NUTRIPROTECT-La nutrición infantil como factor protector o de riesgo para la salud (My-Milk-2)

La nutrición puede actuar como factor de riesgo o de protección en el desarrollo de una serie de enfermedades no transmisibles. Si bien tales efectos se establecieron para todo el ciclo de vida, la nutrición en los primeros años de vida puede ser particularmente relevante por su impacto a largo plazo en la salud de la vida posterior. Los datos científicos confiables sobre las ingestas dietéticas y el estado nutricional de la muestra de población que representa sirven como base para dilucidar el papel que los factores nutricionales específicos ejercen sobre la salud humana. El trasfondo científico del proyecto de investigación aplicativa propuesto se basa en el hecho de que los estudios que siguen el vínculo entre la nutrición temprana, la microbiota intestinal inicial y el desarrollo de los niños, durante un período de tiempo más largo, son limitados. Por lo tanto, los principales desafíos científicos abordados se centran en los efectos de la nutrición temprana en el crecimiento y la salud de los niños participantes, y en investigar la relación entre varios marcadores de salud.

Si bien el programa de trabajo de este estudio prospectivo aplicativo multidisciplinario se centrará en los niños, estará estrechamente relacionado con el anterior proyecto "My-Milk" (SRA J43606; finalizado en el año 2013), donde se analiza el papel de la nutrición temprana en el desarrollo de Se investigó a niños amamantados y su microbiota intestinal, durante el primer año de vida. Este estudio se realizará dentro de la población de 6-7 años incluida en el primer estudio "My-Milk". El estudio caracterizará los factores modificadores clave durante los primeros años de vida del participante (definidos a través de variables maternas (IMC antes del embarazo, aumento de peso durante el embarazo, nutrición durante el embarazo y la lactancia, composición de ácidos grasos de la leche humana y concentración de vitamina D en suero) y variables infantiles (duración de la lactancia y tratamientos antibióticos, microbiota fecal al primer mes, antropometría y densidad mineral ósea en el período neonatal)) sobre el estado nutricional de los participantes a los 6-7 años. El estado nutricional actual estará definido por la ingesta dietética del participante, la antropometría, la composición corporal (densidad ósea, porcentaje de grasa y tejido muscular), la salud (presión arterial, colesterol en sangre, frecuencia y gravedad de las infecciones) y la microbiota fecal.

La población del estudio invitada a participar incluirá a todos los hijos únicos de madres que completaron la parte detallada del estudio My-Milk al primer año de edad del niño (N=147). Teniendo en cuenta una tasa de abandono muy baja en la primera parte detallada del estudio My-Milk (33 madres participantes de 185, aproximadamente el 18 por ciento), los investigadores esperan que responda al menos el 70-75 por ciento de los participantes invitados, es decir, entre 100 - 110 niños pueden inscribirse en el estudio. Esta población representará el 0,5 por ciento de los niños nacidos en 2011 (21947 niños - datos estadísticos de Eslovenia).

