Récupération musculaire après supplémentation en oméga-3

Question de recherche : La supplémentation avec de fortes doses d'oméga-3 pendant huit semaines réduit-elle les dommages musculaires induits par une séance d'exercice excentrique de haute intensité chez les jeunes hommes ? La réponse à l'exercice excentrique est-elle liée à une augmentation des oxylipines dérivées des acides gras oméga-3 ? Hypothèse : Une supplémentation à long terme (8 semaines) avec de fortes doses d'oméga-3 (3 g/j) augmentera la concentration d'oxylipines dans le sang, ce qui sera associé à moins de dommages musculaires après un protocole d'exercice excentrique chez les jeunes hommes.

Objectif général : Déterminer l'effet de huit semaines de supplémentation en acides gras oméga-3 à forte dose sur les niveaux d'oxylipines sanguines et les marqueurs indirects de dommages musculaires après un exercice excentrique de haute intensité chez les jeunes hommes.

Objectifs spécifiques

1. Déterminer l'effet de huit semaines de supplémentation en acides gras oméga-3 à forte dose sur les niveaux d'oxylipines sanguines après un exercice excentrique de haute intensité chez les jeunes hommes.
2. Déterminer l'effet de huit semaines de supplémentation en acides gras oméga-3 à forte dose sur la fonction musculaire et les marqueurs de dommages musculaires après un exercice excentrique de haute intensité chez les jeunes hommes.
3. Associer les niveaux d'oxylipines sanguines aux changements de fonction musculaire et aux marqueurs de dommages musculaires induits par une séance d'exercice excentrique, avant et après une supplémentation en acides gras oméga-3 à forte dose chez les jeunes hommes.

Méthodologie : Cette étude est de conception expérimentale, prospective et en double aveugle. Taille de l'échantillon : Le calcul de la taille d'échantillon établit un minimum de 12 sujets par groupe sur la base d'un niveau α de 0,05 et d'une puissance (1-β) de 0,8, en supposant une différence estimée de perte de force maximale de 22 % après un exercice excentrique (taille d'effet = 1,06) entre les groupes oméga-3 et témoin, sur la base d'une étude précédente (1). Cependant, 15 participants seront recrutés par groupe pour tenir compte d'un taux d'abandon de 20 %.

Méthodologie : Trente jeunes hommes seront recrutés par le biais d'affiches et de publicités sur les réseaux sociaux. Les participants seront répartis au hasard de manière double aveugle en deux groupes de supplémentation : (a) placebo (maltodextrine jaune) ou (b) oméga-3 (EPA et DHA). Avant le début de la période de supplémentation, les participants subiront un prélèvement sanguin veineux, des tests de marqueurs indirects de dommages musculaires, un test de consommation d'oxygène et le protocole d'exercice excentrique sur une jambe (6 séries de 10 répétitions à 80 % de 1 répétition maximale). Immédiatement après, 1, 2, 24, 48, 72 et 96 heures après la séance d'exercice excentrique, les dommages musculaires seront évalués et des échantillons de sang veineux seront obtenus. Le lendemain, les participants commenceront leur protocole de supplémentation de 8 semaines avec oméga-3 ou placebo. Après la période de supplémentation, les participants effectueront les mêmes tests qu'au début et réaliseront la séance d'exercice excentrique sur la jambe opposée.

Critères d'exclusion : Les participants ne doivent pas avoir pratiqué d'entraînement en force régulier pendant les 6 mois précédant le début de l'étude. Les participants ne doivent pas non plus prendre de médicaments affectant l'inflammation ou les réponses cardiovasculaires à l'exercice et doivent avoir un IMC inférieur à 30 kg/m². Enfin, les participants ne doivent pas consommer de poisson plus de deux fois par semaine et ne doivent pas avoir pris de suppléments d'oméga-3 pendant les trois mois précédant l'étude ou être allergiques au poisson. Il sera demandé aux participants d'être vaccinés contre le Covid-19. Les participants seront pleinement informés de la nature et des risques possibles des procédures expérimentales avant de donner leur consentement éclairé écrit approuvé par le Comité d'éthique.

Supplémentation : Les participants recevront 5 capsules par jour (5 g/j) d'Omega Up OMEGA 3 (2,5 g/j de DHA et 0,5 g/j d'EPA) ou un placebo. La dose utilisée est conforme à la recommandation de l'EFSA (Autorité européenne de sécurité des aliments), s'est avérée sûre, incorporée dans les membranes cellulaires et produit des améliorations significatives de la santé globale (2,3).

Protocole d'exercice excentrique : Le protocole d'exercice excentrique consistera en 6 séries de 10 répétitions de presse à cuisses à 45° réalisées à 80 % de 1RM uniquement dans leur phase excentrique, avec 90 secondes de repos entre les séries effectuées sur une jambe (4). La phase concentrique du mouvement sera réalisée par l'un des chercheurs.

Enquêtes : Deux enquêtes seront menées, la première sur la fréquence de consommation alimentaire, axée sur la quantification de l'apport moyen en acides gras oméga-3 provenant de l'alimentation. Deuxièmement, le questionnaire IPAQ validé sera utilisé pour quantifier l'activité physique des participants (5).

