A bioaktív berberin felszívódása emberben

A berberint széles körben használják gyógynövényként, és számos egészségügyi előnnyel jár. Ezek a szakirodalomban jól dokumentáltak, beleértve a vér lipid- és glükózszintjének csökkentését, gyulladás- és daganatellenes hatásukat, a neurodegeneratív betegségek (Alzheimer-, Parkinson- és Huntington-kór) megelőzését és késleltetését, valamint az elhízás megelőzését. A berberin felszívódási aránya azonban nagyon alacsony. A kutatócsoport úgy véli, hogy a TPGS vagy Quillaja kivonat emulgeálószerként történő hozzáadása javítja a berberin felszívódását emberben.

A berberin biológiai hozzáférhetősége rendkívül alacsony. Az orálisan bevitt berberinnek csak 0,5%-a szívódik fel a vékonybélben, és körülbelül 0,36%-a kerülhet be a szisztémás keringésbe. A bevitt berberin körülbelül 56%-a nem szívódott fel, további 43,5%-a pedig a vékonybélben zajló anyagcsere következtében veszít el.

E-vitamin A TPGS (az E-vitamin vízben oldódó formája) az FDA által jóváhagyott élelmiszer-adalékanyag. Lehetséges, hogy fokozza a gyógyszerek és étrend-kiegészítők felszívódását. A TPGS a P-glikoproteinek hatékony inhibitora, amelyek számos gyógyszer, köztük a berberin csökkent felszívódási sebességéért felelősek. A TPGS potenciálisan biztonságos és hatékony adszorpciófokozó lehet a berberin és más bioaktív növényi anyagok számára.

A Quillaja kivonat egy természetes GRAS (általánosan biztonságosnak elismert) élelmiszer-minőségű felületaktív anyag/emulgeáló összetevő, amely szaponinokban és szapogeninekben gazdag. Chilében őshonos Quillaja Saponaria Molina fáról tisztítják. A Quillaja kivonat az FDA által az élelmiszerekben és italokban való használatra engedélyezett összetevő a 21 CFR 172.51 cím alatt. Az Európai Unióban E 999 kóddal engedélyezett élelmiszer-adalékanyag. A Quillaja kivonat egy vonzó alternatív emulgeálószer a berberin készítményhez, mert kielégíti a fogyasztók természetes összetevők iránti igényét. A Quillaja kivonat további gyulladáscsökkentő és koleszterinszint-csökkentő előnyöket biztosít az étrend-kiegészítők számára. Néhány korai, 2000 előtti tanulmány azt sugallta, hogy a Quillaja saponin DS-1 elősegíti az inzulin és az aminoglikozid antibiotikumok felszívódását a szemen és az orron keresztül, csökkentve az epiteliális gát permeabilitását. Nem ismert azonban, hogy a quillaja befolyásolja-e a berberin felszívódását in vivo vagy emberben.

Konkrét célok:

1. Annak megállapítására, hogy a TPGS vagy a Quillaja kivonat emulgeálása növeli-e az orálisan bevitt berberin biológiai hozzáférhetőségét emberi önkéntesekben a plazmakoncentráció idő görbéjének (AUC), csúcskoncentrációjának (Cmax) és eliminációs felezési idejének (T1/2) növelésével.
2. Annak megállapítása, hogy a TPGS vagy a Quillaja kivonat emulgeálása megváltoztatja-e az I. fázis metabolizmusát, a II. fázisú metabolizmust vagy a bélmikrobióta általi metabolizmust az orálisan lenyelt berberin esetében emberben

A kutatás hipotézise az, hogy a TPGS vagy Quillaja kivonat emulgeálása javítja az orálisan bevitt berberin biohasznosulását emberben azáltal, hogy megváltoztatja metabolizmusát és farmakokinetikai profilját.

A hirdetés szórólapok formájában történik. A nyomozók elérhetőségeit a szórólap tartalmazza. Minden résztvevő írásos és szóbeli tájékoztatást kap a vizsgálat természetes és lehetséges kockázatairól. A tájékoztatáson alapuló beleegyezési űrlapot a vizsgálat előtt 7 nappal a résztvevők megkapják, hogy egy privát szobában megkapják a hozzájárulásukat.