Se medirán y evaluarán los siguientes parámetros: la nutrición de los niños mediante el uso de la metodología estándar de evaluación dietética para niños y adultos/población de edad avanzada según lo dispuesto en la guía de la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria (EFSA). Es decir, la encuesta de consumo de alimentos se llevará a cabo a nivel individual mediante un diario de alimentos repetido de 24 horas y el método de entrevista personal / telefónica asistida por computadora (CAPI / CATI) y mediante el Cuestionario general de apoyo y el Cuestionario de propensión alimentaria (FPQ) según PANCAKE. - Estudio piloto para la evaluación de la ingesta de nutrientes y el consumo de alimentos entre los niños en Europa. La entrevista estructurada de recuerdo de la dieta de 24 horas es un método de investigación cuantitativo utilizado en la evaluación nutricional. Un investigador dietista capacitado le pedirá a un padre o cuidador que recuerde todos los alimentos y bebidas que el niño participante consumió durante las 24 horas anteriores en dos puntos de tiempo diferentes durante el estudio (días no consecutivos al menos 8 a 20 días entre los dos registros) recibir la información adecuada sobre la ingesta habitual de alimentos. A partir de los datos obtenidos por recordatorio de 24 horas, los investigadores tienen la intención de evaluar las ingestas nutricionales de los subgrupos de población. Además, se estudiarán las conexiones entre la nutrición de los niños y la composición corporal y los marcadores de salud. El FPQ permitirá la estimación de ciertos grupos de alimentos relevantes y de consumo poco frecuente. Los datos se recopilarán utilizando cuestionarios validados utilizando métodos de recopilación y procesamiento de datos asistidos por computadora. La evaluación de los datos de ingesta dietética se realizará mediante el software dietético Open Platform for Clinical Nutrition (OPEN) del Instituto Jožef Stefan (IJS). OPEN es una aplicación basada en la web para la evaluación y el tratamiento de la dieta, además de actualizarse para admitir el método de registro de alimentos/diario de alimentos de 24 horas y las FPQ en línea con la metodología de la encuesta paneuropea de consumo de alimentos de la EFSA, también conocida como menú de la UE. OPEN es la primera herramienta eslovena eficiente basada en la web para la evaluación dietética basada en los alimentos locales. OPEN permite que el dietista ingrese los alimentos y las cantidades para cada participante. Después de ingresar los alimentos, las cantidades y las preparaciones en el OPEN, el programa crea un análisis con el desglose de la información nutricional.

La evaluación del estado de crecimiento, desarrollo y salud en participantes de 6 a 7 años se basará en el examen clínico realizado y los datos obtenidos de los registros médicos. El examen clínico incluirá la evaluación del estado clínico, mediciones antropométricas y mediciones cuantitativas de ultrasonido de la densidad mineral ósea y la medición de la presión arterial.

El examen clínico se realizará en el Hospital Infantil Universitario y será realizado por un médico especialista en pediatría y biólogo investigador. Incluirá la evaluación del estado clínico, mediciones antropométricas y mediciones cuantitativas por ultrasonido de la densidad mineral ósea. La densidad mineral ósea se medirá en la tibia derecha utilizando el (QUS) Sunlight Omnisense (Sunlight Medical Ltd, Tel Aviv, Israel), que es una investigación simple, indolora y libre de radiación y brinda información sobre la densidad ósea y la microarquitectura. El QUS mide el tiempo que tarda la señal de ultrasonido en viajar entre dos transmisores y dos receptores contenidos dentro de la sonda. Estos tiempos de propagación son utilizados por un algoritmo patentado para determinar la velocidad ósea del sonido (SOS), que se expresa en metros por segundo (m/s). El software utilizará las tres medidas más consistentes para calcular el resultado. Los resultados se tomarán como SOS y puntuación Z (unidades de desviaciones estándar relativas a la media para valores de referencia poblacionales emparejados por edad y sexo). A diferencia de los niños, en los adultos las medidas se toman sobre un radio. Para la antropometría: la altura [cm] y la masa corporal [kg] se medirán con una báscula médica certificada descalzo y con ropa mínima. La precisión de una medida de altura será de 0,1 cm y de una medida de masa de 0,1 kg. Los espesores de los pliegues cutáneos [mm] en seis ubicaciones estándar se medirán de acuerdo con la metodología estandarizada con una precisión de 0,1 mm mediante un calibrador de pliegues cutáneos certificado y calibrado (Harpenden, Inglaterra). Las circunferencias [cm] se medirán una vez en el tronco o en el lado derecho del cuerpo con una cinta métrica estrecha no estirable (cinta de fibra de vidrio, China) con una precisión de 0,1 cm. Las estimaciones de la composición corporal estarán vinculadas a los datos nutricionales adquiridos.

