NUTRIPROTECT – A gyermekek táplálkozása mint védő vagy egészségügyi kockázati tényező (My-Milk-2)

A táplálkozás kockázati vagy védőfaktorként működhet egy sor nem fertőző betegség kialakulásában. Bár ezeket a hatásokat a teljes életciklusra megállapították, a korai életszakasz táplálkozása különösen fontos lehet a későbbi élet egészségére gyakorolt ​​hosszú távú hatása szempontjából. A reprezentatív mintapopuláció étrendi bevitelére és tápláltsági állapotára vonatkozó megbízható tudományos adatok alapul szolgálnak az emberi egészségre gyakorolt ​​szerep, a specifikus táplálkozási tényezők feltárásához. A tervezett aplikatív kutatási projekt tudományos háttere azon a tényen alapul, hogy a korai táplálkozás, a kezdeti bélmikrobióta és a gyermekek hosszabb távú fejlődése közötti kapcsolatot követő vizsgálatok korlátozottak. Ezért a legfontosabb tudományos kihívások a korai életkor táplálkozásának a részt vevő gyermekek növekedésére és egészségére gyakorolt ​​hatásaira összpontosulnak, valamint a különböző egészségjelzők közötti kapcsolat vizsgálatára.

Noha ennek a multidiszciplináris alkalmazói prospektív tanulmánynak a munkaprogramja a gyerekekre fog összpontosítani, szorosan kapcsolódnia kell a korábbi „My-Milk” projekthez (SRA J43606; 2013-ban fejeződött be), ahol a korai táplálkozás szerepe a táplálkozás fejlődésében. szoptatott gyermekeket és bélmikrobiótájukat vizsgálták az első életévben. Ezt a vizsgálatot az első „My-Milk” vizsgálatba bevont 6-7 éves korosztály körében végezzük. A vizsgálat jellemzi a résztvevő korai élete során a legfontosabb módosító tényezőket (az anyai változókon (terhesség előtti BMI, terhesség alatti súlygyarapodás, terhesség és szoptatás alatti táplálkozás, az anyatej zsírsavösszetétele és a szérum D-vitamin koncentrációja) és a csecsemőkori változókon keresztül. (szoptatási és antibiotikumos kezelések időtartama, széklet mikrobiota az első hónapban, antropometria és csontsűrűség az újszülött korban)) a résztvevő tápláltsági állapotáról 6-7 éves korban. Az aktuális tápláltsági állapotot a résztvevők táplálékbevitele, antropometriája, testösszetétele - csontsűrűség, zsír- és izomszövet százalékos aránya), egészségi állapota (vérnyomás, vérkoleszterin, fertőzések gyakorisága és súlyossága), valamint a széklet mikrobiotája határozza meg.

A részvételre felkért vizsgálati populációba azok az anyák egyedülálló gyermekei tartoznak, akik a My-Milk vizsgálat részletes részét a gyermek első életévében végezték (N=147). Figyelembe véve a My-Milk vizsgálat első részletes részében a nagyon alacsony lemorzsolódási arányt (185-ből 33 részt vevő anya, kb. 18 százalék), a kutatók arra számítanak, hogy a meghívottak legalább 70-75 százaléka válaszol, azaz 100-110 gyermeket vonhatnak be a vizsgálatba. Ez a népesség a 2011-ben született gyermekek 0,5 százalékát teszi ki (21947 gyermek – statisztikai adatok Szlovéniára vonatkozóan).

