НУТРИПРОТЕКТ-Детское питание как защитный фактор или фактор риска для здоровья (My-Milk-2)

Питание может действовать как фактор риска или как защитный фактор в развитии ряда неинфекционных заболеваний. Хотя такие эффекты были установлены для всего жизненного цикла, питание в раннем возрасте может иметь особое значение из-за его долгосрочного воздействия на здоровье в более позднем возрасте. Надежные научные данные о потреблении пищи и состоянии питания репрезентативной выборки населения служат основой для выяснения роли конкретных факторов питания, влияющих на здоровье человека. Научная основа предлагаемого прикладного исследовательского проекта основана на том факте, что исследования, отслеживающие связь между ранним питанием, исходной кишечной микробиотой и развитием детей в течение более длительного периода времени, ограничены. Таким образом, ключевые научные задачи сосредоточены на влиянии питания в раннем возрасте на рост и здоровье участвующих детей, а также на изучении взаимосвязи между различными маркерами здоровья.

Хотя рабочая программа этого междисциплинарного прикладного проспективного исследования будет сосредоточена на детях, оно будет тесно связано с бывшим проектом «Мое молоко» (SRA J43606; завершен в 2013 г.), в котором изучалась роль раннего питания в развитии Исследовали детей, находящихся на грудном вскармливании, и микробиоту их кишечника в течение первого года жизни. Это исследование будет проводиться среди детей в возрасте 6-7 лет, включенных в первое исследование «Мое молоко». В исследовании будут охарактеризованы ключевые модифицирующие факторы в раннем периоде жизни участников (определяемые через материнские переменные (ИМТ до беременности, увеличение веса во время беременности, питание во время беременности и лактации, состав жирных кислот грудного молока и концентрация витамина D в сыворотке) и младенческие переменные. (продолжительность грудного вскармливания и лечения антибиотиками, фекальная микробиота в первый месяц, антропометрические показатели и минеральная плотность костей в неонатальном периоде)) на статус питания участников в возрасте 6-7 лет. Текущий статус питания будет определяться рационом участников, антропометрическими данными, составом тела - плотностью костей, процентом жира и мышечной ткани), состоянием здоровья (артериальное давление, уровень холестерина в крови, частота и тяжесть инфекций) и фекальной микробиотой.

В число участников исследования, приглашенных для участия, будут входить все одноплодные дети матерей, которые завершили детальную часть исследования My-Milk в возрасте первого года жизни ребенка (N=147). Учитывая очень низкий процент отсева в первой подробной части исследования «Мое молоко» (33 участвующие матери из 185, примерно 18 процентов), исследователи ожидают, что откликнутся по крайней мере 70-75 процентов приглашенных участников, то есть между В исследование могут быть включены 100-110 детей. Это население будет составлять 0,5 процента детей, родившихся в 2011 году (21947 детей - статистические данные по Словении).

Будут измеряться и оцениваться следующие параметры: питание детей с использованием стандартной методологии оценки питания детей и взрослых/пожилого населения, как указано в руководстве Европейского агентства по безопасности пищевых продуктов (EFSA). А именно, обследование потребления продуктов питания будет проводиться на индивидуальном уровне с помощью повторного 24-часового дневника питания и метода персонального/телефонного опроса с помощью компьютера (CAPI/CATI), а также с помощью вспомогательного общего вопросника и вопросника о пищевых предпочтениях (FPQ) в соответствии с PANCAKE. - Пилотное исследование по оценке потребления питательных веществ и продуктов питания среди детей в Европе. 24-часовое структурированное интервью с воспоминаниями о диете — это метод количественного исследования, используемый для оценки питания. Обученный диетолог-исследователь попросит родителя или опекуна вспомнить все продукты и напитки, которые участвующий ребенок употреблял в течение предыдущих 24 часов в два разных момента времени во время исследования (непоследовательные дни, по крайней мере, 8–20 дней между двумя записями). получить надлежащую информацию о привычном приеме пищи. На основе данных, полученных с помощью 24-часового отзыва, исследователи намерены оценить потребление питательных веществ подгруппами населения. Кроме того, будут изучены связи питания детей с составом тела и маркерами здоровья. FPQ позволит оценить определенные релевантные, редко потребляемые группы продуктов питания. Данные будут собираться с использованием утвержденных вопросников с использованием компьютерных методов сбора и обработки данных. Оценка данных о потреблении пищи будет проводиться с помощью диетического программного обеспечения Open Platform for Clinical Nutrition (OPEN) Института Йожефа Стефана (IJS). OPEN — это веб-приложение для оценки и лечения диеты, а также модернизированное для поддержки метода 24-часового вспоминания/пищевого дневника и FPQ в соответствии с общеевропейским исследованием потребления продуктов питания EFSA, также известным как методология меню ЕС. OPEN — это первый в Словении эффективный веб-инструмент для оценки питания на основе местных продуктов питания. OPEN позволяет диетологу вводить пищу и количество для каждого участника. После того, как в OPEN введены продукты питания, количество и приготовление, программа создает анализ с разбивкой информации о питании.

Оценка роста, развития и состояния здоровья участников 6-7 лет будет основываться на проведенном диспансерном обследовании и данных, полученных из медицинских карт. Клиническое обследование будет включать оценку клинического состояния, антропометрические измерения, количественные ультразвуковые измерения минеральной плотности костей и измерение артериального давления.