Test de consommation d'oxygène : Les participants effectueront un test progressif sur un ergocycle (Lifecycle 9500HR ; LifeFitness, Rosemont, IL, États-Unis). Les valeurs de puissance maximale et de VO2pic seront obtenues. Le test débutera par 4 minutes à 50 W et augmentera de 25 W chaque minute jusqu'à épuisement (6).

Force isométrique maximale (MVC) : La MVC des extenseurs du genou des deux jambes sera mesurée à 90° de flexion du genou sur une chaise à quadriceps équipée d'une cellule de charge (Reverse S, États-Unis). À partir de cette évaluation, le taux de développement de la force (RFD) sera calculé comme un marqueur plus sensible de la raideur et de la fonction musculaires.

Douleur musculaire : La douleur à la cuisse en position assise et en se levant d'une chaise 3 fois sera évaluée à l'aide d'une échelle visuelle analogique (100 cm), où 0 correspond à aucune douleur et 100 à une douleur maximale.

Circonférence de la cuisse : La jambe exercée sera mesurée dans la zone médiane. Les mesures seront prises trois fois par le même examinateur, et la moyenne de ces trois mesures sera utilisée pour l'analyse statistique. Un mètre ruban non extensible sera utilisé. (Lufkin Executive Thinline, Maryland, États-Unis)(7) Activité de la créatine kinase (CK) : 35uL seront extraits de l'échantillon de sang (ci-dessous) et analysés pour l'activité de la CK dans le sang (Reflotron, Roche).

Échantillons sanguins : Des échantillons de sang veineux seront obtenus et immédiatement centrifugés pour obtenir le plasma (1000 g pendant 10 minutes à 4°C) et la fraction érythrocytaire (3000 × g pendant 10 minutes à 20°C). Les deux fractions seront congelées à -80°C.

Composition en acides gras phospholipidiques (analyse des acides gras dans le sang et GR) : L'extraction quantitative des lipides totaux des érythrocytes et du plasma sera effectuée selon Bligh et Dyer (8) avec l'ajout de BHT. Les esters méthyliques d'acides gras (FAME) des érythrocytes et du plasma seront préparés selon Morrison et Smith (9). Les FAME seront extraits avec 0,5 mL d'hexane. Les FAME seront identifiés et quantifiés par chromatographie gaz-liquide sur équipement Agilent (modèle 7890B, Santa Clara, CA, États-Unis) équipé d'une colonne capillaire (Agilent HP-88, 100 m × 0,250 mm ; ID 0,25 μm) et d'un détecteur à ionisation de flamme (FID). L'identification et la quantification des FAME seront réalisées en comparant les temps de rétention et les valeurs de pourcentage de surface de pic des échantillons inconnus avec ceux du standard lipidique commercial (Nu-Chek Prep Inc., Elysian, MN, États-Unis). Le C23:0 sera utilisé comme standard interne (Nu-Chek Prep Inc., Elysian, MN, États-Unis). Les données seront traitées à l'aide du système logiciel Hewlett-Packard Chemstation.

Analyse des médiateurs lipidiques plasmatiques SPM : Les échantillons de plasma (400 μL) seront analysés en double pour les oxylipines par HPLC/MS/MS comme décrit précédemment (10). Brièvement, des standards internes deutérés (Cayman Chemicals) seront ajoutés aux échantillons de plasma et ajustés à un pH <3,0 avant l'extraction en phase solide en utilisant des colonnes Strata-X-SPE (Phenomenex) préconditionnées avec du méthanol, suivies d'eau à pH 3,0. Les échantillons seront chargés sur les colonnes, lavés, et les SPM libres seront élués avec du méthanol à 100 %. L'éluat sera ensuite séché et remis en suspension dans le solvant A (eau/acétonitrile/acide formique, 70/30/0,02 v/v/v) pour l'analyse des oxylipines par HPLC/MS/MS, en utilisant une colonne Luna 5-μm C18 (100 Å, 250 × 2,0 mm, Phenomenex) sur un HPLC Shimadzu Nexera XR, couplé à un MS ABSciex QTRAP 6500 fonctionnant en mode négatif avec ionisation par électrospray. Les oxylipines seront éluées avec le gradient suivant : 100 % de solvant A entre 0 et 1 min, puis le solvant B (acétonitrile/isopropyl alcool, 50/50, v/v) est augmenté linéairement à 25 % à 3 min, 45 % à 11 min, 60 % à 13 min, 75 % à 18 min et 90 % à 18,5 min. Le solvant B est ensuite maintenu à 90 % jusqu'à 20 min, réduit à 0 % à 21 min et maintenu jusqu'à 25 min. Les oxylipines seront quantifiées en utilisant la méthode de dilution par isotope stable.

Analyse statistique : Les résultats seront exprimés en moyenne ± écart type. Les différences seront évaluées à l'aide d'une analyse de variance (ANOVA) à deux facteurs avec test post hoc de Fisher (LSD) pour les comparaisons multiples entre les groupes et les temps d'évaluation. Une valeur p <0,05 sera considérée comme statistiquement significative.