A következő paramétereket kell mérni és értékelni: a gyermekek táplálkozása az Európai Élelmiszerbiztonsági Hatóság (EFSA) iránymutatásában meghatározott, gyermekek és felnőttek/időskorú lakosság standard étrendi értékelési módszertanával. Az élelmiszer-fogyasztási felmérés ugyanis egyéni szinten, ismételt 24 órás étkezési naplóval és számítógépes személyes/telefonos interjú módszerrel (CAPI/CATI), valamint a PANCAKE szerinti Általános Kérdőív és Élelmiszerhajlam Kérdőív (FPQ) támogatásával történik. - Kísérleti tanulmány a gyermekek tápanyag-bevitelének és élelmiszer-fogyasztásának felmérésére Európában. A 24 órás strukturált étrend-felidéző ​​interjú egy kvantitatív kutatási módszer, amelyet a táplálkozási értékelés során használnak. Egy képzett dietetikus vizsgáló megkéri a szülőt vagy a gondozót, hogy idézzen fel minden ételt és italt, amelyet a résztvevő gyermek az előző 24 órában fogyasztott a vizsgálat két különböző időpontjában (a nem egymást követő napokon legalább 8-20 nap telik el a két feljegyzés között). megfelelő tájékoztatást kapni az élelmiszerek szokásos fogyasztásáról. A 24 órás visszahívást végző kutatók a lakossági alcsoportok táplálékbevitelét kívánják értékelni a 24 órás visszahívási adatokból. Ezen túlmenően a gyermekek táplálkozása, valamint a testösszetétel és az egészségjelzők közötti összefüggéseket vizsgálják. Az FPQ lehetővé teszi bizonyos releváns, ritkán fogyasztott élelmiszercsoportok becslését. Az adatok gyűjtése validált kérdőívekkel történik, számítógépes adatgyűjtési módszerek és feldolgozás segítségével. Az étrendi beviteli adatok kiértékelését a Jožef Stefan Institute (IJS) Open Platform for Clinical Nutrition (OPEN) diétás szoftvere végzi el. Az OPEN egy webalapú alkalmazás az étrend értékeléséhez és kezeléséhez, valamint továbbfejlesztve, hogy támogassa a 24 órás visszahívási/élelmiszernapló-módszert és az FPQ-kat, összhangban az EFSA páneurópai élelmiszer-fogyasztási felmérésével, más néven EU Menu módszertanával. Az OPEN egy hatékony, első szlovén web-alapú eszköz a helyi élelmiszerek alapján történő étrend-kiértékeléshez. Az OPEN lehetővé teszi a dietetikus számára, hogy minden résztvevő számára megadja az ételt és a mennyiséget. Az élelmiszerek, mennyiségek és készítmények OPEN-be való beírása után a program elemzést készít a táplálkozási információk bontásával.

A 6-7 éves résztvevők növekedésének, fejlődésének és egészségi állapotának felmérése az elvégzett klinikai vizsgálaton és az orvosi feljegyzésekből nyert adatokon alapul. A klinikai vizsgálat magában foglalja a klinikai állapot felmérését, az antropometriai méréseket, valamint a csont ásványianyag-sűrűségének kvantitatív ultrahangos mérését és a vérnyomás mérését.

A klinikai vizsgálatot az Egyetemi Gyermekkórházban, gyermekgyógyász szakorvos és vizsgálóbiológus végzi. Tartalmazza a klinikai állapot felmérését, az antropometriai méréseket és a csont ásványianyag-sűrűségének kvantitatív ultrahangos mérését. A csont ásványianyag-sűrűségét a jobb sípcsontnál mérjük a (QUS) Sunlight Omnisense (Sunlight Medical Ltd, Tel Aviv, Israel) segítségével, amely egyszerű, fájdalommentes és sugárzásmentes vizsgálat, amely információt ad a csontsűrűségről és a mikroarchitektúráról. A QUS azt az időt méri, amely alatt az ultrahangjel két adó és a szondában lévő két vevő között halad. Ezeket a terjedési időket egy szabadalmaztatott algoritmus használja a hang csontsebességének (SOS) meghatározására, amelyet méter per másodpercben (m/s) fejeznek ki. A szoftver a három legkonzisztensebb mérést használja az eredmény kiszámításához. Az eredményeket SOS- és Z-pontszámként veszik figyelembe (a standard deviáció mértékegységei az életkor és nem szerinti populáció referenciaértékeinek átlagához viszonyítva). A gyermekektől eltérően a felnőtteknél a méréseket egy sugárban végzik. Az antropometriához: a testmagasságot [cm] és a testtömeget [kg] egy hitelesített orvosi mérleggel mérik mezítláb és minimális ruházatban. A magasságmérés pontossága 0,1 cm, a tömegmérésé 0,1 kg lesz. A bőrredő vastagságát [mm] hat szabványos helyen mérik a szabványos módszertan szerint 0,1 mm-es pontossággal egy kalibrált, hitelesített bőrredő tolómérővel (Harpenden, Anglia). A kerületet [cm] egyszer a törzsön vagy a test jobb oldalán mérjük meg egy nem nyújtható keskeny mérőszalaggal (üvegszálas szalag, Kína) 0,1 cm-es pontossággal. A testösszetételre vonatkozó becslések a megszerzett táplálkozási adatokhoz kapcsolódnak.

