Gén-gyakorlat kölcsönhatások sportolókban (GE-EX)

Szlovén sportolók (n = 300; 18-40 év) regionális vagy országos versenyszintűek az állóképesség-orientált és az erő-orientált sportágakból kerülnek toborzásra. A versenysportban tapasztalattal nem rendelkező egészséges, rokon egyének szolgálnak kontrollként (n=200; 18-40 év). A kérdőív kitöltése után (sportolóknál: demográfiai adatokra, földrajzi származásra, sportági besorolásra, szakágra és történelemre, valamint az edzések gyakoriságára és mennyiségére terjed ki; kontrollcsoportnál: demográfiai adatok, a mindennapi élet földrajzi származási szokásai) genotipizálási elemzéseket végeznek. . A sportolók és a kontrollok genotípusát 30 jelölt génpolimorfizmusra határozzák meg, amelyek valószínűleg befolyásolják az állóképességi teljesítményt. A molekuláris genetikai elemzést a kapilláris teljes vérből vett DNS-mintákkal végezzük. A 30 génpolimorfizmus genotipizálását Real-Time PCR-rel végzik LightCycler® 96 Instrument (Roche) és KASP (Competitive Allele Specific PCR) genotipizálási technológián.

Ezenkívül 40, állóképességi genetikai variánssal rendelkező sportolót választanak ki, hogy részt vegyenek az akut gyakorlati vizsgálatban. Az alacsony és nagy intenzitású edzés akut hatásainak vizsgálata érdekében a keringő miokinek koncentrációját mérjük.

A sportolók erre az alcsoportjára három, egymástól 96 órás időközönként tervezett kísérleti alkalom kerül alkalmazásra, a nap azonos szakában, véletlenszerű sorrendben.

Az első ülésen az aerob erőt egy kerékpáros ergométeren (Velodyn, Racermate™, USA) végzett inkrementális teszttel határozzák meg a kimerültségig. Az oxigénfogyasztást (VO2) a Quark gázelemző rendszer (Quark, Cosmed, Rim, Olaszország) segítségével leheletenként határozzák meg. A másik két kísérleti alkalom során a beavatkozások kerékpározásból állnak, folyamatos 60 perces kerékpározással 50% PPO-val (alacsony intenzitás), és 8 x 5 perccel 80% PPO-val (között 1,5 perc 75 W-on) gyakorlatot (nagy intenzitású). .

A résztvevőket arra kérik, hogy tartsák be az előírt étrendet, kerüljék az alkoholfogyasztást és ne végezzenek semmilyen fizikai tevékenységet a kísérleti foglalkozásokat megelőző 24 órában. A kísérleti üléseket reggel 8 és 11 óra között végezzük véletlenszerű sorrendben, 96 órás időközönként.

Minden beavatkozás előtt az egyéneket 20 percig a laboratóriumban ülve, 22-24ºC közötti szobahőmérsékleten kell tartani. Ebben az időszakban nyugalmi vérmintákat vesznek. További két vérmintát vesznek, közvetlenül az edzés utáni beavatkozást és 2 órával az edzés után. A vénás vért EDTA-csövekbe gyűjtik, centrifugálják 2500-3000 g-vel 20 percig, és egy külön plazmát -80 °C-on tárolnak a további elemzéshez.

A biomarkerek mennyiségi meghatározása a MAGPIX® rendszer, a mágnesgyöngy-alapú többelemző panelek és a MILLIPLEX® Analyst 5.1 szoftver (MAGPIX®, Merck Millipore) segítségével történik. A miokin elemzéshez egy kereskedelmi forgalomban lévő HMYOMAG-56K készletet használnak.

A genotípus eloszlást és az allélgyakoriságot a sportolók két csoportja (állóképesség és erő) és a kontrollok között χ2 tesztek segítségével hasonlítják össze. Az állóképességi genotípus pontszám (EGS) lesz konstruálva. Először minden genotípust pontoznak az egyes polimorfizmusokon belül. Így 2, 1 és 0 genotípus pontszámot (GS) rendelünk minden egyes genotípushoz, amely elméletileg a legnagyobb, közepes vagy legalacsonyabb állóképességi fenotípusokhoz kapcsolódik. Másodszor, minden egyes genotípus GS-ét összeadjuk ∑(i=1)^nSNPi-vel. Harmadszor, az EGS-t 0-100 skálára transzformáljuk a könnyebb értelmezés érdekében, az alábbiak szerint: EGS=(100/2n)∑_(i=1)^nSNPi. A 100-as EGS egy „optimális” poligénprofilt jelent az állóképességi sportolók számára, vagyis azt, hogy minden GS 2. Ezzel szemben a 0-s EGS az állóképességi sportolók lehetséges „legrosszabb” profilját jelenti, azaz minden GS 0. A három vizsgálati csoportban kapott EGS átlagát számítjuk ki. Az állóképesség, az erősportolók és a nem sportolók (kontrollok) EGS-ét az egytényezős varianciaanalízissel (ANOVA) fogják összehasonlítani, és a csoportok közötti összehasonlításhoz Tukey post hoc tesztet használnak. ANOVA-t is végzünk, hogy összehasonlítsuk az EGS-t az elit és a nemzeti szintű sportolók között az állóképességi és erősportolók minden csoportján belül. Az adatok normalitása Shapiro-Wilk teszttel végzett feltáró elemzéssel igazolt. Kétirányú kevert ANOVA-t alkalmazunk az idő edzésenkénti (idő*menet) és az idő (idő) miokin plazmakoncentrációra gyakorolt ​​fő kölcsönhatási hatásainak ellenőrzésére. Statisztikailag szignifikáns hatások esetén a többszörös összehasonlításhoz post-hoc Tukey-tesztet kell alkalmazni. Minden értéket átlagban és szórással (SD) kell megadni. A <0,05 P értékek statisztikailag szignifikánsnak minősülnek. A Bonferroni-féle korrekciót többszörös tesztelésre úgy hajtják végre, hogy adott esetben megszorozzák a P értéket a tesztek számával. A statisztikai elemzéseket az SPSS program 21-es verziójával (Chicago, IL) végezzük.