Szűrés, tolerálhatósági teszt és tájékoztatáson alapuló beleegyezés: Az alany két kapszulát vesz be a referencia berberin étrend-kiegészítőből 8 uncia szobahőmérsékletű vízzel, és az alany 4 órán keresztül éheztetett állapotban marad. A 4 órás időszak letelte után normál ebédet szolgálnak fel vízzel. Ha az alany hasmenést tapasztal a kiegészítés bevétele után, azonnal jelenteni kell az alapkutatónak, Dr. Wangnak vagy a vizsgálati koordinátornak. A tolerálhatósági teszt eredménye a hasmenés önértékelésén alapul. Tizenkét résztvevőt választanak ki, akiknek nincsenek hasmenéses tünetei. Kísérleti folyamat: A résztvevőknek azt tanácsoljuk, hogy kerüljék a berberint, az E-vitamint, a TPGS-t vagy a Quillaja kivonatot tartalmazó étrend-kiegészítőket és élelmiszereket, valamint a túlzott mennyiségű alkoholt a 7 napos futási időszak kezdetétől a program végéig. tanulmány.

A résztvevők három kezelést kapnak (A: TPGS emulgeált berberin vagy B:Quillaja kivonat emulgeált berberin lágyzselé és C: berberin referenciapor kemény héjú kapszulákban), randomizált keresztezési elrendezésben. Az A, B és C kezelés azonos mennyiségű berberint biztosít 800 mg-os dózisban.

Tizenkét egészséges alanyt véletlenszerűen három csoportba osztanak, mindegyik csoportban 4 fővel. Az alanyokat felkérik, hogy a kezdeti vizeletmintákat egy, a vizsgálati csoport által biztosított 8 unciás tartályba gyűjtsék a kiegészítés bevétele előtt, a többi vizeletmintát pedig egy másik tartályba gyűjtik a 12 órás kiegészítés után. Képzett és képesített phlebotomist bérelnek fel vérvételre. A résztvevők alkarjába egy elkapót ültetnek be vérvétel céljából. A kiindulási vérminta vétele után az A csoport négy résztvevője két kapszulát kap TPGS emulgeált berberint lágy zselében (2x400 mg), a B csoport négy alanya pedig négy kapszulát Quillaja kivonat emulgeált berberint (4x200 mg) lágy héjban. kapszula, a C csoport négy résztvevője pedig két kapszulát kap berberin referenciaport (2x400mg) kemény polcon. További vérmintákat vesznek 0,5, 1, 2, 3, 4, 6, 8 és 12 óra elteltével a berberin és a berberrubin plazmakoncentrációjának elemzéséhez. Ezenkívül a résztvevők az összes vizeletmintát egy gallon méretű műanyag tartályba gyűjtik a kezdeti adag beadása után 12 órával. Minden résztvevő 0,5 és 1 óra vérvétel között normál reggelit kap, sima bagelt krémsajttal. 4 óra vérvétel után az alanyok azonos étkezést kapnak ebédre. Közvetlenül a gyűjtés után a vérmintákat centrifugálják, és a plazmát -80 °C-on tárolják az elemzésig. A vizeletmintákat az elemzésig -80 °C-on tároljuk. Két 7 napos kimosási periódus után a folyamat megismétlődik úgy, hogy minden csoport átvált a másik kezelésre, azaz az A kezelést kapott csoport B vagy C kezelést kap, a B kezelést pedig A kezelést, ill. C, a C kezelést kapott csoport az A vagy B kezelést kapja.

A berberin és a dihidroberberin a vérben nem konjugált szabad formában létezik. A fő metabolit, a berberrubin szabad formában és II. fázisú metabolitokban létezik, beleértve a szulfátokat és a glükuronidot. A berberrubin minden formájának elemzése érdekében a plazma vagy a vizelet egy részét a Helix pomatia-ból származó β-glükuronidázzal kezelik a szulfát/glükuronidok hidrolizálása érdekében. A berberint és a berberrubint a plazmából vagy vizeletből extraháljuk enzimes kezeléssel vagy anélkül, oldószeres vagy szilárd fázisú extrakcióval. A vegyületek koncentrációját HPLC-ESI-MS/MS módszerrel határozzuk meg. A berberinekre, a szabad berberrubinra és a teljes berberrubinra farmakokinetikai paramétereket, például a plazmakoncentráció-időgörbe alatti területet (AUC), a csúcskoncentrációt (Cmax), a csúcskoncentrációnál eltelt időt (Tmax) és az eliminációs felezési időt (T1/2) számítják ki. . A relatív abszorpciót a számított AUC-k arányaként fejezzük ki.