Az aktuális egészségi állapottal (beleértve a vér koleszterinszintjét is) és a gyermek fejlődésével kapcsolatos egyéb információkat az orvosi dokumentációból szerezhet be. Ebből a célból a vizsgálók hozzáférést kérnek a gyermekorvosoktól a résztvevők egészségügyi dokumentációjához. Elemezni kell a rendszeres testi fejlődés esetleges megzavarására vonatkozó adatokat (gyorsult növekedés, gyengült növekedés, alacsony testtömeg és BMI túlsúly vagy elhízás esetén), valamint az allergiák és a kialakuló krónikus betegségek jelenlétét. A hangsúlyt a fertőzésekre, a gyógyszerbevitelre (antibiotikumos kezelésre) és a krónikus betegségekre is helyezik.

A gyermekek bélsár mikrobiótájának vizsgálata olyan molekuláris megközelítéseken fog alapulni, mint a kvantitatív valós idejű PCR (qPCR) és a következő generációs szekvenálás (NGS) a riboszómális ribonukleinsav (rRNS) génamplikonok 16-os szedimentációs koefficiens (16S) alegységének Illumina segítségével. technológia. Egy látszólag egészséges gyermekből egyetlen székletmintát vesznek a klinikai vizsgálat során. Előzetesen a szülőket postán és e-mailben megkapják a kódolt steril mintavételi edényekkel, fedőre erősített kanállal és mintavételi utasítással. Körülbelül 2 g (2 kanál) részt vevő gyermek ürülékét kell gyűjteni, lehetőleg a gyermekgyógyászati ​​klinikán való látogatás tervezett napján vagy egy nappal azelőtt. A mintákat a látogatásig hűtve/hűtve tárolják, és a klinikára érkezéskor az egészségügyi személyzet azonnal lefagyasztja -20 ˚C-ra. A begyűjtést követő egy hónapon belül a -20 ˚C-os fagyasztott székletmintákat a laboratóriumba szállítják, és -80 ˚C-on tárolják a mikrobiális elemzések elvégzéséig. A My-Milk projekt első részében is alkalmazott QPCR és 16S rRNS amplikon szekvenálási módszerek alkalmasak a teljes baktériumközösségek közötti biodiverzitás és a széklet mikrobióta összetételének felmérésére, valamint az egyes fajok mennyiségi ingadozásának értékelésére. célcsoportok az összetett mikrobiális ökoszisztémákban, például a gyomor-bél traktusban.

A 6-7 éves résztvevők táplálkozási adatait a testösszetétel (csontsűrűség, zsírszázalék és izomszövet), az egészségi markerek (vérnyomás, vérkoleszterin) és a széklet mikrobiota összefüggésében vizsgálják. A szekvenált leolvasások minőségellenőrzése után a széklet mikrobiom biodiverzitása és a bakteriális taxonok relatív abundanciája kerül megállapításra, és olyan biológiai sokféleség méréseket végeznek, mint a Chao1 pontszám és a Shannon diverzitási index.

Ezt követően minden adat a központi adatbázisba kerül a My-Milk vizsgálat első részében már megszerzett adatokkal együtt. A megfelelő statisztikai elemzést a korai életkor kitettségének a későbbi növekedésre, tápláltsági állapotra, egészségi állapotra és a széklet mikrobiotára gyakorolt ​​hatásának vizsgálatára alkalmazzuk a jelenlegi 6-7 éves résztvevőknél. A központi adatbázis lehetővé teszi (a) védett hozzáférést a már összegyűjtött információkhoz; b) új attribútumok hozzáadása és c) adatok exportálása statisztikai elemzés céljából. Az adatbázis nem tartalmaz személyi azonosítót (az alanyokat csak azonosító számok kódolják). A My-Milk tanulmányból összegyűjtött adatok nagy része már elektronikus formába került. A statisztikai módszertan két lépésből áll: az első feltáró lépés, amely az adatok ellenőrzéséből, grafikus megjelenítéséből és a magasabb dimenziós tér alacsonyabb dimenziós térré történő redukálásából áll többváltozós statisztikai módszerekkel, például főkomponens-analízissel és többváltozós skálázással; a második lépést a statisztikai következtetésnek szentelik. A megfelelő statisztikai teszteket alkalmazzuk, a kutatási hipotézisek figyelembevételével regressziós modelleket állítunk elő. A tesztek teljesítményét modern szimulációs technikákkal (pl. bootstrap megközelítés) számítják ki, és a modelleket kritikusan értékelik.