Otra información sobre el estado de salud actual (incluido el colesterol en sangre) y el desarrollo del niño se obtendrá de la documentación médica. Para ello, los investigadores solicitarán a los pediatras el acceso a las historias clínicas de los participantes. Se analizarán los datos sobre la eventual interrupción de un desarrollo físico regular (el crecimiento acelerado, el crecimiento atenuado, la baja masa corporal y el IMC por sobrepeso u obesidad), y sobre la presencia de alergias y enfermedades crónicas emergentes. También se hará hincapié en las infecciones, la toma de medicamentos (tratamientos antibióticos) y las enfermedades crónicas.

El estudio de la microbiota fecal infantil se basará en enfoques moleculares como la PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) y la secuenciación de próxima generación (NGS) de la subunidad del coeficiente de sedimentación 16 (16S) de los amplicones del gen del ácido ribonucleico ribosómico (ARNr) utilizando Illumina tecnología. En el examen clínico se recolectará una sola muestra fecal de un niño aparentemente sano. Previamente, los padres recibirán los recipientes de muestreo estériles codificados con una cuchara adherida a la tapa y las instrucciones de muestreo por correo postal y electrónico. Se les pedirá que recolecten aproximadamente 2 g (2 cucharadas) de las heces del niño participante, posiblemente el día planificado de la visita a la clínica pediátrica o un día antes. Las muestras se mantendrán refrigeradas/refrigeradas hasta la visita y serán congeladas inmediatamente a -20 ˚C a su llegada a la clínica por el personal médico. Dentro de un mes después de su recolección, las muestras fecales congeladas a -20 ˚C se transferirán al laboratorio y se almacenarán a -80 ˚C hasta la realización de los análisis microbianos. Los métodos de secuenciación de amplicón QPCR y 16S rRNA, también aplicados en la primera parte del proyecto My-Milk, son adecuados para la evaluación de la biodiversidad entre las comunidades bacterianas totales y la composición de la microbiota fecal, así como para la evaluación de las fluctuaciones cuantitativas de especies específicas. grupos objetivo en los complejos ecosistemas microbianos como el tracto gastrointestinal.

Los datos sobre la nutrición de los participantes de 6 a 7 años se estudiarán en relación con la composición corporal (densidad ósea, porcentaje de grasa y tejido muscular), marcadores de salud (presión arterial, colesterol en sangre) y microbiota fecal. Después del control de calidad de las lecturas secuenciadas, se obtendrá la biodiversidad del microbioma fecal y la abundancia relativa de taxones bacterianos y se calcularán medidas de biodiversidad como la puntuación Chao1 y el índice de diversidad de Shannon.

Posteriormente, todos los datos se depositarán en la base de datos central junto con los ya obtenidos durante la primera parte del estudio My-Milk. Se aplicará el análisis estadístico apropiado para investigar el impacto de las exposiciones tempranas en el crecimiento posterior, el estado nutricional, la salud y la microbiota fecal en los participantes de la edad actual de 6 a 7 años. La base de datos central permitirá (a) el acceso protegido a la información ya recopilada; (b) adición de nuevos atributos y (c) exportación de datos con fines de análisis estadístico. La base de datos no contendrá identificaciones personales (los sujetos serán codificados solo por números de identificación). La mayoría de los datos recopilados del estudio My-Milk ya se han convertido a formato electrónico. La metodología estadística constará de dos pasos: el primer paso exploratorio, que consiste en la verificación de datos, presentaciones gráficas y reducción del espacio dimensional superior al espacio dimensional inferior a través de métodos estadísticos multivariados, como el análisis de componentes principales y el escalado multivariado; el segundo paso estará dedicado a la inferencia estadística. Se utilizarán las pruebas estadísticas adecuadas, se derivarán modelos de regresión teniendo en cuenta las hipótesis de investigación. Se calculará la potencia de las pruebas y los modelos se evaluarán críticamente mediante modernas técnicas de simulación (p. ej., enfoque de arranque).