Поглощение биоактивного берберина человеком

Берберин широко используется в качестве лекарственного средства на травах и обладает многими преимуществами для здоровья. Они хорошо документированы в литературе, в том числе снижают уровень липидов и глюкозы в крови, обладают противовоспалительной и противоопухолевой активностью, предотвращают и отсрочивают нейродегенеративные заболевания (болезни Альцгеймера, Паркинсона и Гентингтона) и предотвращают ожирение. Однако скорость усвоения берберина очень низкая. Исследовательская группа считает, что добавление TPGS или экстракта Quillaja в качестве эмульгатора улучшает усвоение берберина человеком.

Биодоступность берберина чрезвычайно низка. Только 0,5% перорально принятого берберина всасывается в тонком кишечнике и около 0,36% может попасть в системный кровоток. Около 56% принятого внутрь берберина не всасывается, а дополнительные 43,5% теряются из-за метаболизма в тонком кишечнике.

Витамин Е TPGS (водорастворимая форма витамина Е) является пищевой добавкой, одобренной FDA. Он может увеличить абсорбцию лекарств и пищевых добавок. TPGS является эффективным ингибитором P-гликопротеинов, ответственных за снижение скорости всасывания многих лекарств, включая берберин. TPGS потенциально может быть безопасным и эффективным усилителем адсорбции берберина и других биоактивных растительных компонентов.

Экстракт Quillaja является натуральным пищевым поверхностно-активным веществом / эмульгатором GRAS (обычно признанным безопасным), богатым сапонинами и сапогенинами. Его получают из дерева Quillaja Saponaria Molina, произрастающего в Чили. Экстракт Quillaja является одобренным FDA ингредиентом для использования в продуктах питания и напитках в соответствии с разделом 21 CFR 172.51. Это одобренная пищевая добавка в Европейском Союзе под кодом E 999. Экстракт Quillaja является привлекательной альтернативой эмульгаторам для берберина, потому что он удовлетворяет спрос потребителей на натуральный ингредиент. Экстракт Quillaja обеспечивает дополнительные противовоспалительные свойства и снижение уровня холестерина в пищевой добавке. Некоторые ранние исследования, проведенные до 2000 года, показали, что сапонин Quillaja DS-1 способствует абсорбции инсулина и аминогликозидных антибиотиков глазным и назальным путем за счет снижения проницаемости эпителиального барьера. Однако неизвестно, влияет ли quillaja на всасывание берберина in vivo или у человека.

Конкретные цели:

1. Определить, повышают ли TPGS или эмульгирование экстракта Quillaja биодоступность перорально принимаемого берберина у людей-добровольцев за счет увеличения кривой зависимости его концентрации в плазме от времени (AUC), пиковой концентрации (Cmax) и периода полувыведения (T1/2).
2. Определить, изменяет ли эмульгирование TPGS или экстракта Quillaja метаболизм фазы I, метаболизм фазы II или метаболизм кишечной микробиотой перорально принимаемого берберина у человека.

Гипотеза этого исследования заключается в том, что эмульгирование экстракта TPGS или Quillaja повышает биодоступность перорально принимаемого берберина у человека за счет изменения его метаболизма и фармакокинетических профилей.

Реклама будет в виде листовок. Контактная информация следователей будет включена в листовку. Все участники получат письменную и устную информацию о естественных и потенциальных рисках исследования. Форма информированного согласия будет предоставлена ​​участникам для получения согласия в отдельной комнате за 7 дней до исследования.

Скрининг, тест на переносимость и информированное согласие: Субъект примет две капсулы эталонной пищевой добавки берберина с 8 унциями воды комнатной температуры и будет оставаться натощак в течение 4 часов. После завершения 4-часового периода будет подан стандартный обед с водой. Если субъект испытывает диарею после приема добавки, он/она немедленно сообщает об этом главному исследователю, доктору Вангу или координатору исследования. Результат теста на переносимость будет основан на самооценке диареи. Будут выбраны двенадцать участников без симптомов диареи Процесс эксперимента: Участникам будет рекомендовано избегать добавок и пищевых продуктов с берберином, витамином Е TPGS или экстрактом Quillaja, чрезмерного количества алкоголя с начала 7-дневного периода до конца периода. учиться.

Участники получат три процедуры (A: берберин, эмульгированный TPGS, или B: мягкий гель, эмульгированный берберином, экстрактом Quillaja, и C: эталонный порошок берберина в капсулах с твердой оболочкой) с использованием рандомизированного перекрестного дизайна. Лечение A, B и C обеспечивает равное количество берберина в дозе 800 мг.

Двенадцать здоровых субъектов будут случайным образом разделены на три группы по 4 человека в каждой. Субъектам будет предложено собрать первоначальные образцы мочи в контейнер на 8 унций, предоставленный исследовательской группой, до приема добавки, а остальные образцы мочи будут собраны в другой контейнер после приема добавки в течение 12 часов. Для забора крови будет нанят обученный и сертифицированный флеботомист. Ловец будет имплантирован в предплечье участников для забора крови. После взятия базового образца крови четыре участника в группе A получат по две капсулы TPGS эмульгированного берберина в мягком геле (2x400 мг), а четыре участника в группе B получат четыре капсулы экстракта эмульгированного берберина Quillaja (4x200 мг) в мягкой оболочке. капсул, а четыре участника группы C получат по две капсулы эталонного порошка берберина (2x400 мг) на жесткой полке. Дополнительные образцы крови будут взяты через 0,5 часа, 1 час, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 6 часов, 8 часов и 12 часов для анализа концентрации берберина и берберрубина в плазме. Кроме того, участники будут собирать все образцы мочи в пластиковый контейнер объемом галлон в течение 12 часов после первоначальной дозы. Стандартный завтрак из простого рогалика со сливочным сыром будет предоставлен каждому участнику между 0,5 часа и 1 часом забора крови. После 4-часового забора крови испытуемым давали идентичную еду на обед. Сразу после сбора образцы крови будут центрифугированы, а плазма будет храниться при температуре -80°C до проведения анализа. Образцы мочи будут храниться при температуре -80 градусов по Цельсию до проведения анализа. После двух 7-дневных периодов вымывания процесс будет повторяться, и каждая группа будет переключаться на другое лечение, то есть группа, получившая лечение А, будет принимать лечение В или С, а группа, получившая лечение В, будет принимать лечение А или C, группа, получившая лечение C, будет получать лечение A или B.

Берберин и дигидроберберин в крови существуют в неконъюгированной свободной форме. Основной метаболит берберрубин существует в свободной форме и в виде метаболитов фазы II, включая сульфаты и глюкуронид. Для анализа берберрубина во всех формах часть плазмы или мочи обрабатывают β-глюкуронидазой из Helix pomatia для гидролиза его сульфата/глюкуронидов. Берберин и берберрубин будут экстрагированы из плазмы или мочи с обработкой ферментами или без нее с использованием растворителя или твердофазной экстракции. Концентрацию соединений определяют с использованием метода ВЭЖХ-ESI-MS/MS. Для берберинов, свободного берберрубина и общего берберрубина будут рассчитываться фармакокинетические параметры, такие как площадь под кривой зависимости концентрации в плазме от времени (AUC), максимальная концентрация (Cmax), время достижения максимальной концентрации (Tmax) и время полувыведения (T1/2). . Относительное всасывание будет выражаться как отношение рассчитанных AUC.