Biomarkører i fødevareallergidiagnose (APSIS)

Baggrund. Fødevareallergier er en global byrde, der forårsager alvorlige kliniske reaktioner, herunder fatal anafylaksi. Jordnødder regnes blandt de mest potente elicitorer involveret i IgE-medierede fødevareallergier. Jordnøddeallergi er en relevant sygdomsmodel på grund af dens støt stigende forekomst og dårlige prognose for udvækst. Kliniske fænotyper hos peanut-allergiske patienter er meget varierende. Patienter kan opleve forskellige medicinske symptomer (organer, sværhedsgrad, forsinkelse), tærskel- og krydsreaktivitetsniveauer tyder på. Pålidelig in vitro biomarkør, der gør det muligt at forudsige klinisk reaktivitet og score patienterne i reaktionsendotyper, mangler.

De vigtigste jordnøddeallergener er blevet undersøgt med hensyn til deres biomolekylære egenskaber, biologiske aktiviteter og allergifremkaldende styrke. Den udtalte proteinstabilitet af potente jordnøddeallergener menes at bidrage til molekylernes allergenicitet. Ved indtagelse nedbrydes fødevareproteiner og kommer ind i menneskekroppen via epiteloverflader. Identiteten og skæbnen for immunologisk aktive allergenpeptider efter epitelabsorption forbliver uhåndgribelig. Ud over dette finder komplekse immunkaskader sted under akutte allergiske episoder. Hvordan immunceller, såsom lymfocytter, orkestrerer i patienter med forskellige kliniske resultater (f.eks. følsomhed, sværhedsgrad) mangler stadig at blive løst. Adskillige undersøgelser har vist, at sammensætningen og mangfoldigheden af ​​tarmmikrobiotaen er relevant for at forme immunresponset på fødevareproteiner. Den funktionelle interaktion mellem vært og tarmmikrobiom, i sammenhæng med symptomudvikling og fænotypiske variationer, er uudforsket indtil i dag.

Mål. Dette projekt har til formål at udforske formodede biomarkører på forskellige niveauer, på niveauet af IgE-profiler, på niveauet af allergenabsorption, på niveauet for scoret basofil reaktivitet, på niveauet af immunfænotyper og på niveauet af tarmmikrobiom-vært-interaktioner , ved at anvende flere omics-teknologier.

Partnere. Luxembourg Institute of Health (LIH), Institut for Infektion og Immunitet (DII; leder Prof. M. Ollert) har den videnskabelige projektleder (Principal Investigator Dr. A. Kuehn). Vigtigste kliniske partnere er Dr. F. Codreanu-Morel fra National Unit of Immunology-Allergology, Centre Hospitalier (CHL), Luxembourg, samt prof. C. Bindslev-Jensen fra Odense Forskningscenter for Anafylaksi (ORCA), Danmark. Partner for udførelsen af ​​den kliniske del vil være Clinical and Epidemiological Investigation Center (CIEC, LIH) ledet af Dr. M. Gantenbein. Den integrerede biobank i Luxembourg (IBBL) vil forberede og opbevare kliniske prøver indtil brug. Kliniske prøver (blod, sera, plasma) vil blive analyseret på DII, LIH. Afføringsprøver vil blive undersøgt med hjælp fra prof. P. Wilmes fra forskergruppen Systems Ecology, Luxembourg Centre for Systems Biomedicine (LCSB).

Projektgennemførelse. Fødevareudfordringer (OFC) til jordnødder vil blive forløbet i overensstemmelse med officielle retningslinjer (European Academy of Allergy and Clinical Immunology, EAACI). Sunde kontroller (N=10) vil blive opdelt, halvdelen vil modtage en enkelt maddosis på op til 100 g ristede jordnødder (åben OFC), og den anden halvdel vil blive testet med op til 5 trinvise doser (dobbeltblind placebokontrolleret OFC) med samme doser som til allergiske patienter. For enkeltdosis OFC tages blodprøver fra kontroller før OFC og efter 30 minutter, efter 60 minutter og efter 120 minutter. Kontroller, der modtager 5 trinvise allergendoser, vil blive udsat for blodprøver før begyndelsen af ​​OFC og 1 time efter afslutningen af ​​challengen. Som en yderligere kontrolarm i undersøgelsen vil allergifremkaldende fødevarer af animalsk oprindelse blive brugt i OFC. Yderligere sunde kontroller (N=10) vil modtage enten en enkelt maddosis på op til 200 g tilberedt fisk (åben OFC), og den anden halvdel vil blive testet med op til 5 trinvise doser (dobbeltblind placebokontrolleret OFC). Doser i intervallet 10 mg til 100 g fisk vil blive udvalgt til den blindede OFC med kontroller.

Allergiske deltagere (N=30) vil indtage trinvise doser af jordnødder. OFC-doserne vil være i intervallet 5 mg, 15 mg, 60 mg, 120 mg, 200 mg, 390 mg, 790 mg, 1.580 mg, 3.160 mg og 5.530 mg ristede jordnødder. Maksimalt fem doser vil blive valgt fra de ovennævnte områder af jordnøddedoser. Ved observation af allergiske symptomer vil OFC blive stoppet. Hvis der ikke opstod allergiske symptomer under en fødevareudfordring med fem trinvise doser, vil patienten blive bedt om at deltage i en anden oral provokation (min. 14 dage senere) for at gennemgå en test med højere allergendoser. Blodprøver fra allergiske undersøgelsesdeltagere vil blive udtaget før, under og efter OFC (0, 60, 150, 180 minutter).

Afføringsprøver fra peanut-allergiske deltagere (n=30) og sunde kontroller (n=20) vil tidligst blive indsamlet 2 måneder efter fødevareudfordringen. Forud for prøveudtagning bør deltagerne ikke have brugt antibiotika inden for den sidste måned, eller have nylige/igangværende gastrointestinale symptomer (= diarré; Bristol skala 5-7) på tidspunktet for afføringsafhentning. Deltagerne vil modtage et indsamlingssæt derhjemme, indeholdende specielle prøverør, handsker og instruktioner. Derudover bliver patienter bedt om at registrere deres fødeindtag de sidste 24 timer før prøvetagning.

Indsamlede kliniske prøver vil blive pseudonymiseret på de kliniske centre. En synonymliste, som en del af investigator-filen, indeholdende oplysninger om deltagernes identitet og det tilsvarende pseudonym, vil kun være tilgængelig på det kliniske center (medicinske efterforskere) og hos CIEC. Personoplysninger er beskyttet i henhold til forordning (EU) 2016/679 af 27. april 2016 om beskyttelse af personer i forbindelse med behandling af personoplysninger (GDPR) og lov af 1. august 2018 om organisationen af ​​Den Nationale Databeskyttelseskommission og den almindelige databeskyttelseslov.