Interações gene-exercício em atletas (GE-EX)

Atletas eslovenos (n = 300; 18-40 anos) de padrão competitivo regional ou nacional serão recrutados nas disciplinas esportivas de resistência e de força. Indivíduos saudáveis ​​sem parentesco e sem nenhuma experiência esportiva competitiva servirão como controles (n= 200; 18-40 anos). Após o preenchimento do questionário (para atletas: abrangendo dados demográficos, ancestralidade geográfica, classificação esportiva, disciplina e histórico, bem como frequência e volume de treinamento; para grupo controle: dados demográficos, ancestralidade geográfica, hábitos de vida diária), análises de genotipagem serão realizadas . Os atletas e controles serão genotipados para 30 polimorfismos de genes candidatos considerados prováveis ​​de influenciar o desempenho de resistência. A análise genética molecular será realizada com amostras de DNA obtidas do sangue total capilar. A genotipagem para polimorfismos de 30 genes será realizada por Real-Time PCR em LightCycler® 96 Instrument (Roche) e tecnologia de genotipagem KASP (Kompetitive Allele Specific PCR).

Além disso, 40 atletas com variante genética de resistência serão selecionados para participar do estudo de exercício agudo. Para investigar os efeitos agudos do exercício de baixa e alta intensidade será medida a concentração de miocinas circulantes.

Três sessões experimentais distintas agendadas com 96 h de intervalo, no mesmo horário do dia e em ordem aleatória serão aplicadas a este subgrupo de atletas.

Na primeira sessão, a potência aeróbia será determinada por meio de um teste incremental até a exaustão em cicloergômetro (Velodyn, Racermate™, EUA). O consumo de oxigênio (VO2) será determinado respiração a respiração usando um sistema de análise de gás Quark (Quark, Cosmed, Rim, Itália). As intervenções durante as outras duas sessões experimentais consistirão em exercício de ciclismo com 60 min de ciclismo contínuo a 50% PPO (baixa intensidade) e 8 x 5 min a 80% PPO (entre intervalos 1,5 min a 75 W) exercício (alta intensidade) .

Os participantes serão orientados a seguir o regime alimentar prescrito, evitar a ingestão de álcool e não realizar nenhuma atividade física nas 24 horas anteriores às sessões experimentais. As sessões experimentais serão realizadas das 8h às 11h, em ordem aleatória e agendadas com 96h de intervalo.

Antes de cada intervenção, os indivíduos permanecerão sentados no laboratório por um período de 20 minutos com temperatura ambiente entre 22-24ºC. Nesse período, serão coletadas amostras de sangue em repouso. Serão coletadas mais duas amostras de sangue, imediatamente pós-intervenção do exercício e 2h pós-exercício. Sangue venoso será coletado em tubos EDTA, centrifugado a 2500-3000g por 20 minutos, e um plasma separado será armazenado a -80°C para posterior análise.

A quantificação dos biomarcadores será feita utilizando o sistema MAGPIX®, painéis multianalitos baseados em esferas magnéticas e o software MILLIPLEX® Analyst 5.1 (MAGPIX®, Merck Millipore). Para a análise das miocinas será utilizado o kit comercial HMYOMAG-56K.

A distribuição genotípica e as frequências alélicas entre cada um dos dois grupos de atletas (resistência e potência) e controles serão comparadas por meio de testes de χ2. A pontuação do genótipo de resistência (EGS) será construída. Primeiramente, cada genótipo será pontuado dentro de cada polimorfismo. Assim, será atribuído um escore de genótipo (GS) de 2, 1 e 0 para cada genótipo individual teoricamente associado ao maior, médio ou menor potencial de fenótipos de resistência. Em segundo lugar, o GS de cada genótipo único será somado ∑(i=1)^nSNPi. Em terceiro lugar, o EGS será transformado em uma escala de 0-100 para facilitar a interpretação, como segue: EGS=(100/2n)∑_(i=1)^nSNPi. Um EGS de 100 representa um perfil poligênico 'ótimo' para atletas de resistência - isto é, todos os GS são 2. Em contrapartida, um EGS de 0 representa o 'pior' perfil possível para o atleta de endurance, ou seja, todos os GS são 0. Será calculada a média dos EGS obtidos nos três grupos de estudo. O EGS de atletas de resistência, potência e não atletas (controles) serão comparados com análise de variância (ANOVA) de uma via, e o teste post hoc de Tukey será usado para comparações entre grupos. Também realizaremos ANOVA para comparar o EGS entre atletas de elite e de nível nacional dentro de cada grupo de atletas de resistência e potência. A normalidade dos dados foi verificada por meio de análise exploratória por meio do teste de Shapiro-Wilk. ANOVA mista de duas vias será aplicada para verificar os principais efeitos de interação do tempo por sessão de exercício (tempo*sessão) e do tempo (tempo) sobre a concentração plasmática de miocinas. Para efeitos estatisticamente significativos, será adotado o teste post-hoc de Tukey para comparações múltiplas. Todos os valores serão expressos como média e desvio padrão (DP). Valores de p < 0,05 serão considerados estatisticamente significativos. A correção de Bonferroni para testes múltiplos será realizada multiplicando o valor de P pelo número de testes quando apropriado. As análises estatísticas serão realizadas no programa SPSS, versão 21 (Chicago, IL).