Disponibilité Métabolique de la Méthionine dans les Chips de Tempeh Chez les Femmes en Âge de Procréer Utilisant la Méthode d'Oxydation des Acides Aminés Indicateurs (OAAI) (IAAO)

Pour l'évaluation pré-étude, les participants devront mesurer leur poids corporel, leur taille et leur dépense énergétique au repos (DER) en utilisant la calorimétrie indirecte.

Le protocole d'étude est un protocole expérimental de 3 jours comprenant 2 jours d'adaptation et 1 jour d'étude d'oxydation des acides aminés indicateurs (IAAO). Pour chaque protocole expérimental de 3 jours, les participants recevront soit un régime de référence pendant 3 jours, soit un régime au tempeh pendant 3 jours. Pour commencer un autre protocole expérimental de 3 jours pour le même participant, un intervalle d'au moins 1 semaine sera nécessaire pour assurer l'élimination complète du traceur.

Pendant chaque période d'adaptation, chaque participant recevra 4 repas égaux par jour (petit-déjeuner, déjeuner, dîner et collation) qui répondent à 100 % de ses besoins énergétiques et protéiques quotidiens (Besoin énergétique = Dépense énergétique au repos (DER) × 1,7 ; Besoin protéique = 1,0 g/kg/jour × poids corporel). Les repas fournis comprendront une formule sans protéines (requise), des biscuits au caramel sans protéines (requis), un mélange d'acides aminés cristallins, ou une combinaison du mélange d'acides aminés cristallins avec des chips de tempeh. Les repas doivent être terminés par les participants dans les 15 minutes. Un supplément quotidien de multivitamines et un supplément de choline de 500 mg seront également fournis. En plus de l'eau plate, seule une tasse de thé ou de café sans sucre ni crème est autorisée pendant les jours d'adaptation.

Pendant la période d'étude IAAO, après un jeûne nocturne de 12 heures, les participants se rendront au laboratoire métabolique du Kolej Tun Syed Nasir (KTSN) pendant 8 heures. Un total de 9 repas horaires isonitrogènes et isocaloriques seront fournis, chaque repas contribuant à 1/10 du besoin énergétique total (DER × 1,5) et du besoin protéique (1,0 g/kg/jour). Les repas consisteront en une formule sans protéines (requise), des biscuits au caramel sans protéines (requis), et soit un mélange d'acides aminés cristallins, soit une combinaison du mélange d'acides aminés cristallins avec des chips de tempeh. Chaque repas doit être consommé dans les 15 minutes. Les repas totaux fournis répondront à 90 % des besoins énergétiques et protéiques des participants. Pendant la journée expérimentale, un supplément quotidien de multivitamines et 500 mg de choline seront également fournis.

Pendant les premier à quatrième repas, les participants devront uniquement consommer les repas fournis. À partir du cinquième repas, les participants recevront une incorporation isotopique orale constante. La phénylalanine, un acide aminé indispensable dont le métabolisme final produit du dioxyde de carbone, sera utilisée comme traceur pour mesurer l'oxydation. De plus, du NaH13CO3 (bicarbonate de sodium-¹³C) sera administré comme dose d'amorçage pour permettre au 13CO2 (dioxyde de carbone marqué au carbone-13) dans l'haleine d'atteindre un plateau en 2-3 heures. Une dose de 0,176 mg/kg de NaH13CO3 et 0,66 mg/kg de L-[1-¹³C]phénylalanine sera donnée comme isotope d'amorçage pendant le cinquième repas. Du cinquième repas jusqu'au dernier repas, 1,2 mg/kg de L-[1-¹³C]phénylalanine seront fournis en continu. La quantité de phénylalanine fournie comme traceur (à l'exclusion de l'isotope d'amorçage) sera soustraite de l'apport alimentaire pour maintenir un apport total en phénylalanine de 30 mg/kg/jour. Un total de 40 mg/kg/jour (160 % du besoin total en acides aminés aromatiques) de tyrosine sera également fourni pour garantir qu'aucune phénylalanine marquée n'est hydroxylée pour répondre au besoin en tyrosine. Après le cinquième repas, le taux de production de dioxyde de carbone expiré (VCO2) sera mesuré par calorimétrie indirecte pendant 15 minutes.

Pour la collecte des échantillons d'haleine, des échantillons seront collectés toutes les 15 minutes avant que le protocole de traceur ne soit initié (c'est-à-dire avant le cinquième repas) et toutes les 15 minutes après que l'état d'équilibre isotopique est atteint (environ 2,5 heures après l'administration de l'isotope) jusqu'à la fin de l'étude. Des échantillons d'haleine supplémentaires seront collectés 30 minutes après la fin de l'étude. Chaque échantillon d'haleine sera collecté en triple à l'aide de tubes de 10 mL non revêtus de silicone. L'enrichissement en 13CO2 dans l'haleine sera analysé à l'aide d'un spectromètre de masse à rapport isotopique à flux continu et exprimé en pourcentage atomique en excès (PAE) par rapport à la ligne de base. La fraction de 13CO2 (F13CO2) provenant de l'oxydation de la L-[1-¹³C]phénylalanine par rapport à la quantité administrée sera calculée.

En utilisant un modèle de régression à effets mixtes linéaires, les pentes de réponse IAAO de référence et de test seront générées à partir des mesures de F13CO2 et de leurs apports en méthionine correspondants, avec une origine commune de la réponse F13CO2 à l'apport de base en méthionine. La disponibilité métabolique (DM) de la méthionine dans la protéine test sera déterminée par la méthode du rapport des pentes en utilisant l'équation suivante :

DM (%) = (Protéine test / Protéine de référence) × 100.