Биомаркеры в диагностике пищевой аллергии (APSIS)

Фон. Пищевая аллергия является глобальным бременем, вызывающим тяжелые клинические реакции, включая фатальную анафилаксию. Арахис считается одним из самых мощных возбудителей пищевой аллергии, опосредованной IgE. Аллергия на арахис является подходящей моделью заболевания из-за ее неуклонно растущей распространенности и плохого прогноза развития. Клинические фенотипы пациентов с аллергией на арахис сильно различаются. Пациенты могут испытывать различные медицинские симптомы (органы, тяжесть, задержка), предполагают пороговые и перекрестные уровни реактивности. Отсутствует надежный биомаркер in vitro, позволяющий прогнозировать клиническую реактивность и классифицировать пациентов по эндотипам реакции.

Наиболее важные аллергены арахиса были изучены в отношении их биомолекулярных свойств, биологической активности и аллергенной активности. Считается, что выраженная белковая стабильность сильных аллергенов арахиса способствует аллергенности молекул. При попадании в организм пищевые белки расщепляются, попадая в организм человека через эпителиальные поверхности. Идентичность и судьба иммунологически активных пептидов аллергенов после эпителиальной абсорбции остаются неясными. Помимо этого, сложные иммунные каскады имеют место во время острых аллергических эпизодов. Как иммунные клетки, такие как лимфоциты, действуют у пациентов с различными клиническими исходами (например, чувствительностью, тяжестью), еще предстоит решить. Несколько исследований показали, что состав и разнообразие кишечной микробиоты имеют значение для формирования иммунного ответа на пищевые белки. Функциональное взаимодействие между микробиомом хозяина и кишечника в контексте развития симптомов и фенотипических вариаций до сих пор не изучено.

Цели. Этот проект направлен на изучение предполагаемых биомаркеров на различных уровнях, на уровне IgE-профилей, на уровне абсорбции аллергена, на уровне оцениваемой реактивности базофилов, на уровне иммунных фенотипов и на уровне взаимодействия микробиома кишечника с хозяином. , применяя несколько технологий omics.

Партнеры. Люксембургский институт здравоохранения (LIH), отделение инфекций и иммунитета (DII; руководитель проф. М. Оллерт), руководит научным проектом (главный исследователь д-р А. Кюн). Основными клиническими партнерами являются д-р Ф. Кодряну-Морель из Национального отделения иммунологии-аллергологии Госпиталя (CHL), Люксембург, а также проф. К. Биндслев-Йенсен из Исследовательского центра анафилаксии в Оденсе (ORCA), Дания. Партнером по выполнению клинической части станет Центр клинико-эпидемиологических исследований (CIEC, LIH) во главе с доктором М. Гантенбейном. Интегрированный биобанк Люксембурга (IBBL) подготовит и сохранит клинические образцы до их использования. Клинические образцы (кровь, сыворотка, плазма) будут проанализированы в DII, LIH. Образцы стула будут исследованы с помощью профессора П. Уилмеса из исследовательской группы системной экологии Люксембургского центра системной биомедицины (LCSB).

Реализация проекта. Пищевая нагрузка (OFC) на арахис будет проводиться в соответствии с официальными рекомендациями (Европейская академия аллергии и клинической иммунологии, EAACI). Здоровые контроли (N = 10) будут разделены, половина получит разовую дозу пищи до 100 г жареного арахиса (открытый OFC), а другая половина будет протестирована с введением до 5 дополнительных доз (двойное слепое плацебо-контролируемое исследование). OFC) в тех же дозах, что и для пациентов с аллергией. Для однократной дозы OFC образцы крови у контролей будут взяты перед OFC и через 30 минут, через 60 минут и через 120 минут. Контрольная группа, получившая 5 дополнительных доз аллергена, будет подвергнута забору крови перед началом OFC и через 1 час после окончания контрольного заражения. В качестве дополнительной контрольной группы в исследовании при OFC будут использоваться аллергенные продукты животного происхождения. Дальнейшие здоровые контроли (N = 10) получат либо одну пищевую дозу до 200 г приготовленной рыбы (открытый OFC), а другая половина будет протестирована с введением до 5 дополнительных доз (двойное слепое плацебо-контролируемое OFC). Дозы в диапазоне от 10 мг до 100 г рыбы будут выбраны для слепого OFC с контролем.

Участники с аллергией (N = 30) будут принимать дополнительные дозы арахиса. Дозы OFC будут находиться в диапазоне 5 мг, 15 мг, 60 мг, 120 мг, 200 мг, 390 мг, 790 мг, 1580 мг, 3160 мг и 5530 мг жареного арахиса. Максимум пять доз будут выбраны из вышеупомянутых диапазонов доз арахиса. При появлении аллергических симптомов введение ОФК будет прекращено. Если во время пищевой провокации с пятью дополнительными дозами аллергические симптомы не возникали, пациента попросят принять участие во второй оральной провокации (мин. через 14 дней) для того, чтобы пройти тест с более высокими дозами аллергена. Образцы крови у участников аллергического исследования будут взяты до, во время и после OFC (0, 60, 150, 180 минут).

Образцы стула у участников с аллергией на арахис (n = 30) и у здоровых людей (n = 20) будут собираться не ранее, чем через 2 месяца после пищевой провокации. Перед отбором проб участники не должны были принимать антибиотики в течение последнего месяца или иметь недавние/продолжающиеся желудочно-кишечные симптомы (= диарея; Бристольская шкала 5-7) во время сбора стула. Участники получат дома комплект для сбора, содержащий специальные пробирки для отбора проб, перчатки и инструкции. Кроме того, пациентов просят записывать потребление пищи за последние 24 часа до отбора проб.

Собранные клинические образцы будут анонимизированы в клинических центрах. Список синонимов, как часть файла исследователя, содержащий информацию о личности участников и соответствующем псевдониме, будет доступен только в клиническом центре (медицинские исследователи) и в CIEC. Персональные данные защищены в соответствии с Регламентом (ЕС) 2016/679 от 27 апреля 2016 г. о защите физических лиц при обработке персональных данных (GDPR) и законом от 1 августа 2018 г. об организации Национальной комиссии по защите данных и Общий закон о защите данных.