendoses te ondergaan. Voor, tijdens en na OFC (0, 60, 150, 180 minuten) zullen bloedmonsters worden afgenomen van allergische studiedeelnemers.

Ontlastingsmonsters van deelnemers die allergisch zijn voor pinda's (n=30) en gezonde controles (n=20) zullen op zijn vroegst 2 maanden na de voedselprovocatie worden verzameld. Voorafgaande bemonstering, deelnemers mogen de afgelopen maand geen antibiotica hebben gebruikt, of recente / aanhoudende gastro-intestinale symptomen (= diarree; Bristol-schaal 5-7) hebben op het moment van ontlasting. Deelnemers krijgen thuis een verzamelkit met daarin speciale monsterbuisjes, handschoenen en instructies. Bovendien wordt patiënten gevraagd om hun voedselinname van de laatste 24 uur vóór de bemonstering te registreren.

Verzamelde klinische monsters worden gepseudonimiseerd in de klinische centra. Een synoniemenlijst, als onderdeel van het dossier van de onderzoeker, met de informatie over de identiteit van de deelnemers en het bijbehorende pseudoniem, zal alleen beschikbaar zijn in het klinisch centrum (medische onderzoekers) en bij CIEC. Persoonsgegevens worden beschermd door de verordening (EU) 2016/679 van 27 april 2016 betreffende de bescherming van natuurlijke personen in verband met de verwerking van persoonsgegevens (AVG) en de wet van 1 augustus 2018 betreffende de organisatie van de Nationale Commissie voor gegevensbescherming en de Algemene Verordening Gegevensbescherming.