Клиническое обследование будет проводиться в Детской университетской больнице врачом-педиатром и следователем-биологом. Он будет включать оценку клинического состояния, антропометрические измерения и количественные ультразвуковые измерения минеральной плотности костей. Минеральная плотность кости будет измеряться на правой большеберцовой кости с помощью (QUS) Sunlight Omnisense (Sunlight Medical Ltd, Тель-Авив, Израиль), который является простым, безболезненным и безрадиационным исследованием и дает информацию о плотности кости и микроархитектуре. QUS измеряет время прохождения ультразвукового сигнала между двумя передатчиками и двумя приемниками внутри зонда. Это время распространения используется запатентованным алгоритмом для определения костной скорости звука (SOS), которая выражается в метрах в секунду (м/с). Программное обеспечение будет использовать три наиболее последовательных измерения для вычисления результата. Результаты будут приняты как показатель SOS и Z (единицы стандартного отклонения по отношению к среднему значению референтных значений для соответствующего возраста и пола населения). В отличие от детей, у взрослых измерения снимаются по радиусу. Для антропометрии: рост тела [см] и масса тела [кг] будут измеряться сертифицированными медицинскими весами босиком и в минимальной одежде. Точность измерения роста будет 0,1 см, а измерения массы 0,1 кг. Толщина кожной складки [мм] в шести стандартных точках будет измеряться в соответствии со стандартизированной методикой с точностью 0,1 мм калиброванным сертифицированным штангенциркулем для кожных складок (Harpenden, Англия). Окружность [см] будет измерена один раз на туловище или на правой стороне тела с помощью нерастяжимой узкой измерительной ленты (рулетка из стекловолокна, Китай) с точностью до 0,1 см. Оценки состава тела будут связаны с полученными данными о питании.

Прочие сведения о текущем состоянии здоровья (включая уровень холестерина в крови) и развитии ребенка будут получены из медицинской документации. Для этого следователи запросят у педиатров доступ к медицинским картам участников. Анализируются данные о возможном нарушении нормального физического развития (ускоренный рост, замедление роста, низкая масса тела и ИМТ при избыточной массе тела или ожирении), а также о наличии аллергии и возникающих хронических заболеваний. Особое внимание будет также уделено инфекциям, приему лекарств (антибиотиков) и хроническим заболеваниям.

Изучение фекальной микробиоты детей будет основываться на молекулярных подходах, таких как количественная ПЦР в реальном времени (кПЦР) и секвенирование нового поколения (NGS), секвенирование субъединицы с коэффициентом седиментации 16 (16S) ампликонов гена рибосомальной рибонуклеиновой кислоты (рРНК) с использованием Illumina. технологии. При клиническом осмотре будет взята одна проба кала внешне здорового ребенка. Предварительно родители получат кодированные стерильные контейнеры для отбора проб с ложкой, прикрепленной к крышке, и инструкцию по отбору проб по почте и электронной почте. Им будет предложено собрать примерно 2 г (2 ложки) фекалий участвующих детей, возможно, в запланированный день посещения педиатрической клиники или за день до этого. Образцы будут храниться в холодильнике/охлаждении до визита и будут немедленно заморожены при температуре -20 ˚C по прибытии медицинского персонала в клинику. В течение месяца после сбора образцы фекалий, замороженные при температуре -20 ˚C, будут переданы в лабораторию и будут храниться при -80 ˚C до проведения микробиологического анализа. Методы КПЦР и секвенирования ампликонов 16S рРНК, также примененные в первой части проекта My-Milk, подходят для оценки биоразнообразия среди общих бактериальных сообществ и состава фекальной микробиоты, а также для оценки количественных колебаний специфических целевых групп в сложных микробных экосистемах, таких как желудочно-кишечный тракт.

Данные о питании 6-7-летних участников будут изучены в связи с составом тела (плотность костей, процентное содержание жира и мышечной ткани), маркерами здоровья (артериальное давление, уровень холестерина в крови) и фекальной микробиотой. После контроля качества секвенированных ридов будет получено биоразнообразие фекального микробиома и относительная численность бактериальных таксонов, а также будут рассчитаны такие показатели биоразнообразия, как оценка Chao1 и индекс разнообразия Шеннона.

После этого все данные будут помещены в центральную базу данных вместе с уже полученными в ходе первой части исследования My-Milk. Соответствующий статистический анализ будет применяться при изучении влияния экспозиций в раннем возрасте на более поздний рост, состояние питания, здоровье и фекальную микробиоту участников в возрасте 6-7 лет. Центральная база данных позволит (а) защищенный доступ к уже собранной информации; (б) добавление новых атрибутов и (в) экспорт данных для целей статистического анализа. База данных не будет содержать каких-либо личных идентификаторов (субъекты будут кодироваться только идентификационными номерами). Большинство собранных данных исследования My-Milk уже переведены в электронный вид. Статистическая методология будет состоять из двух этапов: первый исследовательский этап, который состоит из проверки данных, графического отображения и преобразования пространства более высокого измерения в пространство более низкого измерения с помощью многомерных статистических методов, таких как анализ основных компонентов и многомерное масштабирование; второй шаг будет посвящен статистическому выводу. Будут использованы соответствующие статистические тесты, построены регрессионные модели с учетом гипотез исследования. Мощность тестов будет рассчитана, а модели подвергнуты критической оценке с использованием современных методов моделирования (например, бутстрэп-подход).